Сравнительная характеристика репродукции вирусов рода Leporipoxvirus в перевиваемой культуре клеток

Изучение характера взаимодействия вируса с клеткой имеет как научное, так и практическое значение. Целью настоящих исследований явилась сравни- тельная оценка проявления ряда биологических свойств вирусов миксомы и фибромы Шоупа кроликов при репродукции в клональной перевиваемой линии клеток почки кролика RK-13/2-03. Показано, что развитие инфекции и длительность проявления цитопатического действия в культуре клеток RK-13/2-03 изучаемых вирусов различны. Видимые поражения клеточного монослоя при одинаковой множественности заражения и температуре культивирования для вируса миксомы наблюдали на 2-е сут, для вируса фибромы – на 3-и сут, максимальное поражение клеток с выраженной дегенерацией отмечали на 3-и и 6-е сут культивирования соответственно. Вирус миксомы накапливался в титре 6,25–6,50 lg ТЦД₅₀/0,2 см³, а вирус фибромы Шоупа – в титре 5,50−5,75 lg ТЦД₅₀/0,2 см³. Данную инфекционную активность регистрировали у вируса фибромы Шоупа на протяжении трех, а вируса миксомы – двадцати пассажных уровней. Молекулярно-генетический анализ подтвердил, что полученные культуральные материалы идентифицируются как вирусы миксомы кроликов и фибромы Шоупа. При определении антигенного родства было установлено, что антитела, полученные к вирусу миксомы, способны нейтрализовать и вирус фибромы Шоупа. Титр антител в реакции нейтрализации обоих вирусов был идентичен и составил 1:8. Установлен высокий уровень пермиссивности культуры клеток RK-13/2-03 к вирусу фибромы Шоупа, изолированному от больного кролика и не являющемуся аттенуированным вариантом вируса.

1. Семакина В. П., Жильцова М. В., Саввин А. В., Акимова Т. П. Распространение заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) крупного рогатого скота в мире. Ветеринария сегодня. 2017; 3: 13−23. Режим доступа: https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/314.

2. Yune N., Abdela N. Epidemiology and economic importance of sheep and goat pox: a review on past and current aspects. J. Vet. Sci. Technol. 2017; 8 (2):1000430. DOI: 10.4262/2157-7579.1000430.

3. Family – Poxviridae. In: Virus Taxonomy. Ed. by A. M. Q. King, M. J. Adams, E. B. Carstens, E. J. Lefkowitz. Oxford: Elsevier; 2012; 291−309. DOI: 10.1016/ B978-0-12-384684-6.00028-8.

4. Борисевич С. В., Логинова С. Я., Кротков В. Т., Терентьев А. И. Оспа обезьян. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2015; 1 (10): 59−65. Режим доступа: https://infect-dis-journal.ru/ru/jarticles_infection/218.html?SSr=100134654314ffffffff27c07e50a0b0e0a0b-4930.

5. Борисевич С. В., Маренникова С. С., Стовба Л. Ф., Петров А. А., Кротков В. Т., Махлай А. А. Оспа буйволов. Вопросы вирусологии. 2016; 61 (5): 200−204. DOI: 10.18821/0507-4088-2016-61-5-200-204.

6. Spickler А. R. Sheep pox and Goat pox. August 2017. Режим доступа: https://www.cfsph.iastate.edu/Factsheets/pdfs/sheep_and_goat_pox.pdf.

7. Закутский Н. И., Балышев В. М., Юрков С. Г., Гузалова А. Г., Луницин А. В. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота: характеристика возбудителя болезни, распространение, диагностика и меры борьбы (обзор литературы). Ветеринарный врач. 2016; 4: 3−12. eLIBRARY ID: 26492763.

8. Tripathy D. N., Hanson L. E., Killinger A. H. Studies on differentiation of avian pox viruses. Avian Dis. 1973; 17 (2): 325−333. DOI: 10.2307/1589216.

9. Коломыцев А. А., Бурдинская О. Н. Миксоматоз кроликов. Кролиководство и звероводство. 2005; 6: 24−26. eLIBRARY ID: 20432927.

10. Леонтюк С. В., Дубницкий А. А., Гусев Б. А., Демина М. Ф. Болезни кроликов. М.: Колос; 1974. 239 с.

11. Борисевич С. В., Стовба Л. Ф., Павельев Д. И. Оспа белок (Poxviridae, Chordopoxvirinae, SQPV – Squirrel poxvirus). Вопросы вирусологии. 2018; 63 (2): 53−57. DOI: 10.18821/0507-4088-2018-63-2-53-57.

12. Сюрин В. Н., Самуйленко А. Я., Соловьев Б. В., Фомина Н. В. Вирусные болезни животных. М.: ВНИТИБП; 1998. 928 с.

13. Шевченко А. А., Черных О. Ю., Стрельников В. В., Шевченко Л. В. Биологические особенности и болезни нутрий, кроликов. Краснодар: КубГАУ; 2008. 534 с. Режим доступа: https://kubsau.ru/upload/iblock/779/779734db5ff92deb15d15a987315239f.pdf.

14. Феннер Ф., Мак-Ослен Б., Мимс С., Сэмбрук Дж., Уайт Д. Биология вирусов животных. Т. 1: пер. с англ. М.: Мир; 1977. 447 с. Режим доступа: https://bookree.org/reader?file=474791.

15. Юрков С. Г., Зуев В. В., Сидоров С. И., Кушнир С. Д., Смыслова Н. Ю., Неверовская Н. С. и др. Каталог коллекции клеточных культур ВНИИВВиМ. Покров: ВНИИВВиМ; 2000. 78 с. eLIBRARY ID: 21632428.

16. Puck T. T., Marcus P. I., Cieciura S. J. Clonal growth of mammalian cells in vitro; growth characteristics of colonies from single HeLa cells with and without a feeder layer. J. Exp. Med. 1956; 103 (2): 273−284. DOI: 10.1084/jem.103.2.273.

17. Li Y., Meyer H., Zhao H., Damon I. K. GC content-based pan-pox universal PCR assays for poxvirus detection. J. Clin. Microbiol. 2010; 48 (1): 268−276. DOI: 10.1128/JCM.01697-09.

18. Albini S., Sigrist B., Güttinger R., Schelling C., Hoop R. K., Vögtlin A. Development and validation of a Myxoma virus real-time polymerase chain reaction assay. J. Vet. Diagn. Invest. 2012; 24 (1): 135−137. DOI: 10.1177/1040638711425946.

19. Жданов В. М., Гайдамович С. Я. Частная вирусология. Т. 2. М.: Медицина; 1982. 520 с.

20. Власова Н. Н., Моргунов Ю. П., Цыбанов С. Ж., Колосова М. В., Кадетов В. В., Жестерев В. И. Аттенуированный штамм Микс-89 вируса миксомы кроликов (семейство Poxviridae, род Leporipoxvirus, Myxoma virus of rabbits). Патент № 2192465 Российская Федерация, МПК C12N 7/00. ВНИИВВиМ. № 2001108408/13. Заявл. 30.03.2001. Опубл. 10.11.2002.

21. Балышева В. И., Живодеров С. П., Пивова Е. Ю., Бобровская Н. К., Живодерова А. В., Анисимова Л. И. и др. Пермиссивность культур клеток различного происхождения при культивировании вируса нодулярного дерматита. Сельскохозяйственная биология. 2017; 52 (6): 1265−1272. DOI: 10.15389/agrobiology.2017.6.1265rus.