Опыт длительного хранения референтного штамма С-141 возбудителя мелиоидоза (Burkholderia pseudomallei)

Мелиоидоз – особо опасное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями Burkholderia pseudomallei, относящимися к II группе патогенности, против которого не разработаны специфические средства профилактики и лечения. Мелиоидозом болеют как люди, так и животные. Ранее заболевание было распространено в районах Юго-Восточной Азии, в настоящее время регистрируется почти на всех континентах земного шара. Потенциальная возможность завоза возбудителя мелиоидоза на территорию Российской Федерации, а также опасность преднамеренного применения его в качестве средства биологического терроризма диктует необходимость содержания данного патогена в коллекциях микроорганизмов для проведения исследований по изучению его основных свойств, разработке и испытанию средств диагностики, индикации и идентификации. Лаборатория коллекции штаммов микроорганизмов ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» осуществляет хранение и поддержание референтного штамма С-141 Burkholderia pseudomallei, полученного из ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора (г. Саратов) в 1983 г., для проведения научно-исследовательских работ, а также в качестве дублирующего штамма в случае утраты его в других коллекциях. Целью работы являлось изучение сохранности биологических свойств штамма С-141 Burkholderia pseudomallei после 11 лет хранения в лиофилизированном виде. Установлено, что при оптимальных условиях хранения (температура от 4 до 8 °С, криопротектор – обезжиренное молоко) штамм сохранял свою жизнеспособность и биологические свойства в течение всего срока наблюдения. Штамм С-141 обладал сахаролитической, оксидазной, каталазной и протеолитической активностью, сероводород не образовывал, что соответствует биохимическим признакам возбудителя мелиоидоза. Проведено освежение штамма путем пассажа через организм золотистых хомячков, выделена культура буркхольдерий, которая была лиофилизирована. Лиофилизированный штамм С-141 Burkholderia pseudomallei был проверен по показателям качества, на него оформлен паспорт, штамм заложен на хранение.

1. Онищенко Г. Г., Кутырев В. В., Топорков А. В., Осин А. В. Современное состояние коллекционной деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных болезней I–II групп патогенности. Проблемы особо опасных инфекций. 2010; 1 (103): 5–10. DOI:10.21055/0370-1069-2010-1(103)-5-10.

2. Дятлов И. А. Коллекции патогенных микроорганизмов – значение и проблемы. Бактериология. 2018; 3 (1): 5–6. eLIBRARY ID: 35598142.

3. Артемьева Е. А., Мельникова Л. А., Родионов А. П. Особенности подготовки и выдачи производственного штамма 5584 Burkholderiamallei в соответствии с требованиями биологической безопасности. Ветеринария сегодня. 2021; 10 (3): 243–247. DOI:10.29326/2304-196X-2021-3-38-243-247.

4. Мельникова Л. А., Иванова С. В., Галиуллин А. К., Макаев Х. Н. Определение жизнеспособности и сохранность биологических свойств штаммов возбудителя сапа при длительном хранении. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. 2018; 234 (2): 137–141. eLIBRARY ID: 35094225.

5. Озерская С. М., Кочкина Г. А., Иванушкина Н. Е., Запрометова К. М., Еремина С. С., Князева Е. В. Состояние коллекций микроорганизмов в России. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова. 2006; 2 (3): 51–61. eLIBRARY ID: 12830842.

6. Молчанова Е. В., Лопастейская Я. А., Незнамова А. В., Кузютина Ю. А., Агеева Н. П., Захарова И. Б. и др. Особенности идентификации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei с помощью микробиологического анализатора Vitek 2 Compact 30. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; 3: 57–61. DOI:10.21055/0370-1069-2016-3-57-61.

7. Захарова И. Б., Топорков А. В., Викторов Д. В. Мелиоидоз и сап: современное состояние проблемы и актуальные вопросы эпидемиологического надзора. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018; 6: 103–109. DOI:10.36233/0372-9311-2018-6-103-109.

8. Онищенко Г. Г., Пальцев М. А., Зверев В. В., Иванов А. А., Киселев В. И., Нетесов С. В. и др. Биологическая безопасность. М.: Медицина; 2006. 304 с.

9. МУ 4.2.2787-10 Лабораторная диагностика мелиоидоза: методические указания. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2011. 32 с. Режим доступа: https://base.garant.ru/70519336.

10. Ряпис Л. А., Илюхин В. И., Сенина Т. В., Шубникова Е. В., Будченко А. А., Куликова А. С. Сравнительная характеристика бурхольдерий группы pseudomallei. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2013; 1: 3–8. eLIBRARY ID: 19052685.

11. Краткий определитель бактерий Берги. Под ред. Дж. Хоулта. М.: Мир; 1980. 495 с.

12. Охапкина В. Ю., Пяткова Н. В., Барамзина Г. В., Фоменков О. О., Федотов А. К. Опыт длительного хранения штаммов возбудителя туляремии. Проблемы особо опасных инфекций. 2018; 4: 69–74. DOI:10.21055/0370-1069-2018-4-69-74.

13. Похиленко В. Д., Баранов А. М., Детушев К. В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденции развития. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. 2009; 4 (12): 99–121. Режим доступа: https://izvuz_mn.pnzgu.ru/files/izvuz_mn.pnzgu.ru/13409.pdf.

14. Ветеринарные препараты: cправочник. Под ред. Д. Ф. Осидзе. М.: Колос; 1981. 448 с.

15. Мельникова Л. А., Иванова С. В., Макаев Х. Н., Букова Н. К. Влияние сред высушивания на устойчивость возбудителя сапа в процессе лиофилизации и дальнейшем хранении. Ветеринарный врач. 2017; 3: 17–20. eLIBRARY ID: 29331324.