Использование специализированных добавок Sheff-Vax ACF для культивирования клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура

Предъявляемые в настоящее время к иммунобиологическим препаратам требования чистоты и безопасности могут быть эффективно достигнуты при использовании бессывороточных питательных сред и специализированных добавок неживотного происхождения. В данной работе показана возможность применения добавок Sheff-Vax ACF®, производимых компанией Kerry, Inc. (Ирландия), для культивирования культуры клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура. Было отмечено, что к седьмому пассажу в присутствии добавки Sheff-Vax Plus PF ACF концентрация клеток и кратность прироста были выше на 40–60%, чем при внесении добавок Sheff-Vax PF ACF и Sheff-Vax Plus ACF. Не обнаружено различий в изменении водородного показателя. При репродукции вируса ящура в полученных клетках определили, что в опытных образцах с 1 млн клеток 146+75S компонентов было больше в 2,3–2,4 раза по сравнению с контролем. При культивировании с добавкой Sheff-Vax Plus PF ACF клетки имели нормальную морфологию, множество динамических выростов. В присутствии данной добавки к седьмому пассажу такие показатели, как кратность прироста и концентрация суспензии, в контрольных и опытных образцах выравнивались. Количество иммуногенных компонентов вируса ящура, репродуцированного в клетках с указанной добавкой, было выше на 20–30%, чем в клетках, выросших с применением других добавок. Установлено, что концентрация клеток линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH и кратность прироста в присутствии специализированных добавок была меньше, чем в контрольных образцах с добавлением сыворотки и гидролизата белков крови в питательную среду. При этом выход вируса с 1 млн клеток был выше в культуре, выросшей при внесении добавок Sheff-Vax ACF. Из трех исследованных добавок наиболее приемлемой для культивирования линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура в полученных клетках была Sheff-Vax Plus PF ACF.

1. Фрешни Р. Я. Культура животных клеток: практическое руководство. Пер. Ю. Н. Хомякова, Т. И. Хомяковой. М.: Лаборатория знаний; 2018. 760 с.

2. Шаманская Т. В., Осипова Е. Ю., Пурбуева Б. Б., Устюгов А. Ю., Астрелина Т. А., Яковлева М. В., Румянцев С. А. Культивирование мезенхимальных стволовых клеток ex vivo в различных питательных средах (обзор литературы и собственный опыт). Онкогематология. 2010; 5 (3): 65–71. eLIBRARY ID: 15559360.

3. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии). Под ред. Л. П. Дьяконова; Рос. акад. с.-х. наук. 2-е изд. доп. М.: Спутник+; 2009. 652 с.

4. Трошкова Г. П., Мартынец Л. Д., Кирова Е. В., Сумкина Т. П., Юдин А. В. Бессывороточная питательная среда для культивирования клеток Vero. Фундаментальные исследования. 2005; 5: 94. eLIBRARY ID: 10435525.

5. Лозовой Д. А., Гусева М. Н., Михалишин Д. В., Доронин М. И., Манин Б. Л., Шишкова А. А. и др. ВНК-21/SUSP/ARRIAH – перевиваемая суспензионная сублиния клеток почки новорожденного сирийского хомячка, предназначенная для репродукции вирусов ящура, бешенства, парагриппа-3, болезни Ауески при производстве противовирусных вакцин, а также для изготовления диагностических и профилактических ветеринарных биопрепаратов. Патент 2722671 Российская Федерация, МПК С12N 5/10 (2006.01). ФГБУ «ВНИИЗЖ». № 2019131190. Заявл. 01.10.2019. Опубл. 02.06.2020. Бюл. № 16. Режим доступа: https://patents.s3.yandex.net/RU2722671C1_20200602.pdf.