Preview

Ветеринария сегодня

Расширенный поиск

Получение иммортализованной культуры клеток почки кролика

https://doi.org/10.29326/2304-196X-2020-4-35-298-303

Полный текст:

Аннотация

Получение иммортализованных клеточных линий, происходящих из органов и тканей сельскохозяйственных животных, является актуальным направлением биотехнологии. В статье представлены результаты получения постоянной (иммортализованной) клеточной линии из первично трипсинизированной культуры клеток почки взрослого кролика. В процессе субкультивирования проводили цитоморфологические и кариологические исследования на 1, 3, 24, 31, 38, 56, 66, 75, 86, 101-м пассажах. При проведении длительных последовательных пассажей была прослежена динамика спонтанного формирования постоянной клеточной линии с использованием стандартных питательных сред и эмбриональной сыворотки. В отличие от известных клеточных линий, произошедших от обыкновенного домашнего кролика (Oryctolagus cuniculus L.), было отмечено, что иммортализация не сопровождалась увеличением продуктивности клеток и уменьшением их размеров. Размеры клеток полученной перевиваемой линии достигали в адгезированном состоянии 200 микрометров, продуктивность составляла 7000 клеток на квадратный сантиметр. Значительные отличия (в сравнении с известными линиями) в процессе пассирования обнаруживались и в кариотипе. При стабилизации культуральных свойств постоянной линии клеток на 66–101-м пассажах генотип сформировался как околотетраплоидный. Известные клеточные линии – почка кролика (RK-13) и роговица глаза кролика (SIRC) – по кариотипу оказались псевдотриплоидные. Данная культура оказалась малочувствительной к вирусам – возбудителям болезней кроликов и чувствительной к гетерологичным вирусам свиней и крупного рогатого скота.

Об авторах

Б. Л. Манин
ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
Россия

Манин Борис Леонидович, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник сектора культуры клеток отдела инноваций

г. Владимир



И. В. Вологина
ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
Россия

Вологина Ирина Викторовна, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник сектора культуры клеток отдела инноваций

г. Владимир



Е. А. Трофимова
ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
Россия

Трофимова Елена Александровна, ведущий технолог сектора культуры клеток

г. Владимир



Список литературы

1. Hayflick L., Moorhead P. S. The serial cultivation of human diploid cell strains. Exp. Cell Res. 1961; 25 (3): 585–621. DOI: 10.1016/0014-4827(61)90192-6.

2. Дункан Э. Л., Реддел Р. Р. Генетические изменения, связанные с иммортализацией. Биохимия. 1997; 62 (11): 1477–1490. Режим доступа: https://journals.belozersky.msu.ru/biochemistry-content/d/1997/11/1477-1490.pdf.

3. Мамаева С. Е. Закономерности кариотипической эволюции клеток в культуре. Цитология. 1996; 38 (8): 787–814.

4. Полянская Г. Г. Кариотипическая изменчивость в клеточных линиях и структура кариотипа. Клеточные культуры (информационный бюллетень). 2009; 24: 15–24.

5. Манин Б. Л., Коропова Н. В., Трофимова Е. А. Идентификация постоянных клеточных линий животных по кариологическим, морфологическим и культуральным признакам. Труды Федерального центра охраны здоровья животных. 2012; 10: 246–254. eLIBRARY ID: 18881531.

6. Каталог. Российская коллекция клеточных культур (РККК). Ред. Г. П. Пинаев и др. СПб.; 2004. 315 с.

7. Глаголева И. С., Плотникова Э. М. Возможность применения первичных культур клеток почек новорожденных крольчат в производстве вакцинных препаратов. Гены и клетки. 2014; 9 (3): 151–154. eLIBRARY ID: 29332365.

8. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии). Под ред. Л. П. Дьяконова; Рос. акад. с.-х. наук. 2-е изд. доп. М.: Спутник+; 2009. 656 с.

9. Плотникова Э. М., Кириллова Ю. М., Глаголева И. С. Подбор оптимальных условий роста первичной культуры клеток почек новорожденных кроликов. Веткорм. 2012; 4: 42–44. eLIBRARY ID: 20356980.

10. Вологина И. В., Манин Б. Л., Коропова Н. В. Оптимизация условий трипсинизации и культивирования первичных клеток почек кролик. Достижения молодых ученых – в ветеринарную практику: материалы V Международной научной конференции (г. Владимир, 5–6 декабря 2019 г.). Под общ. ред. Д. А. Лозового. Владимир: ФГБУ «ВНИИЗЖ»; 2019; 57–62. eLIBRARY ID: 41589695.

11. Реддел Р. Р., Брайан Т. М., Мернейн Д. П. Иммортализованные клетки без измеримой активности теломеразы. Биохимия. 1997; 62 (11): 1467–1476. Режим доступа: http://journals.belozersky.msu.ru/biochemistry/paper/1997/11/1467.


Для цитирования:


Манин Б.Л., Вологина И.В., Трофимова Е.А. Получение иммортализованной культуры клеток почки кролика. Ветеринария сегодня. 2020;(4):297-303. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2020-4-35-298-303

For citation:


Manin V.L., Vologina I.V., Trofimova Y.A. Preparation of rabbit kidney immortalized cell culture. Veterinary Science Today. 2020;(4):297-303. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2020-4-35-298-303

Просмотров: 119


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2304-196X (Print)
ISSN 2658-6959 (Online)