ОБЗОРЫ | ОБЩИЕ ВОПРОСЫ
При создании в 1958 г. Всесоюзного научно-исследовательского ящурного института (ВНИЯИ) был организован активный поиск с целью привлечения в штат организации профильных специалистов и научных сотрудников. На заре своего становления ВНИЯИ комплектовался главным образом за счет выпускников Московской ветеринарной академии имени К. И. Скрябина, а также из ветеринарных институтов Харькова, Ленинграда, Витебска. Позже во ВНИЯИ прибыли выпускники Горьковского университета, Казанского и Ивановского ветеринарных институтов, Владимирского педагогического института и многих других. В 1963 г. во ВНИЯИ начали подготовку научных сотрудников через аспирантуру и соискательство. Ведущим ученым организации решением Высшей аттестационной комиссии СССР было разрешено научное руководство аспирантами. С 1976 г. начал работу специализированный совет по защите кандидатских диссертаций, а с 1996 г. – диссертаций на соискание ученой степени доктора наук. В состав кандидатского специализированного совета вошли доктора и кандидаты наук, сотрудники ВНИЯИ, а также доктора наук из покровского ВНИИВВиМ (Н. И. Архипов, И. Ф. Вишняков, В. М. Колосов, Н. А. Лагуткин, Ю. И. Петров, Г. А. Сафонов, Г. Г. Юрков). В 1996 г. диссертационный совет был расширен и для работы в его составе были приглашены авторитетные ученые: доктора наук из ВНИИВВиМ (Е. М. Хрипунов, М. А. Дымин), сотрудники ВГНКИ (К. Н. Груздев, А. Н. Панин, В. И. Уласов, К. В. Шумилов), сотрудники Департамента ветеринарии МСХ РФ (О. И. Сухарев) и Российского университета дружбы народов (В. В. Макаров). В данной статье представлены краткие сведения о подготовке научных кадров для научных и производственных лабораторий института, о работе аспирантуры, системе соискательства, диссертационном совете по защите докторских и кандидатских диссертаций.
БОЛЕЗНИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Основная тенденция развития молочного животноводства в Российской Федерации предусматривает увеличение продуктивности коров молочных пород и снижение себестоимости молока. Экономическая эффективность промышленного молочного животноводства во многом определяется полноценным кормлением, эффективной системой мероприятий по обеспечению здоровья животных и профилактике инфекционных и массовых незаразных болезней. Главной причиной преждевременного выбытия высокопродуктивных коров являются факторы, присущие используемым в молочном скотоводстве интенсивным технологиям, приводящим к возникновению метаболических заболеваний. Установлено, что интенсивность обмена веществ имеет прямую связь с высокой продуктивностью животных. При высококонцентратном, в основном силосно-концентратном, типе кормления часто регистрируется дисбаланс питательных веществ, особенно по сахаро-протеиновому отношению, что приводит к возникновению глубоких нарушений обмена веществ и развитию иммунодефицитных состояний. Метаболические нарушения у высокопродуктивных коров возникают на фоне рационов, несбалансированных по белку, углеводам, витаминам и минеральным веществам. У больных коров и нетелей регистрируются ацидоз, руминит и гепатоз. У 70–75% коров сервис-период превышает 100 дней. У телят, полученных от коров с признаками глубоких нарушений обмена веществ, часто регистрируется гепатоз и иммунодефицитное состояние. Нарушения обмена веществ часто остаются незамеченными и становятся очевидными лишь при ярко выраженных патологических изменениях, которые приводят к снижению продуктивности и способности воспроизведения резистентного молодняка, выбраковке животных. При обследовании коров в крупных молочных животноводческих хозяйствах метаболические заболевания были зарегистрированы у 30–70% животных. В России средняя продолжительность хозяйственного использования высокопродуктивных коров составляет (2,1 ± 0,15) лактаций. Как показали результаты эпизоотологических расследований и данные лабораторных исследований проб сывороток крови, при иммунизации крупного рогатого скота с иммунодефицитным состоянием эмульсионные инактивированные вакцины индуцируют в организме образование вирусспецифических антител в более высоких титрах, чем у животных, привитых сорбированными препаратами.
