Использование рекомбинантных белков рЗО, pK205R и pB602L в серодиагностике африканской чумы свиней

Экспрессией в £ coli получены рекомбинантные белки рЗО, pK205R и pB602L вируса африканской чумы свиней. На основе рекомбинантных антигенов разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа для обнаружения антител к вирусу африканской чумы свиней. Диагностическая специфичность тест-систем pK205R-и рВ6021_-ИФА составляла 99,8%, рЗО-ИФА - 99,5%. На референтной панели положительных сывороток диагностическая чувствительность составляла 100% для рЗО-ИФА и pK205R-H®A и 94,12% - для рВ6021_-ИФА. При исследовании сыворотокот экспериментально и естественно инфицированных животных рЗО-ИФА и pK205R-H®A превосходили по чувствительности коммерческие тест-системы и были сравнимы с иммуноферментным анализом, который Всемирная организация здравоохранения животных рекомендует для серодиагностики африканской чумы свиней. Международные сличительные испытания по диагностике африканской чумы свиней подтвердили высокую специфичность и чувствительностьтест-систем рЗО-ИФА и pK205R-H®A.

африканская чума свиней, иммуноферментный анализ, рекомбинантные белки, антитела, African swine fever (ASF), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), recombinant proteins, antibodies

1. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Д. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. - М.: Мир, 1984, - 480 с.

2. Тимина А.М.,Якупов М.Р., Щербаков A.B. Результаты участия в международных сличительных испытаниях по диагностике африканской чумы свиней//Ветеринария сегодня. - 2015. - №1 (12). - С. 9-14.

3. African swine fever //Manual of DiagnosticTestsand Vaccines forTerrestrial Animals (Mammals, Birds and Bees) / OIE. - 7th ed. - Paris, France, 2012. - Vol. 2, Chapter 2.8.1. - P. 1067-1079.

4. African swine fever virus serodiagnosis: a general review with a focus on the analyses of African serum samples / C. Cubillos, S. Gómez-Sebastian, N. Moreno [et al.] //Virus Res. - 2013. - Vol. 173, № 1. - P. 159-167.

5. Antigenic properties and diagnostic potential of African swine fever virus protein pp62 expressed in insect cells/С. Gallardo, E. Blanco, J.M. Rodriguez [et al.] //J. Clin. Microbiol. - 2006. - Vol. 44, № 3. - P. 950-956.

6. Escribano J.M., Pastor M.J., Sânchez-Vizcaino J.M. Antibodies to bovine serum albumin in swine sera: implications for false-positive reactions in the serodiagnosis of African swine fever // Am. J. Vet. Res. - 1989. - Vol. 50, № 7. - P. 1118-1122.

7. High level expression ofthe major antigenic African swine fever virus proteins p54 and рЗО in baculovirus and their potential use as diagnostic reagents / J.M. Oviedo, F. Rodriguez, P. Gômez-Puertas [et al.] //J. Virol. Methods. - 1997. - Vol. 64, № 1. - P. 27-35.

8. Highly specific confirmatory western blot test of African swine fever virus antibody detection using the recombinant virus protein p54 / C.l. Alcaraz, F. Rodriguez, J.M. Oviedo [et al.] // J. Virol. Methods. - 1995.- Vol. 52. - P. 111-119.

9. Optimization and validation of recombinant serological tests for African swine fever diagnosis based on detection ofthe рЗО protein produced in Trichoplusia ni larvae / D.M. Pérez-Filgueira, F. Gonzâlez-Camacho, C. Gallardo [et al.] // J. Clin. Microbiol. - 2006. - Vol. 44, № 9. - P. 3114-3121.

10. Recombinant antigen targets for serodiagnosis of African swine fever / C. Gallardo, A.L. Reis, G. Kalema-Zikusoka [et al.] // Clin, and Vaccine Immunol. - 2009. - Vol. 16, -P. 1012-1020.

11. Sancyez-Vizcaino J.M. African swine fever// Dis. of Swine / ed. B.E. Straw [et al.]. - 9th ed. - Ames, Iowa, 2006. - P. 291-298.

12. Serodiagnosis of African swine fever using the recombinant protein рЗО expressed in insect larvae / M.G. Barderas, A. Wigdorovitz, F. Merelo [et al.] // J. Virol. Methods. - 2000. - Vol. 89, № 1 -2. - P. 129-136.

13. Systematic analysis of longitudinal serological responses of pigs infected experimentally with African swine fever virus/A.L. Reis, R.M.E. Parkhouse, A.R. Penedos [et al.] //J. Gen. Virol. - 2007. - Vol. 88. - P. 2426-2434.