ИЗУЧЕНИЕ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДИНАМИКИ ТРАНСФОРМАЦИИ ДНК В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ВНК-21/2-17 ПРИ РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ЯЩУРА
Аннотация
В задачу исследований входило изучение динамики трансформации ДНК клеток ВНК-21/2-17 при репродукции в них вируса ящура. Отмечено, что разрушение основной популяции клеток совпадало по времени с увеличением апоптических клеток и количеством детрита. Через 3 ч после инфицирования культуры клеток наблюдалось увеличение апоптоза и дебриса, уменьшение на 17–21% G1-фазы, увеличение в 2,3 раза многоядерных клеток. Через 7 ч резко увеличивалась гибель клеток. Выявлено, что на всех этапах культивирования вируса ящура в суспензионной линии клеток ВНК-21/2-17 преобладала диплоидная форма клеток – G1(2n), которая являлась основой при репродукции вируса. Клетки, находившиеся в синтетической (S), G2и M-фазах, были менее подвержены действию вируса. Проточная цитометрия позволила определить количественные параметры фаз клеточного цикла при репродукции в клетках вируса ящура. Также удалось провести сравнение между этими фазами, жизнеспособностью культуры клеток и динамикой репродукции вируса. Проведенные исследования цитопатического действия вируса ящура в клетках ВНК-21/2-17 показали, что одним из направлений оптимизации производства культуральных вакцин может быть применение фактора торможения пролиферации на определенной фазе клеточного цикла.
Ключевые слова
Об авторах
М. Н. ГусеваРоссия
Старший научный сотрудник, кандидат биологических наук
Владимир
М. А. Шевченко
Россия
Ведущий ветеринарный врач
Владимир
Д. В. Михалишин
Россия
Заведующий лабораторией, кандидат ветеринарных наук
Владимир
В. В. Михалишин
Россия
Главный эксперт, доктор ветеринарных наук, профессор
Владимир
Б. Л. Манин
Россия
Ведущий научный сотрудник, кандидат биологических наук
Владимир
Список литературы
1. Войткова В. В. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуометрии (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2010. – № 6 (76), ч. 1. – С. 220–225.
2. Исследование клеточного цикла линии ВНК-21/2-17 методом проточной цитометрии / М. А. Шевченко, М. Н. Гусева, Д. В. Михалишин [и др.] // Ветеринария сегодня. – 2017. – № 4. – С. 58–62.
3. Клетки / под ред. Б. Льюин [и др.]. – М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2011. – 951 с.
4. Основные этапы разработки и применения метода проточной цитометрии в ФГУ РНЦРХТ / А. С. Ягунов, А. В. Карташев, С. В. Токалов, Л. Н. Киселева // Вопросы онкологии. – 2008. – Т. 54, № 4. – С. 494–497.
5. Пономарев А. П., Узюмов В. Л., Груздев К. Н. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства. – Владимир: Фолиант, 2006. – 250 с.
6. Эффективность метода проточной цитометрии в изучении механизмов репарации клеток ВНК-21 в процессе культивирования и криоконсервирования / Б. Л. Манин, В. Т. Ночевный, С. В. Хайдуков, В. Н. Ласкавый // Ветеринарна медицина: мiжвiд. тем. наук. зб. – Харкiв, 2011. – Вип. 95. – С. 66–70.
7. Ящур: монография / А. Н. Бурдов, А. И. Дудников, П. В. Малярец [и др.]; под ред. А. Н. Бурдова. – М.: Агропромиздат, 1990. – 320 с.
Рецензия
Для цитирования:
Гусева М.Н., Шевченко М.А., Михалишин Д.В., Михалишин В.В., Манин Б.Л. ИЗУЧЕНИЕ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДИНАМИКИ ТРАНСФОРМАЦИИ ДНК В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ВНК-21/2-17 ПРИ РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ЯЩУРА. Ветеринария сегодня. 2018;(4):39-43. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-4-27-39-43
For citation:
Guseva M.N., Shevchenko M.A., Mikhalishin D.V., Mikhalishin V.V., Manin B.L. STUDY OF DNA TRANSFORMATION DYNAMICS IN ВНК-21/2-17 CELL CULTURE USING FLOW CYTOMETRY DURING FMD VIRUS REPRODUCTION. Veterinary Science Today. 2018;(4):39-43. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-4-27-39-43