По современным представлениям ацидоз рубца и метаболический ацидоз являются следствием кормления крупного рогатого скота преимущественно консервированными кислыми кормами, такими как силос и сенаж. Вместе с тем погрешности в кормлении не единственный этиологический фактор, приводящий к ацидозу. В ряде случаев у крупного рогатого скота метаболический ацидоз может развиваться на фоне респираторной патологии, вызываемой вирусными и бактериальными агентами. Основными патологическими процессами, вызываемыми острыми респираторными заболеваниями крупного рогатого скота, являются бронхиты, трахеиты и пневмонии. При поражении респираторного тракта в организме животных возникает гипоксия, что ведет к развитию эндогенной интоксикации, приводящей к ацидозу рубца, в результате чего в кровь поступают сосудисто-активные вещества (эндотоксины бактерий, гистамин, лактат), за счет одновременного расширения артериол и сжатия венул повреждается эндотелий сосудов, наблюдается перфузия из сосудов в окружающие ткани жидкости крови, нарушается кровоток в микроциркуляторном русле. Немаловажную роль в нарушении циркуляции крови в мелких кровеносных сосудах играют циркулирующие иммунные комплексы, представляющие собой комплекс антиген – антитело. Низкомолекулярные циркулирующие иммунные комплексы, оседая в разнообразных органах и тканях организма, приводят к воспалению и повреждают нормальную структуру тканей. Наиболее часто иммунные комплексы поражают эндотелий кровеносных сосудов, почечные клубочки и суставы. У крупного рогатого скота в первую очередь поражаются сосуды дистального отдела конечностей, что ведет к нарушению трофики кожи конечностей и копытец, развивается ламинит, при этом копытный рог слабо кератинизирован и не может противостоять агрессивным механическим и химическим факторам внешней среды. Поврежденные копытца являются воротами инфекции для возбудителей некробактериоза (Fusobacterium necrophorum), стафилококкоза (Staphylococcus spp.), стрептококкоза (Streptococcus spp.) и других патогенов. Кроме того, благоприятные условия для развития микст-инфекции создаются за счет снижения общей резистентности организма, что отмечается как при респираторной патологии, так и при патологии дистального отдела конечностей.
БОЛЕЗНИ СВИНЕЙ
Специфическая профилактика является одним из наиболее эффективных методов борьбы с инфекционными заболеваниями, наносящими значительный экономический ущерб промышленным свиноводческим хозяйствам, к числу которых относится актинобациллезная плевропневмония свиней. Для повышения эффективности вакцинопрофилактики применяются различные иммуномодулирующие средства, отличающиеся по происхождению и механизму действия. В статье представлены результаты изучения влияния препаратов биферона-С и простимула, содержащих видоспецифичные рекомбинантные интерфероны, на иммунный статус поросят при специфической профилактике актинобациллезной плевропневмонии. Исследования проведены на клинически здоровых поросятах 30–35-суточного возраста, иммунизированных вакциной Ingelvac® APPX (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Германия). Установлено, что применение биферона-С и простимула одновременно с введением вакцины сопровождается повышением иммунного статуса животных, проявляющимся увеличением по сравнению с базовым вариантом содержания в сыворотке крови γ-глобулинов на 34,6 и 53,7% (при назначении простимула и β-глобулинов – на 10,1%), общих иммуноглобулинов – на 32,8 и 37,8%, крупных циркулирующих иммунных комплексов – на 37,5 и 52,6%, менее значимым увеличением комплексов мелких размеров и снижением в результате этого коэффициента патогенности на 5,4 и 12,4% соответственно. Исследование напряженности поствакцинального иммунитета у поросят показало, что уровень специфических антител к антигену возбудителя актинобациллезной плевропневмонии повысился в 3,8 раза, а при введении вакцины в сочетании с бифероном-С и простимулом – в 4,0 и 4,9 раза соответственно. Применение простимула сопровождалось более существенным повышением иммунного статуса у поросят, обусловленным наличием в его составе кроме рекомбинантного цитокина первого типа витаминов А, Е и С, обладающих антиоксидантными свойствами, повышающих эффективность интерферонов, естественную резистентность и специфический иммунитет.
