Preview

Ветеринария сегодня

Расширенный поиск
№ 3 (2018)
Скачать выпуск PDF

БОЛЕЗНИ СВИНЕЙ

3-7 212
Аннотация
Средства специфической профилактики при африканской чуме свиней пока не разработаны. Для определения составных компонентов, которые могут быть использованы при создании надежной защиты от АЧС, необходимо изучить функцию определенного белка вируса, его роль в морфогенезе и индукции иммунного ответа. Установлено, что белки p54 и p30 участвуют в вирусном проникновении и интернализации и способны индуцировать образование протективных антител у иммунизированных свиней. Введение этих белков в инфицированную вирусом АЧС культуру клеток в разной степени воздействует на репродукцию вируса. Представлены результаты изучения влияния очищенного рекомбинантного белка р30, полученного из клона E. coli с плазмидой pET32b(+)/р30, на репродукцию вируса африканской чумы свиней in vitro. Наибольшее снижение, вплоть до полной ингибиции, репродукции вируса наблюдали при внесении 300 нг p30 в первичные культуры клеток селезенки свиньи и костного мозга свиньи, инфицированные изолятом Krasnodar 07/17 вируса африканской чумы свиней в дозе 100 ГАдЕ на матрас (~ 0,01 ГАдЕ на клетку). Отмечено, что при внесении в образец смеси p30 и p54 снижение репродукции было существеннее, чем с использованием только p30.
8-12 184
Аннотация
Распространение эпизоотической диареи свиней и возросшая угроза свиноводству диктуют необходимость разработки современных методов диагностики болезни. Перспективным является использование в серологических тестах рекомбинантных антигенов возбудителя болезни. На основе рекомбинантного антигена разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа для выявления антител к вирусу эпизоотической диареи свиней. В результате проведенных исследований были установлены все необходимые условия реакции. В процессе валидации определены основные характеристики разработанного метода. Прецизионность реакции в условиях повторяемости и воспроизводимости превышала 90%, диагностическая специфичность составляла 99,47%, чувствительность относительно коммерческого набора ID Screen PEDV Indirect (IDvet, Франция) при очень хорошей согласованности двух методов (k-критерий – 0,88) – 92%. Тест-система характеризуется высокой устойчивостью при смене ключевого компонента реакции.
13-20 192
Аннотация
Разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа, предназначенный для выявления антител к неструктурным белкам вируса ящура в сыворотках крови свиней. В процессе валидации показано, что разработанный метод отличается высокой чувствительностью, специфичностью и воспроизводимостью. При тестировании панели сывороток крови, полученных от экспериментально зараженных животных, метод позволил обнаружить антитела к вирусу ящура в 7 из 18 сывороток, отобранных на 6-й день после инфицирования, в 13 из 19 – на 7-й день после инфицирования, в 16 из 19 – на 8-й день после инфицирования и во всех 76 сыворотках, отобранных на 9–12-й день после инфицирования. Диагностическая специфичность 3АВ-ИФА составила 100% при тестировании 100 заведомо отрицательных сывороток крови свиней, завезенных в РФ из Норвегии. Высокая специфичность и чувствительность метода, установленные на этапе разработки метода, подтверждены при проведении рутинных диагностических исследований.
21-25 170
Аннотация
Представлены результаты исследований биоматериала от домашних свиней и диких кабанов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени по обнаружению генома вируса африканской чумы свиней, проведенных на базе ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (г. Владимир). В 2017 г. в рамках государственного лабораторного мониторинга исследовано 8500 проб, поступивших из 44 субъектов Российской Федерации, среди которых выявлены 504  пробы, содержащие геном вируса африканской чумы свиней. В  2017  г. впервые зарегистрировано возникновение очагов инфекции в Уральском и Сибирском федеральных округах РФ. Проведенные исследования и сохраняющееся длительное неблагополучие по африканской чуме свиней территорий РФ подтвердили актуальность дальнейшего надзора в популяциях восприимчивых животных. Разработка, организация и выполнение программы надзора распространения заболевания в дикой фауне остается первостепенной задачей. Для своевременного купирования очагов инфекции на уровне регионов требуются составление и реализация графиков отбора проб с равномерным распределением по времени отбора биоматериала и направления отобранных образцов в исследовательские лаборатории.
26-29 194
Аннотация
Актинобациллезная плевропневмония – это инфекционное контагиозное заболевание свиней, возбудителем которого является бактерия Actinobacillus pleuropneumoniae. В настоящее время заболевание широко распространено во многих странах с развитым свиноводством. Болезнь наносит существенный экономический ущерб хозяйствам за счет большого падежа и затрат на лечение больных свиней и проведения ветеринарно-санитарных мероприятий. Ежегодное увеличение в мире случаев актинобациллезной плевропневмонии свиней, а также появление лекарственно-устойчивых форм актинобацилл диктуют необходимость более тщательного изучения и обсуждения данной проблемы. Основой эпизоотологического надзора за заболеванием является проведение постоянного мониторинга с целью выявления, подтверждения и регистрации актинобациллезной плевропневмонии свиней, ее характеристик и тенденций частоты развития и определения чувствительности к антимикробным препаратам ее возбудителя. В статье поднимается актуальная не только для ветеринарии, но и медицины тема применения антибиотиков и растущая стремительными темпами антибиотикорезистентность микроорганизмов. На модели возбудителя актинобациллезной плевропневмонии свиней рассмотрены причины появления антибиотикорезистентности и подробно обсуждены возможные подходы к преодолению устойчивости актинобацилл к антибиотикам и перспективам их применения, которые позволят справиться с этой проблемой. Большое значение для решения проблемы антибиотикорезистентности имеет целенаправленный надзор, ориентированный на мониторирование и сбор информации о назначении антибиотиков. Полученная в результате проведения мониторинга информация может служить основой для разработки плана и стратегии применения антибактериальных препаратов (выбор лекарственного средства, доза, пути введения, кратность, количество курсов), разработки и внедрения более эффективных подходов к лечению актинобациллезной плевропневмонии свиней, сдерживанию появления и распространения антибиотикорезистентных бактерий.

