Свойства изолятов Actinobacillus pleuropneumoniae

Представлены результаты изучения биологических свойств (биохимические, протеомические, антигенные и патогенные) 6 изолятов Actinobacillus pleuropneumoniae, выделенных от больных свиней в животноводческих хозяйствах Российской Федерации. Протеомические свойства определяли посредством масс-спектрометрического анализа с использованием масс-спектрометра Autof MS 1000 (Autobio Diagnostics Co., Ltd, Китай): были построены белковые профили и определены характерные пики для каждого изолята. Установлено, что все масс-спектры изучаемых изолятов актинобацилл и референтного штамма Actinobacillus pleuropneumoniae DSM 13472 находятся в диапазоне m/z 2000–12 000 Да. Для всех изолятов и штамма Actinobacillus pleuropneumoniae общими были пики m/z: 2541 ± 2; 4267 ± 2; 5085 ± 2; 6450 ± 2; 7207 ± 4; 9408 ± 3; 11 820 ± 6, при этом самая высокая интенсивность (100%) была зарегистрирована для пика 5085 ± 2, который, как предполагаем, можно считать исключительной особенностью Actinobacillus pleuropneumoniae. Принадлежность всех изолятов к виду Actinobacillus pleuropneumoniae и серотипам 2, 5 и 9 была подтверждена методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием видо- и серотип-специфичных праймеров. Патогенные свойства Actinobacillus pleuropneumoniae определяли при экспериментальном заражении белых мышей и поросят 2,5–3,0-месячного возраста. Все испытуемые изоляты были патогенны как для белых мышей, так и для свиней. Установлено, что из всех изучаемых изолятов наиболее высокая вирулентность характерна для изолята № 4, который относится к 5-му серотипу. Так, ЛД₅₀ для белых мышей составила 4,19 lg м. к., для поросят – 5,49 lg м. к., что согласуется с данными других авторов, проводивших исследования патогенности актинобацилл, выделенных на территории Российской Федерации. Изоляты депонированы в коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ».

1. Скородумов Д. И. Актинобациллезная (гемофилезная) плевропневмония и гемофилезный полисерозит свиней (этиология, лабораторная диагностика, основы специфической профилактики актинобациллезной плевропневмонии): автореф. дис. … д-ра вет. наук. М.; 1997. 38 с.

2. Desrosiers R., Moore C. Indirect transmission of Actinobacillus pleuropneumoniae. Swine Health and Production. 1998; 6 (6): 263–265.

3. Jacobsen M. J., Nielsen J. P., Nielsen R. Comparison of virulence of different Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes and biotypes using an aerosol infection model. Vet. Microbiol. 1996; 49 (3–4): 159–168. DOI: 10.1016/0378-1135(95)00184-0.

4. Jobert J. L., Savoye C., Cariolet R., Kobisch M., Madec F. Experimental aerosol transmission of Actinobacillus pleuropneumoniae to pigs. Can. J. Vet. Res. 2000; 64 (1): 21–26. PMID: 10680652.

5. Gottschalk M. Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes, pathogenicity and virulence. Proc. AASV. 2007; 381–384.

6. Русалеев В. С., Бирюченков Д. А., Фроловцева А. А. Актинобациллезная плевропневмония свиней: профилактика и меры борьбы. Свиноводство. 2007; 4: 28–29. EDN: IBOJBB.

7. Скородумов Д. И. Актинобациллезная пневмония свиней. Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008; 12: 10–13.

8. Тимина А. М., Бирюченкова М. В., Щербаков А. В. Генодиагностика актинобациллезной плевропневмонии свиней. Труды Федерального центра охраны здоровья животных. 2010; 8: 114–121. EDN: NDHHLN.

9. Haesebrouck F., Chiers K., Van Overbeke I., Ducatelle R. Actinobacillus pleuropneumoniae infections in pigs: the role of virulence factors in pathogenesis and protection. Vet. Microbiol. 1997; 58 (2–4): 239–249. DOI: 10.1016/s0378-1135(97)00162-4.

10. Фроловцева А. А. Получение антигенов Actinobacillus pleuropneumoniae для инактивированных вакцин: автореф. дис. … канд. вет. наук. Владимир; 2008. 25 с.

11. Cruijsen T., van Leengoed L. A., Ham-Hoffies M., Verheijden J. H. Convalescent pigs are protected completely against infection with a homologous Actinobacillus pleuropneumoniae strain butincompletely against a heterologous-serotype strain. Infect. Immun. 1995; 63 (6): 2341–2343. DOI: 10.1128/iai.63.6.2341-2343.1995.

12. Loera-Muro A., Angulo C. New trends in innovative vaccine development against Actinobacillus pleuropneumoniae. Vet. Microbiol. 2018; 217: 66–75. DOI: 10.1016/j.vetmic.2018.02.028.

13. Ramjeet M., Deslandes V., Gouré J., Jacques M. Actinobacillus pleuropneumoniae vaccines: from bacterins to new insights into vaccination strategies. Anim. Health Res. Rev. 2008; 9 (1): 25–45. DOI: 10.1017/S1466252307001338.

14. Потехин А. В., Лебедев Н. В., Русалеев В. С. Антигенные и иммуногенные свойства анатоксина Actinobacillus pleuropneumoniae. Ветеринария и кормление. 2013; 5: 42–43. EDN: RCBGQR.

15. Stancheva S. G., Frömbling J., Sassu E. L., Hennig-Pauka I., Ladinig A., GernerW., et al. Proteomic and immunoproteomic insightsinto the exoproteome of Actinobacillus pleuropneumoniae, the causative agent of porcine pleuropneumonia. Microb. Pathog. 2022; 172:105759. DOI: 10.1016/j.micpath.2022.105759.

16. Antenucci F., Magnowska Z., Nimtz M., Roesch C., Jänsch L., Bojesen A. M. Immunoproteomic characterization of outer membrane vesiclesfrom hyper-vesiculating Actinobacillus pleuropneumoniae. Vet. Microbiol. 2019; 235: 188–194. DOI: 10.1016/j.vetmic.2019.07.001.

17. Kuhnert P., Bisgaard M., Korczak B. M. Schwendener S., Christensen Н., Frey J. Identification of animal Pasteurellaceae by MALDI-TOF mass spectrometry. J. Microbiol. Methods. 2012; 89 (1): 1–7. DOI: 10.1016/j.mimet.2012.02.001.

18. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П., Стейли Дж., Уилльямс С. Определитель бактерий Берджи. В 2 т. М.: Мир; 1997. 800 с.

19. Xiao G., Cao S., Huang X., Wen X. DNA microarray-based identification and typing of Actinobacillus pleuropneumoniae. Can. J. Vet. Res. 2009; 73 (3): 190–199. PMID: 19794891.

20. Angen O., Ahrens P., Jessing S. G. Development of a multiplex PCR test for identification of Actinobacillus pleuropneumoniae serovars 1, 7, and 12. Vet. Microbiol. 2008; 132 (3–4): 312–318. DOI: 10.1016/j.vetmic.2008.05.010.

21. Zhou L., Jones S. C., Angen Ø., Bossé J. T., Nash J. H., Frey J., et al. Multiplex PCR that can distinguish between immunologically cross-reactive serovar 3, 6, and 8 Actinobacillus pleuropneumoniae strains. J. Clin. Microbiol. 2008; 46 (2): 800–803. DOI: 10.1128/JCM.01787-07.