Везикулярная болезнь свиней – инфекционная вирусная болезнь, сопровождающаяся при остром течении клинической картиной, общей для ряда заболеваний с везикулярным синдромом, включая ящур. При субклиническом течении явные признаки болезни отсутствуют, что затрудняет постановку диагноза и может создавать угрозу заноса инфекционного заболевания на территорию Российской Федерации с инфицированными свиньями. Основной мерой предотвращения заноса везикулярной болезни свиней является проведение контрольных диагностических исследований всех ввозимых на территорию страны животных, что требует постоянного поддержания в актуальном состоянии используемых методов и средств лабораторной диагностики заболевания. В статье представлены данные по экспериментальному заражению естественно восприимчивых животных штаммом «№ 2348 Италия/2008» вируса везикулярной болезни свиней, принадлежащего к наиболее поздней из четырех известных филогенетических групп. Вирус получен из Всемирной справочной лаборатории по ящуру (Пирбрайт, Великобритания) и адаптирован к перевиваемым монослойным культурам клеток свиного происхождения IB-RS-2 и ПСКГ-30. Свиней заражали интрадермально концентрированным культуральным вирусом в дозе 109 ТЦД50. У зараженных животных наблюдали клинические признаки, характерные для острого течения болезни. Показано отсутствие передачи вируса интактному животному при соблюдении условий содержания, предотвращающих фекально-оральный и контактный механизмы передачи инфекции. В результате опыта получены референтные образцы сыворотки крови свиней в разные сроки после инфицирования, определена их активность в реакции микронейтрализации вируса в культуре клеток и в иммуноферментном анализе. Отобранный от зараженных животных афтозный материал заложен на хранение в рабочую коллекцию штаммов микроорганизмов референтной лаборатории диагностики ящура ФГБУ «ВНИИЗЖ».
В работе представлены результаты сравнения 12 отечественных диагностических наборов/ПЦР-тест-систем для выявления ДНК вируса африканской чумы свиней по таким показателям, как полнота и грамотность инструкций по применению; маркировка и комплектация; удобство использования наборов; стабильность работы реагентов в течение срока хранения; стабильность реагентов после транспортировки и многократного замораживания – оттаивания; межсерийная сходимость; чувствительность при тестировании различного материала и специфичность наборов. Изучение инструкций по применению и комплектации наборов выявило неполноту некоторых инструкций. Отмечено, что отдельные производители допускают в инструкциях серьезные ошибки, которые могут существенно повлиять на интерпретацию результатов исследования. Также отмечена недостаточность контроля производственного процесса, результатом которой является выпуск неработоспособных наборов, а также наборов с низким качеством компонентов и ошибками в их маркировке. Так, при проведении исследования один набор показал свою неработоспособность, демонстрируя отсутствие кривых накопления флуоресцентного сигнала как при амплификации положительных контролей, так и ДНК изолятов вируса АЧС. При оценке специфичности все наборы показали отсутствие неспецифических реакций и приемлемую чувствительность при тестировании различных типов материала (крови, суспензий свиной селезенки и черевы свиной, используемой при производстве колбасных изделий), содержащих вирус АЧС. Проверка стабильности показала резкое ухудшение качества работы одного набора в пределах срока годности, для другого набора выявлено существенное снижение уровня флуоресцентного сигнала при многократном замораживании – оттаивании. Сравнение сходимости результатов работы разных серий наборов одного производителя показало существенные расхождения для 41,5% наборов. Установлено, что лишь у 33% рассмотренных наборов для выявления ДНК вируса АЧС отсутствуют какие-либо недостатки. Результаты проведенной работы демонстрируют необходимость контроля выпускаемых диагностических наборов, используемых в государственных программах мониторинга заболеваний животных.