БОЛЕЗНИ ПТИЦ

30-39 172
Аннотация
Вирус инфекционного бронхита кур является причиной значительного экономического ущерба в  птицеводстве, однако борьба с ним затруднена в связи с его высокой изменчивостью. Частота мутаций вируса, изолированного от вакцинированных птиц, достигает 1,5% в год в гипервариабельной области гена S1. В результате многолетнего наблюдения за циркуляцией изолятов вируса инфекционного бронхита кур, выявленных в отдельных птицеводческих хозяйствах, было замечено, что со временем на птицефабрике может происходить смена генетических линий вируса. Это обусловливает необходимость постоянного мониторинга изолятов вируса для оптимизации схемы профилактики. В работе представлены результаты исследования 840 проб биологического материала, отобранного от кур из птицефабрик России и некоторых стран СНГ в 2015–2017 гг. Среди 311 положительных проб выявлено 147 изолятов вируса инфекционного бронхита кур, большая часть которых относится к 8 генетическим линиям генотипа GI: GI-1, GI-12, GI-13, GI-14, GI-16, GI-19, GI-22, GI-23. Кроме этого, были выявлены изоляты, являющиеся рекомбинантами, и вариантные изоляты, не относящиеся ни к одному из известных генотипов.
40-45 176
Аннотация
Представлены результаты гистологического исследования структуры тимуса уток пекинской породы на фоне применения кормовой добавки ДАФС-25к. Установлено, что у суточных утят тимус является морфологически зрелым и активно функционирующим органом. С возрастом отмечено увеличение размеров его долек у  утят контрольной и  опытной групп, однако под влиянием селена более интенсивно увеличивается площадь корковой зоны. В 45-суточном возрасте у утят опытной группы наблюдается достоверное увеличение показателя корково-мозгового отношения преимущественно за счет расширения площади корковой зоны. У интактных утят площадь коркового вещества не изменилась, отмечена тенденция увеличения площади мозгового вещества, что в таком возрасте является признаком акцидентальной инволюции, связанной с началом смены ювенильного пуха на первичное перо. Под влиянием селена в тимусе утят опытной группы отмечено нивелирование процессов акцидентальной инволюции, активнее протекают процессы синтеза тимопоэтинов и пролиферации тимоцитов. До 75-суточного возраста в тимусе утят обеих групп идет активная пролиферация тимоцитов, однако в опытной группе под влиянием селена отмечены более высокие показатели корково-мозгового отношения, четкая граница между ними, а также достоверно более высокие показатели количества и размеров телец Гассаля. С 90-суточного возраста в органе отмечаются признаки возрастной инволюции, причем в опытной группе они протекают более физиологично, соответственно возрасту птиц. Использование в рационе утят селеноорганического препарата ДАФС-25к в дозе 1,3 мг/кг корма способствовало повышению функциональной активности тимуса, нивелированию процессов развития акцидентальной и оптимизации возрастной инволюции.
46-51 134
Аннотация
