STUDIES OF THE BHK-21/2-17 LINEAGE USING FLOW CYTOMETRY

The paper presents results of the ВНК-21/2-17 lineage cell cycle tests using flow cytometry. This cell line is widely used in biological industry that is why studying the ВНК-21/2-17 cell suspension pattern using the proposed technique and determination of tools and methods to prevent morphological and structural cell modifications in the culture affected by negative factors is of great interest. Flow cytometry allows to determine quantitative parameters of cell cycle phases and perform correlation between these phases and viability of the working cell population. It was mentioned that the general trend of this cell lineage suspension cultivation for 48 hours has a standard dynamics, herewith at all stages of the cell cycle the primary growth stage - G₁ prevailed. Under unfavorable conditions of cultivation apoptotic debris could increase up to 31-59%, i. e. part of the cell population could be potentially non-reproductive. Unsuccessful cultivation stages associated with low pH content in the cultivator where pH was not maintained at the constant level were detected. During optimization of cell cultivation physical and chemical parameters proliferation intensity increased. Viable cell yield during cultivation when a specific pH was maintained was higher and at the synthetic stage G₂ + M no cycle delay occurred.

проточная цитометрия, апоптоз, фазы клеточного цикла, flow cytometry, apoptosis, cell cycle phases

1. Войткова В. В. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуориметрии (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2010. - № 6 (76), ч. 1. - С. 220-225.

2. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии) / под ред. Л. П. Дьяконова. - М.: Спутник+, 2009. - 656 с.

3. Клетки / под ред. Б. Льюина [и др.]. - М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2011. - 951 с.

4. Колышкин В. М., Ночевный В. Т., Новохатский А. С. Апоптоз клеток в культуре: особенности проявления и влияние на эффективность биотехнологического производства (обзор) // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2005. - № 6. - С. 99-105.

5. Манин Б. Л., Худяков Г. А., Бурдов А. Н. Оценка функционального состояния клеток по их морфологии при криоконсервировании с помощью различных методов // Актуальные проблемы ветеринарной вирусологии: тез. докладов науч. конф. ВНИЯИ. - Владимир, 1988. - С. 5-6.

6. Основные этапы разработки и применения метода проточной цитометрии в ФГУ РНЦРХТ / А. С. Ягунов, А. В. Карташев, С. В. Токалов, Л. Н. Киселева // Вопросы онкологии. - 2008. -Т. 54, № 4. - С. 494-497.

7. Эффективность метода проточной цитометрии в изучении механизмов репарации клеток ВНК-21 в процессе культивирования и криоконсервирования / Б. Л. Манин, В. Т. Ночевный, С. В. Хайдуков, В. Н. Ласкавый // Ветеринарна медицина: міжвід. тем. наук. зб. - Харків, 2011. - Вип. 95. - С. 66-70.