Серологический мониторинг ньюкаслской болезни в Российской Федерации в 2023–2024 гг.

ВВЕДЕНИЕ

Ньюкаслская болезнь (НБ) – это высококонтагиозное вирусное заболевание птиц, представляющее общую угрозу для мирового птицеводства вследствие больших экономических потерь [1].

Возбудитель НБ – РНК-содержащий вирус вида Avian orthoavulavirus javaense, принадлежит к семейству Paramyxoviridae, подсемейству Avulavirinae, роду Orthoavulavirus, ранее классифицировался как Avian paramyxovirus 1, или вирус ньюкаслской болезни [2]. Dimitrov K. M. et al. в 2019 г. была предложена классификация, основанная на генетических свойствах вируса НБ [3]. Из двух выделенных классов вируса НБ класс I включал единственный генотип 1. Класс II состоял из не менее 20 различных генотипов, которые делились на субгенотипы. В последние десятилетия наиболее актуальными для птицеводства являются генотип V, циркулирующий в странах Америки, и генотип VII, распространенный в других странах мира. На территории Российской Федерации изоляты вируса НБ представлены разными генетическими и биологическими группами, включающими вирулентные и авирулентные, а также вакцинные штаммы [4].

Вирус НБ способен заражать более 200 видов птиц. К НБ наиболее восприимчивы домашние птицы из отряда куриных, при этом у заболевшей птицы поражаются органы дыхательного и пищеварительного тракта и центральной нервной системы, у невакцинированного поголовья домашней птицы может наблюдаться 100%-я гибель [5]. Были случаи регистрации болезни у гусей, фазанов и цесарок [6]. Перепела восприимчивы к заражению вирусом НБ: в опытах по экспериментальному инфицированию вирулентными штаммами вируса НБ у них наблюдали клинические признаки болезни с 3-х по 14-е сут после заражения и более низкий процент смертности, чем у кур [7][8]. При этом регистрировали выработку специфических антител на 14-е сут после инфицирования. У вакцинированных против НБ перепелов (штамм «Ла-Сота») пик образования антител наблюдали на 40-е сут после вакцинации с дальнейшим снижением после 46 сут.

Синантропные (сороки, голуби, воробьи и др.) и дикие птицы являются природными носителями вируса НБ [9][10]. Основными резервуарами возбудителя НБ в природе являются перелетные и водоплавающие птицы. Заболевание имеет сезонный характер, что связано с ежегодными миграциями представителей перелетных видов птиц. Резервуарами вируса НБ считаются водоплавающие птицы (домашние утки и гуси), поскольку они резистентны к высоковирулентным для цыплят штаммам возбудителя.

Однако начиная с 1990-х гг. появились сообщения о вспышках НБ среди домашних водоплавающих птиц в странах Азии, включая Корею, Японию и Китай. В инфицированных стадах уток регистрировали снижение яичной продуктивности, заболеваемость птицы составила около 80% и смертность от 30 до 50%. У птиц наблюдали диарею и неврологические проявления. Похожие вспышки НБ были отмечены в стадах гусей в Китае [6][11]. Вирулентные штаммы вируса, выявленные у гусей в странах Азии в 2000-х гг., были отнесены к генотипу VIId. Xu Q. et al. было показано, что экспериментальное заражение гусей вирулентным штаммом вируса НБ генотипа VIId индуцировало сильный клеточный иммунный ответ на ранней стадии после инфицирования, что было связано с особенностями патогенеза НБ у гусей [11]. Wan H. et al. описана передача вируса от зараженных гусей к цыплятам при контактном содержании [6].

Ньюкаслскую болезнь регистрируют во многих странах мира, о случаях выявления высоковирулентных изолятов вируса Avian orthoavulavirus javaense необходимо уведомлять Всемирную организацию здравоохранения животных (ВОЗЖ) в обязательном порядке.