Представлены данные по экспериментальному заражению 6-недельных индеек кросса Биг 6 эпизоотическим штаммом вируса гриппа A/duck/Altai/469/14 H5N1 (клада 2.3.2.1с). Для птиц, инокулированных интраназально в дозе 5,0 lg ЭИД50/0,5см3 , описаны особенности течения инфекционного процесса с указанием инкубационного периода и среднего времени гибели. Путем гистологического и иммуногистохимического исследований фрагментов органов респираторной, пищеварительной, сердечно-сосудистой, нервной, выделительной, лимфоидной и мышечной систем подопытных особей показаны патоморфологические изменения в организме птиц на тканевом и клеточном уровне. Анализ проведен на парных препаратах парафиновых срезов тканей экспериментально зараженных и здоровых индеек. Один образец был подвержен гистологическому окрашиванию с применением красителей гематоксилин и эозин, а его дубликат – иммуногистохимическому анализу с использованием в качестве первичных антител препарата поликлональных антител против рибонуклеопротеина вируса гриппа птиц. Результаты гистологического и иммуногистохимического исследования фотодокументированы и представлены в работе. Поражения в виде воспалений и некрозов различной степени тяжести выявлены в препаратах трахеи, легкого, мышечного желудка, железистого желудка, тонкого кишечника, толстого кишечника, поджелудочной железы, головного мозга, мозжечка, сердца, почек, печени и селезенки индеек. Иммуногистохимический анализ показал наибольшее распространение антигена вируса гриппа в эндотелии сосудов головного мозга, нейронах Пуркинье мозжечка, в ацинарных клетках поджелудочной железы и в миокардиоцитах сердца. В ходе эксперимента было установлено, что вирус A/duck/Altai/469/14 H5N1 вызывал генерализованную форму инфекции у индеек с характерными для высокопатогенного гриппа клиническими и патологоанатомическими поражениями.

БОЛЕЗНИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

52-57 278
Аннотация
Заразный узелковый дерматит крупного рогатого скота является экономически значимым заболеванием, поскольку приводит к снижению привесов и молочной продуктивности, абортам, маститам, нарушению функции воспроизводства, поражению органов дыхания, истощению животных, а в отдельных случаях – их гибели. В настоящее время болезнь включена в список МЭБ и подлежит обязательной нотификации. Возникновение и распространение заболевания на территории Российской Федерации обусловило необходимость проведения исследований в рамках совершенствования методов лабораторной диагностики. Впервые в России разработана тест-система на основе непрямого «сэндвич»-варианта иммуноферментного анализа для диагностики заразного узелкового (нодулярного) дерматита крупного рогатого скота, позволяющая в течение 24 часов провести исследование биоматериала. Разработка тест-системы включала в себя получение специфических антител от лабораторных животных (кролики и морские свинки), подбор оптимального разведения улавливающих и детекторных антител, состава буферных растворов и условий постановки реакции. С использованием разработанной методики исследовано 50 образцов исходных культуральных антигенов вируса заразного узелкового дерматита, а также вируссодержащих суспензий, отобранных на различных этапах очистки и концентрирования. Для подтверждения результатов ИФА все исследованные пробы были тестированы методом ПЦР-РВ. Кроме того, для всех исследуемых материалов определяли титр инфекционной активности вируса методом титрования в культуре клеток ЯДК-04. Диагностическая специфичность теста составила 100%, а аналитическая чувствительность – 3,5 lg ТЦД50. Разработанный «сэндвич»-вариант ИФА позволяет тестировать одновременно в формате 96-луночного планшета до 24 проб антигена в разведении 1:2–1:16 и может быть использован для диагностики заразного узелкового (нодулярного) дерматита крупного рогатого скота.

