Optimization of nutrient medium composition for BHK-21/2-17 suspension culture

The paper demonstrates results of the research aimed at optimization of amino acid composition of the nutrient media used for BHK-21-2/17 suspension cultivation by change of amino acid amount in such media. Growth level in the control and tested media amounted to 5.6; cell growth dynamics was also similar. In-media utilization of different amino acids was different. The cells mostly consumed glutamin, serine, tyrosine, methionin (up to 90%, 55%, 40% and 60%, respectively). Growth of alanine level was reported (from 10% in the control sample and up to 60% in the test sample). Amount of tryptophan and glutamic acid remained stable. Glycine, threonine, isoleucine were actively utilized within the first 24 hours (7-13%, 10-18%, 34-41%, respectively in the control experiment). Hereafter, the concentration slightly increased (by 7-45%, by 16-21%, by 20-50%, respectively in the control experiment). During the FMDV reproduction in the cells grown in the test and control media no significant differences in the yield of immunogenic virus components were reported.

клетки ВНК-21/2-17, аминокислоты, аминокислотный состав, гидролизат белков крови, питательная среда, BHK-21/2-17 cells, amino acids, amino acid composition, blood-derived protein hydrolysate, nutrient medium

1. Бондаренко А.Ф. Качественный и количественный иммунохимический анализ вирусных белков. - Суздаль, 1994. - 92 с.

2. Гизитдинов H.H. Питательные среды для выращивания культур клеток и вирусов //Достижения науки и техники. - 1992. - № 6. - С. 22-23.

3. Гудимо О.С., Колесникова H.A., Шошиев Л.Н. Культивирование клеток HeLa на питательных средах с гидролизатами сыворотки крови человека и животных // Вопросы вирусологии. - 1961. - № 3.- С. 375-379.

4. Доценко В.В. Изготовление и исследование эффективности новых основ питательных сред для культивирования клеток и вирусов // Научные основы промышленного производства ветеринарных биологических препаратов:тез. докл. 5 Всерос. конф. - Щелково, 1996. - С. 36-37.

5. Дьяконов Л.П. Культуры клеток животных: современные аспекты биотехнологии и взаимодействия клеток с инъекционными патогенами // Цитология. - 1994. - Т. 36, № 6. - С. 503-504.

6. Дьяконов Л.П.,Строкина Г.М., Конюхов А.Ф. Гидролизаты молочных мышечных и растительных белков как основы питательных сред для культивирования клеток и вирусов// Цитология. - 1994. - Т. 36, № 6.- С. 522.

7. Изучение изменений аминокислотного состава питательных сред в процессе культивирования клеток ВНК-21/2-17 / М.Н. Гусева, Д.А. Лозовой, Е.Г. Кузнецова [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2014. - № З (10). - С. 35-38.

8. Конюхов А.Ф. Метаболические потребности клеточных культур сельскохозяйственных животных и конструирование питательных сред на основе отече ственных компонентов // Ветеринарная иммунология и биотехнология. - 1988. - Т. 66. - С. 125-129.

9. Куликова И.Л., Дьяконов Л.П., Жидков С.А. Культура клеток сосудов теленка и чувствительность клеток этой культуры к вирусу диареи крупного рогатого скота// Цитология. - 1992. - Т. 34, № 9. - С. 75.

10. М-04-38-2009. Методика измерений массовой доли аминокислот методом капиллярного электрофореза с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель» / ООО «Люмэкс-маркетинг». - СПб., 2014. - (Корма, комбикорма и сырье для их производства). - 49 с.

11. Нельсон Д., Кокс М. Основы биохимии Ленинджера.Т. 2. Биоэнергетика и метаболизм. - М.: Бином, 2011, -633 с.

12. Питательная среда для выращивания культур клеток животных: пат. 1025722 СССР, МПК3 C12N1/00/ Г.Е. Панкова, В.А. Сергеев,Л.П. Дьяконов [и др.]. - заявл. 30.10.81; опубл. 30.06.83, Бюл. № 24.

13. Промышленный регламент на производство вакцины против ящура сорбированной моно- и поливалентной (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21)/ ФГБУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2012. - 243 с.

14. Строкина Г.М. Конструирование питательных сред для культивирования клеток животных на основе гидролизатов белков сыворотки молока // Питательные среды и сыворотки для культивирования клеток: тез. докл. Всесоюз. конф., Кольцово, 14-17 окт. 1991. - Новосибирск, 1991. - С. 12.

15. ТУ 64-1-816-84. Камеры для счета форменных элементов крови и клеточных элементов спинно-мозговой жидкости. - С. 5.

16. Фрешни Р.Я. Культура животных клеток. Практическое руководство. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011.- 691 с.