Одной из мер борьбы с распространением и профилактики африканской чумы свиней в Российской Федерации является проведение исследований проб, отбираемых от свиней и кабанов, в том числе серологическими методами с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) для качественного определения содержания антител к вирусу. При этом в настоящее время на территории страны не существует нормативного документа, регламентирующего условия хранения проб сыворотки крови для постановки ИФА при определении содержания антител к вирусу АЧС. Также отсутствуют литературные данные о максимально допустимом сроке хранения проб сыворотки крови свиней, а влияние условий хранения на серологический статус сывороток крови домашних свиней в отношении АЧС изучено недостаточно. В статье представлены результаты эксперимента по определению влияния температурных режимов и длительности хранения серопозитивных и серонегативных в отношении вируса АЧС сывороток крови домашних свиней на их серологический статус при постановке тест-системой INgezim PPA Compac (Ingenasa, Испания) для твердофазного ИФА и вероятности получения ложных результатов. В ходе выполнения работы и анализа результатов получены новые данные, свидетельствующие об отсутствии или незначительном влиянии моделируемых режимов хранения на определение серологического статуса качественных проб сывороток крови в отношении вируса АЧС, в то время как гемолизированные пробы показали более заметное изменение, пропорциональное степени гемолиза и длительности хранения. Несмотря на то что полученные результаты по обнаружению антител к возбудителям одних болезней не применимы для других патогенов, данное исследование имеет существенное прикладное значение, позволяя установить зависимость получения достоверных результатов при серодиагностике АЧС от условий хранения проб.
БОЛЕЗНИ ПТИЦ
В связи с генетическим разнообразием вирусов низкопатогенного гриппа птиц Н9N2 представлялось целесообразным изучение иммуногенной активности вакцин, изготовленных на основе антигенов штаммов А/chicken/Amursky/03/12 и A/chicken/Chelyabinsk/314-1/20 – представителей генетических линий Y280 и G1 соответственно, циркулирующих на территории Российской Федерации. Поскольку низкая патогенность возбудителя не позволяет продемонстрировать протективные свойства вакцин прямыми методами оценки иммуногенности препаратов (например, заболеваемость и смертность), применяли косвенные методы: определение антигенной родственности штаммов, напряженности поствакцинального гуморального гомо- и гетеро-логичного иммунитета птиц, оценка подавления (редукции) синтеза генома вируса после контрольного заражения в организме вакцинированных птиц. Было установлено, что использованные в составе вакцин штаммы имели некоторые антигенные различия, которые были обнаружены в реакции торможения гемагглютинации при контроле поствакцинального иммунного ответа птиц. В целом обе вакцины индуцировали напряженный гуморальный иммунитет у привитых птиц (9–10 log2 в реакции торможения гемагглютинации) с некоторой разницей в величине иммунного ответа при использовании гомо- и гетерологичного антигенов. Также было достоверно установлено, что гомологичный иммунитет обеспечивал более выраженное подавление репродукции вируса при экспериментальном заражении. Степень подавления (редукции) синтеза генома вирулентного вируса низкопатогенного гриппа птиц в организме вакцинированных особей после их заражения вирусом Н9N2 генетической линии G1 была выше у птиц, привитых гомологичной вакциной при одинаковых сроках детекции генома в пробах биоматериала. Показано, что с учетом антигенных и иммуногенных различий между штаммами вируса низкопатогенного гриппа птиц Н9N2 целесообразно использование обоих антигенных компонентов в составе инактивированных вакцин.