ОБЩИЕ ВОПРОСЫ

58-62 162
Аннотация
Представлен анализ смертности обезьян различных видов, содержащихся в условиях неволи, от пневмонии за 2017 г. Показана частота гибели животных и сезонность. Смертность детенышей и старых обезьян от пневмонии превышает таковую среди подростков и взрослых животных. Максимальный показатель смертности обезьян от пневмонии отмечен в феврале, апреле и мае. Установлен спектр микроорганизмов, выделенных из легких погибших животных. Преобладающей бактериальной флорой, обнаруживаемой при пневмониях, оказались Staphylococcus aureus (43,1%) и Escherichia coli (34,9%), выявленные как в монокультуре, так и в ассоциациях. Одной из особенностей пневмоний у обезьян является наличие высокой частоты полимикробных ассоциаций. Наиболее часто S. aureus встречается в сочетаниях с E. coli (52,5%). Все выделенные культуры S. aureus были метициллинчувствительными и не имели в своем геноме гена mecA. При бактериологическом исследовании аутопсийного материала возможна контаминация образцов легочной ткани посторонней флорой, поэтому утвердительно говорить о роли тех или иных микроорганизмов как основных возбудителей заболевания достаточно трудно.
63-68 170
Аннотация
Listeria monocytogenes – один из основных контаминантов пищевых продуктов, вызывающий заболевание, называемое листериоз. По количеству выявленных случаев он значительно уступает сальмонеллезам и кампилобактериозам, но превосходит их по тяжести клинического течения и проценту летальных исходов. Поэтому разработка видоспецифичных методов ПЦР для выявления генома L.monocytogenes является актуальной задачей. Оптимизирована методика выявления генома бактерий L. monocytogenes посредством полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Мишенью амплификации являлся высокоспецифичный и подходящий для точной качественной оценки всех штаммов ген iap, кодирующий поверхностный белок р60 L.monocytogenes. Подобрана оптимальная концентрация магния (6 мМ) и температура отжига праймеров (57 °С). Определены чувствительность и специфичность данной методики. Предел обнаружения составил 120 молекул-мишеней. Полученные результаты показывают, что оптимизированный вариант ПЦР-РВ, основанный на амплификации гена iap, позволяет выявлять L.monocytogenes в пробах продовольственного сырья животного происхождения и пищевых продуктов. Скрининговые исследования на основе оптимизированной ПЦР-РВ обеспечивают быстрые и надежные результаты.
69-72 166
Аннотация
Представлены результаты сравнительной оценки культуральных свойств вируса инфекционного ринотрахеита кошек на первичных и перевиваемых культурах клеток «кошачьего» происхождения (ПК, СПК, CrFK, FS, CC-81, FC/Tg). Установлено, что репродукция вируса инфекционного ринотрахеита, независимо от способа заражения и метода культивирования, носила закономерный характер и была практически равной в чувствительных культурах клеток. Максимальное проявление цитопатического эффекта (свыше 75% дегенерации монослоя) во всех видах культур клеток было отмечено через 48–72 ч культивирования. Однако наибольшее накопление вируса инфекционного ринотрахеита кошек штамма «Гранд» зависит от времени предварительной адсорбции при заражении в дозе 5,5 lg ТЦД50/мл монослойных культур клеток при культивировании роллерным методом и поддержании рН среды на уровне 7,0–7,4. Установлено, что однократное замораживание культурального вируса при температуре −60 °С по окончании цикла культивирования (в течение 60–72 ч) и его размораживание достоверно повышало титр на 0,5 lg ТЦД50/мл.


ISSN 2304-196X (Print)
ISSN 2658-6959 (Online)