РАЗРАБОТКА И ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НЕПРЯМОГО ВАРИАНТА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ ДИАРЕИ СВИНЕЙ


https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-3-26-8-12

Полный текст:


Аннотация

Распространение эпизоотической диареи свиней и возросшая угроза свиноводству диктуют необходимость разработки современных методов диагностики болезни. Перспективным является использование в серологических тестах рекомбинантных антигенов возбудителя болезни. На основе рекомбинантного антигена разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа для выявления антител к вирусу эпизоотической диареи свиней. В результате проведенных исследований были установлены все необходимые условия реакции. В процессе валидации определены основные характеристики разработанного метода. Прецизионность реакции в условиях повторяемости и воспроизводимости превышала 90%, диагностическая специфичность составляла 99,47%, чувствительность относительно коммерческого набора ID Screen PEDV Indirect (IDvet, Франция) при очень хорошей согласованности двух методов (k-критерий – 0,88) – 92%. Тест-система характеризуется высокой устойчивостью при смене ключевого компонента реакции.

Об авторах

А. В. Каньшина
ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир
Россия

Старший научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук, 

г. Владимир



А. С. Яковлева
ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир
Россия

Старший научный сотрудник, кандидат биологических наук,

г. Владимир



Е. С. Орлова
ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир
Россия

Старший научный сотрудник, кандидат биологических наук, 

г. Владимир



А. В. Щербаков
ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир
Россия

Заведующий лабораторией, кандидат биологических наук, 

г. Владимир



Список литературы

1. Вирусные болезни животных / В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьев, Н. В. Фомина. – М.: ВНИТИБП, 2001. – 928 с.

2. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят / Х. З. Гафаров, А. В. Иванов, Е. А. Непоклонов, А. З. Равилов. – Казань: Фен, 2002. – 592 с.

3. Пейсак З. Болезни свиней. – Брест: Брестская типография, 2008. – 424 с.

4. Яковлева А. С., Щербаков А. В. Получение рекомбинантного нуклеокапсидного белка вируса эпизоотической диареи свиней // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. – 2015. – Т. 13. – С. 89–95.

5. Comparison of an enzyme-linked immunosorbent assay with serum neutralization test for serodiagnosis of porcine epidemic diarrhea virus infection / J. S. Oh, D. S. Song, J. S. Yang [et al.] // J. Vet. Sci. – 2005. – Vol. 6, No. 4. – P. 349–352.

6. Development and optimization of antibody detection assays // OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (Mammals, Birds, and Bees). – 2014. – Chap. 3.6.1. – URL: http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/tahm/3.6.01_ANTIBODY_DETECT.pdf.

7. Hofmann M., Wyler R. Enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of porcine epidemic diarrhea coronavirus antibodies in swine sera // Vet. Microbiol. – 1990. – Vol. 21, No. 3. – P. 263–273. – URL: https://doi.org/10.1016/0378-1135(90)90037-V.

8. Hou X. L., Yu L. Y., Liu J. Development and evaluation of enzymelinked immunosorbent assay based on recombinant nucleocapsid protein for detection of porcine epidemic diarrhea (PEDV) antibodies // Vet. Microbiol. – 2007. – Vol. 123, No. 1–3. – P. 86–92. URL: https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2007.02.014.

9. Immunohistochemical detection of porcine epidemic diarrhea virus compared to other methods / F. Guscetti, C. Bernasconi, K. Tobler [et al.] // Clin. Diagn. Lab. Immunol. – 1998. – Vol. 5, No. 3. – P. 412–414.

10. Jacobson R. H. Validation of serological assays for diagnosis of infectious disease // Rev. Sci. Tech. OIE. – 1998. – Vol. 17, No. 2. – Р. 469–486.

11. Lee C. Porcine epidemic diarrhea virus: An emerging and reemerging epizootic swine virus // Virol. J. – 2015. – Vol. 12:193; DOI: 10.1186/s12985-015-0421-2.

12. Ren X., Suo S., Jang Y.-S. Development of a porcine epidemic diarrhea virus M protein-based ELISA for virus detection // Biotechnol. Lett. – 2011. – Vol. 33, No. 2. – P. 215–220. – URL: https://doi.org/10.1007/s10529010-0420-8.

13. Song D., Park B. Porcine epidemic diarrhoea virus: a comprehensive review of molecular epidemiology, diagnosis, and vaccines // Virus Genes. – 2012. – Vol. 44, No. 2. – P. 167–175; DOI: 10.1007/s11262-012-0713-1.


Дополнительные файлы

Для цитирования: Каньшина А.В., Яковлева А.С., Орлова Е.С., Щербаков А.В. РАЗРАБОТКА И ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НЕПРЯМОГО ВАРИАНТА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ ДИАРЕИ СВИНЕЙ. Ветеринария сегодня. 2018;(3):8-12. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-3-26-8-12

For citation: Kanshina A.V., Yakovleva A.S., Orlova Y.S., Scherbakov A.V. DEVELOPMENT AND BASIC FEATURES OF INDIRECT ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY FOR DETECTION OF ANTIBODIES AGAINST PORCINE EPIDEMIC DIARRHEA. Veterinary Science Today. 2018;(3):8-12. (In Russ.) https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-3-26-8-12

Просмотров: 134

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2304-196X (Print)
ISSN 2658-6959 (Online)