БИОТЕХНОЛОГИЯ
Представлены результаты изучения цитоморфологических, кариологических, культуральных характеристик перевиваемой суспензионной клеточной сублинии из почки новорожденного сирийского хомячка ВНК-21/SUSP/ARRIAH, предназначенной для репродукции вирусов ящура, бешенства, парагриппа-3 крупного рогатого скота, болезни Ауески, а также для изготовления диагностических ветеринарных биопрепаратов. Сублиния клеток BHK-21/SUSP/ARRIAH при суспензионном культивировании проходит селекцию в направлении гипоплоидии: модальный класс соответствует 41 хромосоме (32–40% клеток); доля клеток с количеством хромосом 40–42 составляет 78–80%; доля полиплоидов – в среднем около 1%; пределы изменчивости хромосомного набора соответствуют диапазону от 36 до 54 хромосом. Клеточная сублиния BHK-21/SUSP/ARRIAH при суспензионном культивировании с посевной концентрацией 0,6–0,8 млн кл./см3 имеет кратность прироста 6,67–11,00 при жизнеспособности клеток 96–99%. В клеточном цикле популяции новой сублинии через 48 ч преобладает G1-фаза (диплоидная-2n), на которую приходится 30,0–75,0% клеток; в фазах подготовки к митозу (S-фаза) и митотического деления (G2+M-фаза) находится от 3,0 до 20,0% всей популяции; количество крупноядерных и многоядерных клеток (>4n) в начале и конце стадии логарифмического роста увеличивается до 2%. Клетки сублинии BHK-21/SUSP/ARRIAH быстро восстанавливаются после криоконсервирования с жизнеспособностью 95–99% и кратностью прироста 3,36–5,88 на первом – третьем пассажах и 6,85–10,95 – с четвертого по двенадцатый пассаж. Перевиваемая суспензионная линия клеток BHK-21/SUSP/ARRIAH обеспечивает накопление вируса ящура в титрах 7,30–8,00 lg ТЦД50/см3, вируса бешенства – 7,25–8,00 lg ККИД50/см3, вируса парагриппа-3 крупного рогатого скота в титрах не менее 6,00 lg ТЦД50/см3, вируса болезни Ауески – 7,50–7,80 lg ТЦД50/см3.
ОБЩИЕ ВОПРОСЫ
Представлены результаты изучения влияния рыбной муки на переваримость и усвоение питательных веществ корма у приматов. Рыбная мука – кормовой продукт, вырабатываемый из промышленных или сорных видов рыбы, морских млекопитающих, беспозвоночных, отходов их переработки. В состав рыбной муки входит комплекс природных веществ и минералов, в том числе фосфор, кальций, йод, селен, ряд незаменимых аминокислот, а также витамины А, D и группы В. Известно, что рыбная мука богата обменной энергией и протеином. В одном килограмме муки содержится до 700 г сырого протеина и до 15 МДж обменной энергии. Следует отметить, что рыбная мука легко переваривается и хорошо усваивается организмом животных. Однако в литературе имеется недостаточное количество данных по использованию рыбной муки в рационах приматов в качестве высокопротеинового корма. В этой связи целью исследований являлось изучение влияния рыбной муки на переваримость питательных веществ комбикорма у самцов макаков-резусов и на основании полученных данных определение перспективы дальнейшего использования в кормлении приматов. Был изучен химический состав и определена питательность полученного полнорационного комбикорма. Рассчитана экономическая эффективность использования рыбной муки в рационах приматов. На основании экспериментальных данных установлено, что введение взамен высокобелковых компонентов 18% рыбной муки обеспечивает улучшение процесса усвоения питательных веществ корма у подопытных приматов и обеспечивает снижение себестоимости полнорационного гранулированного комбикорма.
Ветеринарной службой Российской Федерации проводится комплекс мер, направленных на регулярный контроль состояния поголовья сельскохозяйственных животных, профилактику инфекционных заболеваний и недопущение их завоза в страну, а в случае диагностирования – предотвращение распространения и купирование в кратчайшие сроки. Успешная реализация данных мероприятий возможна благодаря использованию различных диагностических, профилактических и лечебных препаратов. С целью их получения предприятия биологической промышленности применяют производственные и эталонные штаммы микроорганизмов со стабильными биологическими свойствами, которые хранятся в государственных коллекциях микроорганизмов. Единственным держателем штаммов возбудителя сапа является лаборатория коллекции штаммов микроорганизмов ФГБНУ «ФЦТРБВНИВИ», подведомственного Министерству сельского хозяйства Российской Федерации. В связи с официальным запросом ФКП «Курская биофабрика – фирма «БИОК» о получении производственного штамма 5584 Burkholderia mallei из коллекции учреждения были выполнены следующие работы: проведен пассаж штамма на золотистых хомячках, определена жизнеспособность и изучены биологические свойства культуры, в установленном порядке, с соблюдением требований биологической безопасности, произведена выдача штамма. В процессе проведенной работы выделена культура штамма 5584 Burkholderia mallei, которая была лиофилизирована. Перед выдачей были изучены биологические свойства лиофилизированного штамма 5584 Burkholderia mallei на соответствие их паспортным данным. Полученные результаты показали, что в лаборатории коллекции штаммов микроорганизмов ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» созданы оптимальные условия для сохранения его жизнеспособности и исходных биологических свойств по истечении 5 лет хранения. Анализ данных, полученных при выполнении работ по передаче штамма 5584 Burkholderia mallei, позволил дать оценку действий на всех ее этапах. Установлено, что порядок выдачи запрашиваемого производственного штамма возбудителя сапа соответствовал требованиям биологической безопасности и нормативно-правовым документам, регламентирующим проведенные мероприятия.
