Идентификация Т- и В-лимфоцитов кур и их субпопуляций методом проточной цитофлуориметрии с использованием проточного цитометра BD FACSVerse™

В настоящее время проточная цитометрия находит всё большее применение в ветеринарной иммунологии. Использование различных наборов клеточных маркеров позволяет проводить исследования типов клеток и их функционального состояния, определять количественное соотношение различных субпопуляций клеток. Иммунофенотипирование лимфоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации или CD-антигенов. Классификация CD {duster of differentiation antigens) основана на различиях между кластерами клеток в поверхностных дифферен-цировочных маркерах. РЕЗЮМЕ Разработана методика идентификации T- и В-лимфоцитов кур и их субпопуляций методом проточной цитометрии с использованием прибора BD FACSVerseTM. Определён способ выделения лимфоцитарного гейта под контролем экспрессии общего лейкоцитарного антигена CD45 и моноцитарного антигена. Подобраны и испытаны панели антител для иммунофенотипирования лимфоцитов при исследовании клеточного иммунного ответа кур, позволяющие определить относительное количество Т- и В-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-цитотоксических популяций клеток в крови и лимфоидных органах кур. Показана специфичность и воспроизводимость разработанной методики идентификации субпопуляции лимфоцитов кур

проточная цитофлуориметрия, иммунофенотипирование лимфоцитов кур

1. Медицинские лабораторные технологии. Руководство по клинической лабораторной диагностике / под ред. А.И. Карпищенко. - 3-є изд. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. - Т. 2. - С. 274-314.

2. Хайдуков С.В., Зурочка A.B., Черешнёв В.А. Многоцветный цитометрический анализ. Идентификация Т-клеток и их субпопуляций по экспрессии αβ-TcR и γδ-TcR // Медицинская иммунология. - 2008. - Т. 10, № 2-3. - С. 115-124.

3. Evaluation of CD45+ cells kinetics in the blood of fattening chickens immunized with live or inactivated Newcastle disease vaccine / M. Popovic, M. Balenovic, A.E. Kabalin [et al.] // Veterinarski Arhiv. - 2010. - Vol. 80, № 1.- P. 61-69.

4. Flow cytometric assessment of antigen-specific proliferation in peripheral chicken T cells by CFSE dilution/ T.S. Dalgaaard, L.R. Norup, D. Rubbenstroth [et al.] //Vet. Immunol. Immunopathol. - 2010. - Vol. 138, № 1-2. - P. 85-94.

5. Flow cytometric immune profiling of specific-pathogen-free chickens before and after infectious challenges/ B.C.B. Beirao.C. FavoroJr., L.S. Nakao [etal.]//Vet. Immunol.Immunopathol. - 2012. -Vol. 145, № 1-2.- P. 32-41.

6. Immunophenotyping of chicken peripheral blood lymphocyte subpopulations: Individual variability and repeatability / Y. M. Fair, K.J. Taylor-McCabe, Y. Shou, B.L. Marrone //Vet. Immunol.Immunopathol. - 2008. - Vol. 125, № 3-4. - P. 268-273.

7. Kapczynski D.R. Detection of cell-mediated immune response to avian influenza viruses / Animal Influenza Virus: Methods Мої. Biol. -2014,-Vol. 1161, -P. 199-215.

8. T lymphocyte subpopulations diverge in commercially raised chickens / B.W. Bridle, R. Julian, P.E. Shewen [et al.] // Can. J. Vet. Res. - 2006. - Vol. 70. - P. 183-190