Изучение иммунного ответа цыплят после экспериментального заражения изолятами вируса гриппа птиц А/Н9N2

Представлены данные по изучению параметров иммунного ответа цыплят после инфицирования изолятами низкопатогенного вируса гриппа птиц подтипа А/Н9N2, относящимися к генетическим линиям Y-280 и G1. Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы были определены соотношения CD4⁺/CD8⁺ клеток методом проточной цитофлуориметрии. В результате количественного анализа субпопуляций лимфоцитов периферической крови цыплят обнаружено наличие изменений, характерных для иммунной супрессии. При изучении динамики уровня Т- и В-лимфоцитов в крови инфицированных цыплят установлено снижение относительного количества Т-лимфоцитов и увеличение относительного количества В-лимфоцитов в крови. После инфицирования изменение субпопуляционного состава Т-лимфоцитов в процентном соотношении CD4⁺/CD8⁺ клеток отмечено в сторону уменьшения процента CD4⁺ клеток и увеличения процента CD8⁺ клеток. Согласно литературным данным, при иммунизации вакцинными препаратами активация иммунного ответа приводит к обратной динамике в сторону увеличения отношения CD4⁺/CD8⁺ клеток. В формировании иммунного ответа у цыплят после инфицирования вирусами гриппа птиц играет роль не только клеточно-опосредованный, но и гуморальный иммунитет. В результате серологических исследований сывороток крови цыплят после инфицирования на 14-е сут установлен выраженный гуморальный иммунный ответ. Средний титр специфических антител к вирусу гриппа птиц подтипа А/Н9N2 во всех группах цыплят, зараженных изолятами низкопатогенного вируса гриппа птиц, был выше 6 log₂. Высокий уровень специфических антител к вирусу гриппа птиц показал развитие постинфекционного гуморального иммунного ответа. 

1. Avian influenza (infection with avian influenza viruses). In: OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. Chapter 3.3.4. Available at: https://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/tahm/3.03.04_AI.pdf.

2. Peacock T. H. P., James J., Sealy J. E., Iqbal M. A global perspective on H9N2 avian influenza virus. Viruses. 2019; 11 (7):620. DOI: 10.3390/v11070620.

3. Zhang P., Tang Y., Liu X., Liu W., Zhang X., Liu H., et al. A novel genotype H9N2 influenza virus possessing human H5N1 internal genomes has been circulating in poultry in eastern China since 1998. J. Virol. 2009; 83 (17): 8428–8438. DOI: 10.1128/JVI.00659-09.

4. Alexander D. J. Summary of avian influenza activity in Europe, Asia, Africa, and Australasia, 2002–2006. Avian Dis. 2007; 51 (1 Suppl): 161–166. DOI: 10.1637/7602-041306R.1.

5. Lee Y. J., Shin J. Y., Song M. S., Lee Y. M., Choi J. G., Lee E. K., et al. Continuing evolution of H9 influenza viruses in Korean poultry. Virology. 2007; 359 (2): 313–323. DOI: 10.1016/j.virol.2006.09.025.

6. Sun Y., Liu J. H9N2 influenza virus in China: a cause of concern. Protein Cell. 2015; 6 (1): 18–25. DOI: 10.1007/s13238-014-0111-7.

7. Li Y., Liu M., Sun Q., Zhang H., Zhang H., Jiang S., et al. Genotypic evolution and epidemiological characteristics of H9N2 influenza virus in Shandong Province, China. Poult. Sci. 2019; 98 (9): 3488–3495. DOI: 10.3382/ps/pez151.

8. Kishida N., Sakoda Y., Eto M., Sunaga Y., Kida H. Co-infection of Staphylococcus aureus or Haemophilus paragallinarum exacerbates H9N2 influenza A virus infection in chickens. Arch. Virol. 2004; 149 (11): 2095–2104. DOI: 10.1007/s00705-004-0372-1.

9. Mancini D. A., Mendonça R. M., Dias A. L., Mendonça R. Z., Pinto J. R. Co-infection between influenza virus and flagellated bacteria. Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo. 2005; 47 (5): 275–280. DOI: 10.1590/s0036-46652005000500007.

10. Варкентин А. В., Волков М. С., Ирза В. Н. Низкопатогенный грипп птиц, вызванный вирусом подтипа Н9. Обзор литературы. Труды федерального центра охраны здоровья животных. 2014; 12: 41–53. eLIBRARY ID: 22516488.

11. Hassan K. E., Ali A., Shany S. A. S., El-Kady M. F. Experimental coinfection of infectious bronchitis and low pathogenic avian influenza H9N2 viruses in commercial broiler chickens. Res. Vet. Sci. 2017; 115: 356–362. DOI: 10.1016/j.rvsc.2017.06.024.

12. Davidson I., Shkoda I., Golender N., Perk S., Lapin K., Khinich Y., Panshin A. Genetic characterization of HA gene of low pathogenic H9N2 influenza viruses isolated in Israel during 2006–2012 periods. Virus Genes. 2013; 46 (2): 255–263. DOI: 10.1007/s11262-012-0852-4.

