Влияние условий хранения сывороток крови свиней на выявление антител к вирусу АЧС методом ИФА

Одной из мер борьбы с распространением и профилактики африканской чумы свиней в Российской Федерации является проведение исследований проб, отбираемых от свиней и кабанов, в том числе серологическими методами с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) для качественного определения содержания антител к вирусу. При этом в настоящее время на территории страны не существует нормативного документа, регламентирующего условия хранения проб сыворотки крови для постановки ИФА при определении содержания антител к вирусу АЧС. Также отсутствуют литературные данные о максимально допустимом сроке хранения проб сыворотки крови свиней, а влияние условий хранения на серологический статус сывороток крови домашних свиней в отношении АЧС изучено недостаточно. В статье представлены результаты эксперимента по определению влияния температурных режимов и длительности хранения серопозитивных и серонегативных в отношении вируса АЧС сывороток крови домашних свиней на их серологический статус при постановке тест-системой INgezim PPA Compac (Ingenasa, Испания) для твердофазного ИФА и вероятности получения ложных результатов. В ходе выполнения работы и анализа результатов получены новые данные, свидетельствующие об отсутствии или незначительном влиянии моделируемых режимов хранения на определение серологического статуса качественных проб сывороток крови в отношении вируса АЧС, в то время как гемолизированные пробы показали более заметное изменение, пропорциональное степени гемолиза и длительности хранения. Несмотря на то что полученные результаты по обнаружению антител к возбудителям одних болезней не применимы для других патогенов, данное исследование имеет существенное прикладное значение, позволяя установить зависимость получения достоверных результатов при серодиагностике АЧС от условий хранения проб.

1. Ремыга С. Г., Першин А. С., Шевченко И. В., Иголкин А. С., Шевцов А. А. Клинические и патологоанатомические изменения у диких европейских кабанов и домашних свиней при заражении вирусом африканской чумы свиней. Ветеринария сегодня. 2016; 3 (18): 46–51. Режим доступа: https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/260.

2. Alonso C., Borca M., Dixon L., Revilla Y., Rodriguez F., Escribano J. M., ICTV Report Consortium. ICTV Virus Taxonomy Profile: Asfarviridae. J. Gen. Virol. 2018; 99 (5): 613–614. DOI: 10.1099/jgv.0.001049.

3. Пособие по подготовке чрезвычайных планов действий на случай эпидемии африканской чумы свиней. Под ред. М.-Л. Пенрит, В. Гу- берти, К. Депнер, Х. Луборт. Руководство ФАО по здравоохранению и воспроизводству животных. № 8. Рим: ФАО; 2011. 78 с. Режим доступа: http://www.fao.org/3/i1196r/i1196r.pdf.

4. World Animal Health Information and Analysis Department. African swine fever (ASF). Report Nо. 12: March 01 – March 14, 2019. Available at: http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Animal_Health_in_the_World/docs/pdf/Disease_cards/ASF/Report_12_Current_situation_ASF.pdf.

5. Galindo I., Alonso C. African swine fever virus: A review. Viruses. 2017; 9 (5):103. DOI: 10.3390/v9050103.

6. Груздев К. Н., Караулов А. К., Иголкин А. С. Опыт борьбы с африканской чумой свиней в Российской Федерации и его значение для дру- гих стран. Ветеринария сегодня. 2020; 1 (32): 38–43. DOI: 10.29326/2304-196X-2020-1-32-38-43.

7. Шевцов А. А., Петрова О. Н., Ремыга С. Г., Першин А. С., Груздев К. Н., Иголкин А. С. Анализ проведения лабораторных исследований по ряду вирусных болезней свиней на территории России в 2011–2017 гг. Ветеринария сегодня. 2018;1 (24): 42–48. DOI: 10.29326/2304-196X-2018-1-24-42-48.

8. Pershin A., Shevchenko I., Igolkin A., Zhukov I., Mazloum A., Aronova E., et al. A long-term study of the biological properties of ASF virus isolates originating from various regions of the Russian Federation in 2013–2018. Vet. Sci. 2019; 6 (4):99. DOI: 10.3390/vetsci6040099.

9. Першин А. С., Шевченко И. В., Иголкин А. С., Жуков И. Ю., Власова Н. Н., Мануйлова О. А. Динамика антителообразования при экспериментальном заражении вирусом африканской чумы свиней. Ветеринария Кубани. 2019; 4: 3–7. DOI: 10.33861/2071-8020-2019-4-3-7.

10. Bergeron H. C., Glas P. S., Schumann K. R. Diagnostic specificity of the African swine fever virus antibody detection enzyme-linked immunosorbent assay in feral and domestic pigs in the United States. Transbound. Emerg. Dis. 2017; 64 (6): 1665–1668. DOI: 10.1111/tbed.12717.

11. Бельтран Алькрудо Д., Ариас М., Гайардо К., Крамер С., Пен- рит М. Л. Африканская чума свиней: обнаружение и диагностика. Руководство для ветеринаров. Руководство ФАО по здравоохранению и воспроизводству животных. № 19. Рим: ФАО; 2017. 93 с. Режим до- ступа: http://www.fao.org/3/i7228r/i7228r.pdf.

12. Mur L., Boadella M., Martínez‐López B., Gallardo C., Gortazar C., Sánchez‐Vizcaíno J. M. Monitoring of African swine fever in the wild boar population of the most recent endemic area of Spain. Transbound. Emerg. Dis. 2012; 59 (6): 526–531. DOI: 10.1111/j.1865-1682.2012.01308.x.

13. ГОСТ 28573-90 Свиньи. Методы лабораторной диагностики африканской чумы. М.: Стандартинформ; 2005. 9 с. Режим доступа: https://files.stroyinf.ru/Data2/1/4294826/4294826183.pdf.

14. Изучение популяционного иммунитета к гриппу у населения Российской Федерации: методические указания (МУ 3.1.3490-17). М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребите- лей и благополучия человека; 2018. 34 с. Режим доступа: https://www. meganorm.ru/Data2/1/4293738/4293738228.pdf.

15. Ветеринарно-санитарные правила отбора проб для контроля содержания вредных веществ и их остатков в живых животных и продуктах животного происхождения: Постановление Министерства сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь от 23.09.2010 № 57. Режим доступа: https://mshp.gov.by/print/documents/technicalacts/e13f0df74187a8fa.html.

16. Правила взятия патологического материала, крови, кормов и пересылки их для лабораторного исследования: утв. Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 24.06.1971. Режим доступа: https://docs.cntd.ru/document/1200109238.

17. ГОСТ 34105-2017 Животные. Лабораторная диагностика бруцеллеза. Серологические методы. М.: Стандартинформ; 2017. 23 с. Режим доступа: http://docs.cntd.ru/document/1200145963.

18. ГОСТ Р 53079.4-2008 Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных ис- следований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа. М.: Стандартинформ; 2009. 65 с. Режим доступа: http://docs.cntd.ru/document/1200072566.

19. Boadella M., Gortázar C. Effect of haemolysis and repeated freeze-thawing cycles on wild boar serum antibody testing by ELISA. BMC Res. Notes. 2011; 4:498. DOI: 10.1186/1756-0500-4-498.

20. Neumann E. J., Bonistalli K. N. Effect of blood sample handling post-collection on Erysipelothrix rhusiopathiae antibody titres. Vet. J. 2009; 180 (3): 325–329. DOI: 10.1016/j.tvjl.2008.07.020.