Вспышки НБ, нотифицированные в ВОЗЖ в течение последних четырех лет, были отмечены более чем в 50 странах мира (в Азии, Европе, Америке и Африке), в том числе в России. По данным ВОЗЖ, за четырехлетний период вспышки НБ среди домашних птиц были зарегистрированы в личных подсобных хозяйствах (ЛПХ) 16 субъектов, входящих в состав Центрального, Приволжского, Уральского, Сибирского, Дальневосточного и Южного федеральных округов РФ. Эпизоотии НБ во многих странах Азии и Европы в последние годы были вызваны вирусом разных подтипов VII генотипа [12][13]. В РФ вирус данного генотипа впервые был выделен в 2006 г. от кур при вспышке НБ на птицефабрике в Амурской области. В дальнейшем вирус НБ VII генотипа являлся причиной спорадических вспышек среди домашней птицы в ЛПХ в разных регионах страны [14-17]. На территории России ежегодно регистрируют случаи возникновения НБ у голубей [9][15][16].

В ряде стран мира, в том числе в РФ, в целях профилактики НБ проводится иммунизация домашних птиц с применением вакцин разных типов [18-20]. Для оценки эффективности вакцинации определяют уровень специфических антител к вирусу НБ до иммунизации и в разные сроки после нее в реакции торможения гемагглютинации или иммуноферментным методом [21][22]. Серологические тесты имеют ограниченную ценность при надзоре и диагностике НБ из-за практически универсального использования вакцин для домашней птицы [23][24].

В работе представлены результаты серологического мониторинга ньюкаслской болезни птиц, проведенного в 2023–2024 гг. в рамках выполнения государственного задания Россельхознадзора по ветеринарному надзору за особо опасными инфекциями.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследуемый биологический материал. Отбор проб биологического материала (сывороток крови птиц) проводился территориальными управлениями Россельхознадзора в 2023–2024 гг.

Методы исследования. Тестирование сывороток крови проводили с использованием коммерческих наборов производства ФГБУ «ВНИИЗЖ» (Россия): «Набор для выявления антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации» и «Набор для определения антител к вирусу ньюкаслской болезни иммуноферментным методом при тестировании сывороток в одном разведении» согласно инструкции по применению.

Обработка исследуемых проб. Перед проведением реакции все поступившие для исследования сыворотки крови инактивировали при температуре 56 °C в течение 30 мин в инактиваторе сывороток (или на водяной бане).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В рамках государственного задания (государственный эпизоотологический мониторинг, приказы Россельхознадзора от 20.12.2022 № 1915 и от 22.12.2023 № 1630) было проведено исследование более 66 700 проб на наличие антител к вирусу НБ. Сыворотки крови птиц были доставлены из 69 и 74 субъектов РФ в течение 2023 г. (35 005 проб) и 2024 г. (31 766 проб) соответственно.

В настоящее время птицеводство РФ представлено крупными предприятиями, использующими интенсивные производственные технологии, небольшими крестьянскими (фермерскими) хозяйствами (КФХ) и ЛПХ.

От сельскохозяйственной птицы промышленных хозяйств в течение 2023 и 2024 гг. было доставлено 26 983 и 26 004 пробы сыворотки крови соответственно. Результаты обнаружения антител к вирусу НБ в сыворотках крови птиц (кур, индеек, уток, гусей и перепелов) из птицеводческих предприятий РФ представлены в таблице 1.

В мониторинговые исследования в 2023 г. были включены пробы из 237 промышленных хозяйств (предприятий) 60 субъектов РФ, в 2024 г. – из 280 хозяйств 74 субъектов РФ. В 2024 г. в целом по РФ было выявлено больше положительных проб, чем в предыдущем году (81 и 74%).

Результаты обнаружения антител к вирусу НБ в сыворотках крови кур из промышленных птицеводческих хозяйств, отобранных в 2023–2024 гг., с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) представлены на рисунках 1 и 2.

В 2023 г. было исследовано 25 490 проб от кур из 222 пти- цеводческих хозяйств промышленного типа 8 федеральных округов РФ, антитела к вирусу НБ были обнаружены в 19 451 пробе (76%). В 2024 г. антитела к вирусу НБ были выявлены в 19 699 (85%) из 23 208 проб, поступивших из 250 птицехозяйств (рис. 1).