Проведено изучение влияния биокомпозиционного материала РВИ из группы остеопластических биокомпозиционных материалов, иммуномодулятора РВ-2 – синтетического дипептида, обладающего иммунокорригирующим действием, и комбинаций этих препаратов на репаративный гистогенез костной ткани при переломах бедренной кости у крыс. Установлено, что ремоделирование первичной костной мозоли во вторичную в области перелома у исследуемых животных носило разноплановый характер. Наиболее выраженно данный процесс протекал в группе с комплексным использованием компонентов, когда костный дефект во время операции заполняли препаратом РВИ и внутримышечно в течение пяти дней, начиная сразу после операции, инъецировали РВ-2 в дозе 10 мкг на 1 кг живой массы крыс. У животных этой группы регистрировали картину хорошо сформированной грубоволокнистой соединительнотканной мозоли. Соединительная ткань была окрашена более интенсивно, что свидетельствует о более плотном расположении волокон в костной мозоли. В ее толще отмечено наличие очагово расположенной хрящевой ткани, которая коммутировала между собой костные отломки. На периферии хрящевая мозоль подвергалась энхондральной оссификации с замещением грубоволокнистыми костными трабекулами с элементами появления пластинчатой костной ткани с гаверсовыми каналами в центре. В толще формирующейся костной ткани межбалочные пространства заполнены элементами миелоидного костного мозга. В камбиальном слое надкостницы видна выраженная пролиферация остеобластов. Доля костной ткани увеличена до (60,21 ± 2,62)%, что достоверно превышает аналогичный показатель как в контрольной, так и во всех опытных группах. Низкое содержание соединительной ткани и высокая доля костной ткани свидетельствуют о более активно протекающих процессах остеогенеза и репаративной регенерации в сравнении с другими группами.
В статье представлен анализ наиболее важных показателей, характеризующих организацию системы обеспечения безопасности пищевых продуктов в Российской Федерации по состоянию на 1 января 2020 г. В частности, рассмотрены вопросы компетентности ветеринарных специалистов и лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы, обеспеченность лабораторий необходимым оборудованием, в том числе и радиометрическим, проведена оценка реализации процедуры внутреннего аудита лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы. Представлены данные об обеспеченности субъектов Российской Федерации убойными и убойно-санитарными пунктами/площадками, а также их укомплектованность ветеринарными специалистами. Результаты исследования свидетельствуют о том, что 39% лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы не укомплектованы необходимым лабораторным оборудованием, 8% лабораторий применяли для проведения исследований неповеренное лабораторное оборудование и только 2/3 лабораторий были охвачены периодическими внутренними аудитами. Выявлены факты недостаточного контроля за аттестацией ветеринарных специалистов, осуществляющих ветеринарно-санитарную экспертизу. Кроме того, отмечена недостаточная обеспеченность регионов страны местами убоя животных и лабораториями ветеринарно-санитарной экспертизы, а также неполная укомплектованность их ветеринарными специалистами, в задачи которых входит проведение государственного надзора за соблюдением требований ветеринарных правил и технических регламентов, проведение ветсанэкспертизы. Таким образом, в некоторых регионах страны у государственной ветеринарной службы отсутствует возможность убоя больных и подозреваемых в заболевании животных в изолированных контролируемых условиях с последующим хранением и обеззараживанием продуктов убоя, или их утилизацией, или уничтожением на месте. Полученные результаты исследования показывают наличие ряда пробелов в организации системы ветеринарно-санитарной экспертизы, что свидетельствует о необходимости введения корректирующих мер как на федеральном, так и на региональном уровне.
ISSN 2658-6959 (Online)