Оптимизация состава питательных сред для культивирования суспензии клеток ВНК-21/2-17

В статье приведены результаты исследований оптимизации аминокислотного состава питательных сред, предназначенных для суспензионного культивирования клеток ВНК-21-2/17, путем изменения количества аминокислот, входящих в них. Установили, что интенсивность прироста в контрольной и опытной питательной среде была 5,6; динамика роста клеток также была одинаковой. Утилизация различных аминокислот в питательной среде происходила по-разному. Больше всего клетки потребляли глютамина, серина, тирозина, метионина (до 90,55,40 и 60% соответственно). Был отмечен рост аланина (от 10% в контроле и до 60% в опыте). Количество триптофана и глутаминовой кислоты оставалось постоянным. Утилизация глицина, треонина, изолейцина проходила интенсивно первые 24 ч (7-13%, 10-18%, 34-41% соответственно в контроле - опыте). Затем концентрация несколько увеличивалась (на 7-45%, на 16-21%, на 20-50% соответственно в контроле - опыте). При репродукции ящура в клетках, выросших в опытной и контрольной среде, значимых различий в выходе иммуногенных компонентов вируса не наблюдали.

клетки ВНК-21/2-17, аминокислоты, аминокислотный состав, гидролизат белков крови, питательная среда, BHK-21/2-17 cells, amino acids, amino acid composition, blood-derived protein hydrolysate, nutrient medium

1. Бондаренко А.Ф. Качественный и количественный иммунохимический анализ вирусных белков. - Суздаль, 1994. - 92 с.

2. Гизитдинов H.H. Питательные среды для выращивания культур клеток и вирусов //Достижения науки и техники. - 1992. - № 6. - С. 22-23.

3. Гудимо О.С., Колесникова H.A., Шошиев Л.Н. Культивирование клеток HeLa на питательных средах с гидролизатами сыворотки крови человека и животных // Вопросы вирусологии. - 1961. - № 3.- С. 375-379.

4. Доценко В.В. Изготовление и исследование эффективности новых основ питательных сред для культивирования клеток и вирусов // Научные основы промышленного производства ветеринарных биологических препаратов:тез. докл. 5 Всерос. конф. - Щелково, 1996. - С. 36-37.

5. Дьяконов Л.П. Культуры клеток животных: современные аспекты биотехнологии и взаимодействия клеток с инъекционными патогенами // Цитология. - 1994. - Т. 36, № 6. - С. 503-504.

6. Дьяконов Л.П.,Строкина Г.М., Конюхов А.Ф. Гидролизаты молочных мышечных и растительных белков как основы питательных сред для культивирования клеток и вирусов// Цитология. - 1994. - Т. 36, № 6.- С. 522.

7. Изучение изменений аминокислотного состава питательных сред в процессе культивирования клеток ВНК-21/2-17 / М.Н. Гусева, Д.А. Лозовой, Е.Г. Кузнецова [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2014. - № З (10). - С. 35-38.

8. Конюхов А.Ф. Метаболические потребности клеточных культур сельскохозяйственных животных и конструирование питательных сред на основе отече ственных компонентов // Ветеринарная иммунология и биотехнология. - 1988. - Т. 66. - С. 125-129.

9. Куликова И.Л., Дьяконов Л.П., Жидков С.А. Культура клеток сосудов теленка и чувствительность клеток этой культуры к вирусу диареи крупного рогатого скота// Цитология. - 1992. - Т. 34, № 9. - С. 75.

10. М-04-38-2009. Методика измерений массовой доли аминокислот методом капиллярного электрофореза с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель» / ООО «Люмэкс-маркетинг». - СПб., 2014. - (Корма, комбикорма и сырье для их производства). - 49 с.

11. Нельсон Д., Кокс М. Основы биохимии Ленинджера.Т. 2. Биоэнергетика и метаболизм. - М.: Бином, 2011, -633 с.

12. Питательная среда для выращивания культур клеток животных: пат. 1025722 СССР, МПК3 C12N1/00/ Г.Е. Панкова, В.А. Сергеев,Л.П. Дьяконов [и др.]. - заявл. 30.10.81; опубл. 30.06.83, Бюл. № 24.

13. Промышленный регламент на производство вакцины против ящура сорбированной моно- и поливалентной (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21)/ ФГБУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2012. - 243 с.

14. Строкина Г.М. Конструирование питательных сред для культивирования клеток животных на основе гидролизатов белков сыворотки молока // Питательные среды и сыворотки для культивирования клеток: тез. докл. Всесоюз. конф., Кольцово, 14-17 окт. 1991. - Новосибирск, 1991. - С. 12.

15. ТУ 64-1-816-84. Камеры для счета форменных элементов крови и клеточных элементов спинно-мозговой жидкости. - С. 5.

16. Фрешни Р.Я. Культура животных клеток. Практическое руководство. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011.- 691 с.