Молекулярная идентификация вируса ньюкаслской болезни, выделенного в домашнем птицехозяйстве Подмосковья летом 2022 года

В августе 2022 г. в Московской области (городской округ Черноголовка, деревня Старки) на личном подворье внезапно начался падеж кур, в результате которого в течение нескольких дней погибли или заболели все 45 голов этого хозяйства со следующими признаками: выделение серой слизи из ноздрей и клюва, резкие кашляющие звуки. Через 1–3 дня после появления симптомов птица погибала. Из тканей, полученных от павших кур, был выделен вирус ньюкаслской болезни, являющийся представителем обширного семейства парамиксовирусов. Определены нуклеотидные последовательности фрагментов гена F, кодирующего поверхностный белок слияния, и гена NP, кодирующего белок нуклеокапсида. Для гена F определен мотив сайта протеолиза ₁₀₉SGGRRQKRFIG₁₁₉, типичный для велогенного патотипа, также проведен филогенетический анализ, по результатам которого установлена принадлежность изолята к субгенотипу VII класса II подсемейства Avulavirinae. С помощью BasicLocal AlignmentSearch Tool выявлено наиболее генетически близкое родство с изолятами из Ирана. Установлено, что среднее время смерти развивающихся куриных эмбрионов при заражении минимальной инфекционной дозой составило 52 ч, что характерно для велогенного патотипа. Вирус вызывал 100%-ю гибель цыплят шестинедельного возраста при оральном заражении, а также 100%-й падеж всего контактного молодняка, включая содержащихся в клетках на отдалении, что доказывает высокий уровень патогенности и контагиозности выделенного изолята и его способность распространяться не только фекально-оральным, но и аэрозольным путем. Гибель мышей при интраназальном заражении высокими дозами не наблюдалась.

1. Rima B., Balkema-Buschmann A., Dundon W. G., Duprex P., Easton A., Fouchier R., et al. ICTV virustaxonomy profile: Paramyxoviridae. J. Gen. Virol. 2019; 100 (12): 1593–1594. DOI: 10.1099/jgv.0.001328.

2. The Negative Sense Single Stranded RNA Viruses. In: Virus Taxonomy. Ed. by C. M. Fauquet, M. A. Mayo, J. Maniloff, U. Desselberger, L. A. Ball. Academic Press; 2005; 607–738. DOI: 10.1016/B978-0-12-249951-7.50014-6.

3. Alexander D. J. Newcastle disease and other avian paramyxoviruses. Rev. Sci. Tech. 2000; 19 (2): 443–462. DOI: 10.20506/rst.19.2.1231.

4. Ganar K., Das M., Sinha S., Kumar S. Newcastle disease virus: current status and our understanding. Virus Res. 2014; 184: 71–81. DOI: 10.1016/j.virusres.2014.02.016.

5. Glickman R. L., Syddall R. J., Iorio R. M., Sheehan J. P., Bratt M. A. Quantitative basic residue requirements in the cleavage-activation site of the fusion glycoprotein as a determinant of virulence for Newcastle disease virus. J. Virol. 1988; 62 (1): 354–356. DOI: 10.1128/JVI.62.1.354-356.1988.

6. Czeglédi A., UjváriD., Somogyi E., Wehmann E., WernerO., Lomniczi B. Third genome size category of avian paramyxovirusserotype 1 (Newcastle disease virus) and evolutionary implications. Virus Res. 2006; 120 (1–2): 36–48. DOI: 10.1016/j.virusres.2005.11.009.

7. Dimitrov K. M., Abolnik C., Afonso C. L., Albina E., BahlJ., Berg M., et al. Updated unified phylogenetic classification system and revised nomenclature for Newcastle disease virus. Infect. Genet. Evol. 2019; 74:103917. DOI: 10.1016/j.meegid.2019.103917.

8. Beard C. W., Hanson R. P. Newcastle disease. In: Diseases of Poultry. Ed. by M. S. Hofstad, H. J. Barnes, B. W. Calnek, W. M. Reid, H. W. Yoder, et al. 8th ed. Ames: Iowa State University Press; 1984; 452–470.

9. Miller P. J., Haddas R., Simanov L., Lublin A., Rehmani S. F., Wajid A., et al. Identification of new sub-genotypes of virulent Newcastle disease virus with potential panzootic features. Infect. Genet. Evol. 2015; 29: 216–229. DOI: 10.1016/j.meegid.2014.10.032.

10. Karamendin K., Kydyrmanov A. Cormorants as a potentially important reservoir and carrier of Newcastle disease virus on the Asian continent. Front. Vet. Sci. 2021; 8:648091. DOI: 10.3389/fvets.2021.648091.

11. Shengqing Y., Kishida N., Ito H., Kida H., Otsuki K., Kawaoka Y., Ito T. Generation of velogenic Newcastle disease viruses from a nonpathogenic waterfowl isolate by passaging in chickens. Virology. 2002; 301 (2): 206–211. DOI: 10.1006/viro.2002.1539.