Серологические исследования на НБ, проведенные в 2023 г., показали, что минимальный процент положительных проб (58%) был обнаружен в Северо-Кавказском федеральном округе (СКФО). Немного больше, от 62 до 70% положительных проб, было выявлено у кур из Северо-Западного (СЗФО), Уральского (УФО) и Приволжского (ПФО) федеральных округов. В Сибирском (СФО), Южном (ЮФО) и Центральном (ЦФО) федеральных округах количество положительных проб составило от 82 до 88%, а максимальное количество (95%) было обнаружено в Дальневосточном (ДВФО) федеральном округе. В 2024 г. в 7 из 8 федеральных округов, за исключением СЗФО (77%), доля серопозитивных особей среди кур составила от 80 до 91% (рис. 2).

Результаты обнаружения антител к вирусу НБ в сыворотках крови других видов сельскохозяйственной птицы, доставленной из птицеводческих хозяйств промышленного типа, представлены на рисунках 3 и 4. Исследование сывороток крови индеек проводили двумя методами: ИФА и РТГА; для гусей, уток и перепелов использовали только РТГА.

При исследовании 989 проб сыворотки крови индеек, доставленных в течение 2023 г. из 8 птицехозяйств 4 федеральных округов РФ (ЦФО, ПФО, СФО и ЮФО), анти- тела были обнаружены в 529 из них (54%). В 2024 г. анти- тела к вирусу НБ были выявлены в 1271 (82%) из 1542 ис- следованных проб сыворотки крови из 17 птицехозяйств 7 федеральных округов (за исключением ДВФО). Пробы от не вакцинированных против НБ индеек из СЗФО показали отрицательный результат (рис. 3).

Сопроводительные документы из хозяйств указывают на то, что обнаруженные специфические антитела были выработаны в организме птиц в ответ на применение живых или инактивированных вакцин против НБ. Количество серопозитивной птицы в хозяйствах зависело от ряда факторов, в том числе типа вакцин и схемы иммунизации. Применение новых, более эффективных типов вакцин, в том числе инактивированных из вирулентных штаммов вируса НБ, увеличивало количество защищенных птиц в стаде и повышало уровень иммунного ответа [25-27].

Сыворотки крови от уток были доставлены из ЦФО, СФО и ЮФО: 290 проб из 4 птицехозяйств в 2023 г. и 591 про- ба из 4 птицехозяйств в 2024 г. Специфические к вирусу НБ антитела были выявлены только в 2 пробах (0,7%) из одного птицехозяйства СФО в 2023 г. (рис. 4).

В 2023 г. было исследовано 133 пробы от гусей из птицехозяйства УФО, антитела к вирусу НБ не обнаружены. При исследовании в 2024 г. 373 проб, отобранных в 6 птицехозяйствах ПФО и УФО, антитела к вирусу НБ были выявлены в 86 пробах (23%) от гусей, не вакцинированных против НБ, из республик Башкортостан и Татарстан. Иммунизация домашних водоплавающих птиц (уток и гусей) против НБ в промышленных хозяйствах проводится очень редко, так как эти виды птиц менее чувствительны к НБ, чем куры, но в то же время они могут служить резервуаром этой болезни в птицеводческих хозяйствах [11][28].

В сыворотках крови перепелов из двух федеральных округов (ЦФО и ДВФО), исследованных в течение двух лет, антитела к вирусу НБ не обнаружены, в том числе и у вакцинированных птиц (рис. 4). Отсутствие специфических антител у вакцинированных перепелов в наших мониторинговых исследованиях может быть связано с неправильными сроками отбора проб после вакцинации или с некорректной схемой иммунизации.

В течение 2023 и 2024 гг. на наличие антител к вирусу НБ было исследовано соответственно 7796 и 5484 про- бы сыворотки крови от домашних птиц ЛПХ и КФХ из 39 субъектов 8 федеральных округов РФ (табл. 2 и 3).

Исследование сывороток крови домашней птицы из ЛПХ и КФХ показало наличие специфических к вирусу НБ антител у кур, индеек, уток, гусей и цесарок в 2023 г. и у кур, индеек, гусей и фазанов – в 2024 г.

У кур и индеек антитела к вирусу НБ были выявлены в 35 и 53% проб, исследованных в 2023 и 2024 г. соответственно.