13. Wang Y., Davidson I., Fouchier R., Spackman E. Antigenic cartography of H9 avian influenza virus and its application to vaccine selection. Avian Dis. 2016; 60 (1 Suppl): 218–225. DOI: 10.1637/11087-041015-Reg.

14. Hassan K. E., Shany S. A., Ali A., Dahshan A. H., El-Sawah A. A., ElKady M. F. Prevalence of avian respiratory viruses in broiler flocks in Egypt. Poult. Sci. 2016; 95 (6): 1271–1280. DOI: 10.3382/ps/pew068.

15. Astill J., Alkie T., Yitbarek A., Taha-Abdelaziz K., Bavananthasivam J., Nagy É., et al. Induction of immune response in chickens primed in ovo with an inactivated H9N2 avian influenza virus vaccine. BMC Res. Notes. 2018; 11 (1):428. DOI: 10.1186/s13104-018-3537-9.

16. Волков М. С., Варкентин А. В., Ирза В. Н. О распространении вируса низкопатогенного гриппа A/H9N2 в мире и на территории Российской Федерации. Проблемы искоренения болезни. Ветеринария сегодня. 2019; (3): 51–56. DOI: 10.29326/2304-196X-2019-3-30-51-56.

17. Julius M., Maroun C. R., Haughn L. Distinct roles for CD4 and CD8 as co-receptors in antigen receptor signalling. Immunol. Today. 1993; 14 (4): 177–183. DOI: 10.1016/0167-5699(93)90282-p.

18. Overgaard N. H., Jung J. W., Steptoe R. J., Wells J. W. CD4+/CD8+ double-positive T cells: more than just a developmental stage? J. Leukoc. Biol. 2015; 97 (1): 31–38. DOI: 10.1189/jlb.1RU0814-382.

19. Kwon J. S., Lee H. J., Lee D. H., Lee Y. J., Mo I. P., Nahm S. S., et al. Immune responses and pathogenesis in immunocompromised chickens in response to infection with the H9N2 low pathogenic avian influenza virus. Virus Res. 2008; 133 (2): 187–194. DOI: 10.1016/j.virusres.2007.12.019.

20. Suarez D. L., Schultz-Cherry S. Immunology of avian influenza virus: a review. Dev. Comp. Immunol. 2000; 24 (2–3): 269–283. DOI: 10.1016/s0145-305x(99)00078-6.

21. Hao X., Li S., Chen L., Dong M., Wang J., Hu J., et al. Establishing a multicolor flow cytometry to characterize cellular immune response in chickens following H7N9 avian influenza virus infection. Viruses. 2020; 12 (12):1396. DOI: 10.3390/v12121396.

22. Dai M., Li S., Keyi Shi, Sun H., Zhao L., Deshui Yu, et al. Comparative analysis of key immune protection factors in H9N2 avian influenza viruses infected and immunized specific pathogen-free chicken. Poult. Sci. 2021; 100 (1): 39–46. DOI: 10.1016/j.psj.2020.09.080.

23. Xue M., Shi X., Zhao Y., Cui H., Hu S., Cui X., Wang Y. Effects of reticuloendotheliosis virus infection on cytokine production in SPF chickens. PLoS One. 2013; 8 (12):e83918. DOI: 10.1371/journal.pone.0083918.

24. Yang S., Li G., Zhao Z., Huang Z., Fu J., Song M., et al. Taishan Pinus massoniana pollen polysaccharides enhance immune responses in chickens infected by avian leukosis virus subgroup B. Immunol. Invest. 2018; 47 (5): 443–456. DOI: 10.1080/08820139.2018.1435689.

25. Fu L., Wang X., Zhai J., Qi W., Jing L., Ge Y., et al. Changes in apoptosis, proliferation and T lymphocyte subtype on thymic cells of SPF chickens infected with reticuloendotheliosis virus. Mol. Immunol. 2019; 111: 87–94. DOI: 10.1016/j.molimm.2019.04.003.

26. Dai M., Li S., Shi K., Liao J., Sun H., Liao M. Systematic identification of host immune key factors influencing viral infection in PBL of ALV-J infected SPF chicken. Viruses. 2020; 12 (1):114. DOI: 10.3390/v12010114.

27. Медицинские лабораторные технологии: руководство по клинической лабораторной диагностике. Под ред. А. И. Карпищенко. 3-е изд., перераб. и доп. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2013; Т. 2: 274–314.

28. Yang Y., Dong M., Hao X., Qin A., Shang S. Revisiting cellular immune response to oncogenic Marek’s disease virus: the rising of avian T-cell immunity. Cell. Mol. Life Sci. 2020; 77 (16): 3103–3116. DOI: 10.1007/s00018-020-03477-z.

29. Dai M., Xu C., Chen W., Liao M. Progress on chicken T cell immunity to viruses. Cell. Mol. Life Sci. 2019; 76 (14): 2779–2788. DOI: 10.1007/s00018- 019-03117-1.

30. Liu A. L., Li Y. F., Qi W., Ma X. L., Yu K. X., Huang B., et al. Comparative analysis of selected innate immune-related genes following infection of immortal DF-1 cells with highly pathogenic (H5N1) and low pathogenic (H9N2) avian influenza viruses. Virus Genes. 2015; 50 (2): 189–199. DOI: 10.1007/s11262-014-1151-z.