12. Newcastle disease (infection withNewcastle disease virus). In: WOAH. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 2021; Chapter 3.3.14. Режим доступа: https://www.woah.org/fileadmin/Home/eng/Health_standards/tahm/3.03.14_NEWCASTLE_DIS.pdf.

13. Staden R. The Staden sequence analysis package. Mol. Biotechnol. 1996; 5 (3): 233–241. DOI: 10.1007/BF02900361.

14. Kumar S., Stecher G., Li M., Knyaz C., Tamura K. MEGA X: molecular evolutionary genetics analysis across computing platforms. Mol. Biol. Evol. 2018; 35 (6): 1547–1549. DOI: 10.1093/molbev/msy096.

15. Drummond A. J., Rambaut A., Shapiro B., Pybus O. G. Bayesian coalescent inference of past population dynamicsfrom molecularsequences. Mol. Biol. Evol. 2005; 22 (5): 1185–1192. DOI: 10.1093/molbev/msi103.

16. Tan S. W., Ideris A., Omar A. R., Yusoff K., Hair-Bejo M. Detection and differentiation of velogenic and lentogenic Newcastle disease viruses using SYBR Green I real-time PCR with nucleocapsid gene-specific primers. J. Virol. Methods. 2009; 160 (1–2): 149–156. DOI: 10.1016/j.jviromet.2009.05.006.

17. Eid A. A. M., Hussein A., Hassanin O., Elbakrey R. M., Daines R., Sadeyen J. R., et al. Newcastle disease genotype VII prevalence in poultry and wild birds in Egypt. Viruses. 2022; 14 (10):2244. DOI: 10.3390/v14102244.

18. Xue C., Xu X., Yin R., Qian J., Sun Y., Wang C., et al. Identification and pathotypical analysis of a novel VIk sub-genotype Newcastle disease virus obtained from pigeon in China. Virus Res. 2017; 238: 1–7. DOI: 10.1016/j.virusres.2017.05.011.

19. Perozo F., Marcano R., Afonso C. L. Biological and phylogenetic characterization of a genotype VII Newcastle disease virus from Venezuela: efficacy of field vaccination. J. Clin. Microbiol. 2012; 50 (4): 1204–1208. DOI: 10.1128/JCM.06506-11.

20. Pandarangga P., McAllister M. M., Peaston A. E., Ngai Y. T., Cahyono M. I., Hemmatzadeh F. Performance comparison of homologous and heterologous Newcastle disease virus in vaccines and antibody tests. Res. Vet. Sci. 2022; 149: 82–89. DOI: 10.1016/j.rvsc.2022.06.014.

21. Miller P. J., Decanini E. L., Afonso C. L. Newcastle disease: evolution of genotypes and the related diagnostic challenges. Infect. Genet. Evol. 2010; 10 (1): 26–35. DOI: 10.1016/j.meegid.2009.09.012.

22. Gogoi P., Ganar K., Kumar S. Avian paramyxovirus: a brief review. Transbound. Emerg. Dis. 2017; 64 (1): 53–67. DOI: 10.1111/tbed.12355.

23. Волкова М. А., Чвала Ир. А., Ярославцева П. С., Сосипаторова В. Ю., Чвала И. А. Серологический мониторинг ньюкаслской болезни в России за 2017 г. Ветеринария сегодня. 2018; (4): 26–30. DOI: 10.29326/2304-196X-2018-4-27-26-30.

24. Волкова М. А., Чвала Ир. А., Осипова О. С., Кулагина М. А., Андрейчук Д. Б., Чвала И. А. Серологический мониторинг гриппа птиц и ньюкаслской болезни в Российской Федерации в 2019 году. Ветеринария сегодня. 2020; (2): 76–82. DOI: 10.29326/2304-196X-2020-2-33-76-82.

25. Кулагина М. А., Волкова М. А., Чвала Ир. А., Осипова О. С., Ярославцева П. С., Андрейчук Д. Б., Чвала И. А. Серологический мониторинг гриппа птиц и ньюкаслской болезни на территории Российской Федерации в 2020 г. Ветеринария сегодня. 2022; 11 (2): 142–148. DOI: 10.29326/2304-196X-2022-11-2-142-148.

26. Фролов С. В., Мороз Н. В., Чвала И. А., Ирза В. Н. Эффективность вакцин против ньюкаслской болезни производства ФГБУ «ВНИИЗЖ» в отношении актуальных вирусов VII генотипа. Ветеринария сегодня. 2021; (1): 44–51. DOI: 10.29326/2304-196X-2021-1-36-44-51.

27. Инструкция о мероприятиях по борьбе с ньюкаслской болезнью (псевдочумой) птиц: утв. ГУВ МСХ СССР 09.06.1976 (с изменениями и дополнениями от 28.08.1978). Режим доступа: http://vetorel.ru/website/img/docs/newak.pdf.