Вакцинация поголовья птиц против НБ в КФХ и ЛПХ, по данным сопроводительных документов, проводилась не во всех хозяйствах. Домашняя птица для ЛПХ в основном приобреталась на птицефабриках, где применялась иммунизация против НБ. Вакцинация проводилась, как правило, однократно, при этом чаще использовались живые вакцины, после введения которых иммунный ответ кратковременен. О повышении уровня вакцинопрофилактики против НБ в индивидуальных хозяйствах можно судить по увеличению количества положительных проб с 35% в 2023 г. до 53% в 2024 г.

От домашних гусей было доставлено на исследование 528 и 314 проб в 2023 и 2024 гг. соответственно. Антитела к вирусу НБ были обнаружены в 67 (2023 г.) и 24 (2024 г.) пробах от не вакцинированных против НБ гусей, доставленных из ЦФО и ПФО. В сыворотках крови домашних уток антитела были обнаружены в 10 про- бах из 270 исследованных (ПФО), в 2024 г. специфических антител к вирусу НБ в сыворотках крови уток не обнаружено. Наличие антител у не вакцинированных против НБ домашних водоплавающих птиц может быть связано с циркуляцией авирулентных штаммов вируса НБ, поскольку пробы для исследования были отобраны от клинически здоровых птиц [11][28]. Антитела к вирусу НБ были обнаружены во всех пробах от вакцинированных цесарок и фазанов.

Многие виды диких птиц являются природными резервуарами и переносчиками возбудителей инфекционных болезней [4][17], в связи с этим проведение мониторинговых исследований в дикой фауне позволяет осуществлять контроль за возникновением и распространением опасных инфекций птиц, в том числе НБ.

В таблице 4 представлены результаты исследования в РТГА сывороток крови от птиц дикой фауны, отобранной в течение 2023–2024 гг.

При исследовании сывороток крови, отобранной от птиц в дикой фауне 7 субъектов РФ, антитела к вирусу НБ были выявлены в 74 пробах из 504 поступивших. Положительными были пробы от птиц из СЗФО, ПФО и СФО: 59 проб от синантропных (голуби) и 15 проб от диких (утки, гуси и чайки) птиц. В Вологодской области специфические антитела к вирусу НБ в пробах от дикой птицы обнаруживали на протяжении 2 лет мониторинговых исследований. Положительные пробы от голубей были получены из Республики Татарстан, Красноярского края и Омской области. В большинстве случаев они были отобраны вблизи территорий крупных птицеводческих хозяйств, что может представлять угрозу распространения инфекции на домашних птиц.

Рис. 1. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни в сыворотках крови кур из промышленных птицеводческих хозяйств (п/х) в 2023–2024 гг.

Fig. 1. Detection of antibodies to Newcastle disease virus in chicken sera collected on commercial poultry farms (п/х) in 2023–2024

Рис. 2. Процент положительных проб (сыворотки крови кур), обнаруженных в 2023–2024 гг., в промышленных птицеводческих хозяйствах различных федеральных округов РФ

Fig. 2. Percentage of positive samples (chicken sera) detected in 2023–2024 on commercial poultry farms in various Federal Districts of the Russian Federation

Рис. 3. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни в сыворотках крови индеек из промышленных птицеводческих хозяйств (п/х) в 2023–2024 гг.

Fig. 3. Detection of antibodies to Newcastle disease virus in turkey sera collected on commercial poultry farms (п/х) in 2023–2024

Рис. 4. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни в сыворотках крови птиц из промышленных птицеводческих хозяйств (п/х) в 2023–2024 гг.

Fig. 4. Detection of antibodies to Newcastle disease virus in sera collected on commercial poultry farms (п/х) in 2023–2024

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В течение 2023–2024 гг. была проведена оценка эпизоотической ситуации по НБ в РФ при исследовании полевых образцов сыворотки крови, отобранной от разных видов домашних и диких птиц. У птиц промышленных предприятий поддерживался высокий уровень позитивности к вирусу НБ вследствие проведения плановых иммунизаций живыми и инактивированными вакцинами в течение всего цикла выращивания сельскохозяйственной птицы. Домашняя птица из ЛПХ вследствие недостаточной защиты от НБ создает постоянную угрозу для возникновения первичных очагов инфекции, вызванной вирулентными штаммами вируса. В 4 регионах РФ антитела к вирусу НБ были обнаружены у диких и синантропных птиц.