ИЗУЧЕНИЕ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ДИНАМИКИ ТРАНСФОРМАЦИИ ДНК В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ВНК-21/2-17 ПРИ РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ЯЩУРА

В задачу исследований входило изучение динамики трансформации ДНК клеток ВНК-21/2-17 при репродукции в них вируса ящура. Отмечено, что разрушение основной популяции клеток совпадало по времени с увеличением апоптических клеток и количеством детрита. Через 3 ч после инфицирования культуры клеток наблюдалось увеличение апоптоза и дебриса, уменьшение на 17–21% G1-фазы, увеличение в 2,3 раза многоядерных клеток. Через 7 ч резко увеличивалась гибель клеток. Выявлено, что на всех этапах культивирования вируса ящура в суспензионной линии клеток ВНК-21/2-17 преобладала диплоидная форма клеток – G1(2n), которая являлась основой при репродукции вируса. Клетки, находившиеся в синтетической (S), G2и M-фазах, были менее подвержены действию вируса. Проточная цитометрия позволила определить количественные параметры фаз клеточного цикла при репродукции в клетках вируса ящура. Также удалось провести сравнение между этими фазами, жизнеспособностью культуры клеток и динамикой репродукции вируса. Проведенные исследования цитопатического действия вируса ящура в клетках ВНК-21/2-17 показали, что одним из направлений оптимизации производства культуральных вакцин может быть применение фактора торможения пролиферации на определенной фазе клеточного цикла.

1. Войткова В. В. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуометрии (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2010. – № 6 (76), ч. 1. – С. 220–225.

2. Исследование клеточного цикла линии ВНК-21/2-17 методом проточной цитометрии / М. А. Шевченко, М. Н. Гусева, Д. В. Михалишин [и др.] // Ветеринария сегодня. – 2017. – № 4. – С. 58–62.

3. Клетки / под ред. Б. Льюин [и др.]. – М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2011. – 951 с.

4. Основные этапы разработки и применения метода проточной цитометрии в ФГУ РНЦРХТ / А. С. Ягунов, А. В. Карташев, С. В. Токалов, Л. Н. Киселева // Вопросы онкологии. – 2008. – Т. 54, № 4. – С. 494–497.

5. Пономарев А. П., Узюмов В. Л., Груздев К. Н. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства. – Владимир: Фолиант, 2006. – 250 с.

6. Эффективность метода проточной цитометрии в изучении механизмов репарации клеток ВНК-21 в процессе культивирования и криоконсервирования / Б. Л. Манин, В. Т. Ночевный, С. В. Хайдуков, В. Н. Ласкавый // Ветеринарна медицина: мiжвiд. тем. наук. зб. – Харкiв, 2011. – Вип. 95. – С. 66–70.

7. Ящур: монография / А. Н. Бурдов, А. И. Дудников, П. В. Малярец [и др.]; под ред. А. Н. Бурдова. – М.: Агропромиздат, 1990. – 320 с.