Оптимизация параметров культивирования вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота штамма «Вологда/2019»

В настоящее время в изучении респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота есть множество спорных вопросов. В связи с этим актуальным является изучение биологических свойств вируса, оптимизация методов его культивирования и подбор наиболее технологичных приемов конструирования средств диагностики и профилактики данного заболевания. Целью настоящей работы являлись выбор чувствительных клеточных систем и оптимизация параметров культивирования в подобранных культурах клеток. В опытах использовали штамм «Вологда/2019» вируса респираторносинцитиальной инфекции крупного рогатого скота, выделенный из биологического материала, полученного от теленка с признаками респираторной патологии. Штамм адаптирован к перевиваемой культуре клеток слизистой носовых перегородок крупного рогатого скота (BT) и депонирован в Государственную коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ». Установлено, что перевиваемые линии клеток трахеи эмбриона крупного рогатого скота (FBT) и почки теленка (RBT) являются наиболее чувствительными клеточными системами для репродукции респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота штамма «Вологда/2019», в данных культурах клеток отмечалось максимальное накопление вируса. Цитопатическая активность вируса в культуре клеток FBT на 4–5 сут культивирования составила от 4,78 ± 0,18 до 5,50 ± 0,16 lg ТЦД₅₀/см³, а в клеточной системе RBT – от 4,00 ± 0,23 до 4,75 ± 0,20 lg ТЦД₅₀/см³. Определено, что при множественности заражения культур клеток FBT и RBT вирусом в 0,1 lg ТЦД₅₀/кл, использовании в составе поддерживающей питательной среды 2% глютамина, а также 2% сыворотки крови лошади либо крупного рогатого скота удается получить вирусный материал с высокой цитопатической активностью.

респираторно-синцитиальный вирус крупного рогатого скота, штамм «Вологда/2019», культивирование, цитопатическая активность, титр вируса

1. Кочиш Т. Ю. Разработка набора реагентов для определения уровня антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе: автореф. дис. … канд. биол. наук. Щелково; 2004. 23 с.

2. Баженов К. С. Распространение вирусов парагриппа-3 и респираторно-синцитиальной инфекции среди телят на откорме в осеннезимний период. Бюллетень ВИЭВ. 1983; 50: 6–8.

3. Гуненков В. В., Халенев Г. А., Сюрин В. Н. Респираторно-синцитиальная вирусная инфекция Животноводство и ветеринария. 1975; 8: 70–76.

4. Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота: рекомендации. Сост.: А. Г. Глотов, Т. И. Глотова, С. В. Котенева, А. В. Нефедченко, К. В. Войтова, О. В. Кунгурцева, И. Я. Строганова. Новосибирск: Сибирское отделение Россельхозакадемии; ГНУ ИЭВСиДВ; 2010. 26 с. eLIBRARY ID: 19518328.

5. Глотов А. Г., Петрова О. Г., Глотова Т. И., Нефедченко А. В., Татарчук А. Т., Кушнир Н. И. и др. Распространение вирусных респираторных болезней крупного рогатого скота. Ветеринария. 2002; 3: 17–21. eLIBRARY ID: 22435011.

6. Сюрин В. Н., Самуйленко А. Я., Соловьев Б. В., Фомина Н. В. Вирусные болезни животных. М.: ВНИТИБП; 1998. 928 с.

7. Строганова И. Я., Войтова К. В. Методы обнаружения и идентификации респираторно-синцитиального вируса крупного ро гатого скота в культуре клеток. Вестник КрасГАУ. 2011; 3: 128–133. eLIBRARY ID: 16445217.

8. Глотов А. Г., Глотова Т. И. Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота. Ветеринария. 2009; 11: 18–23. eLIBRARY ID: 12968708.

9. Журавлева Е. А. Нозоареал респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота. Ветеринария. 2018; 12: 3–8. DOI: 10.30896/0042-4846.2018.21.12.03-08.

10. Кононова С. В., Нестеров А. А., Думова В. В., Манин Б. Л., Кононов А. В., Бабин Ю. Ю., Губенко О. Г. Адаптация вируса болезни Шмалленберга к перевиваемым клеточным культурам. Ветеринария сегодня. 2015; 2 (13): 17–21. eLIBRARY ID: 24345887.

11. Манин Б. Л., Коропова Н. В., Кузнецова Е. Г., Лабзова М. Н., Хлебопашникова С. В. Линия клеток почки теленка Bos taurus RBT (Rene Bos taurus) для репродукции вирусов животных. Патент № 2488631 Российская Федерация, МПК C12N 5/07 (2010.01), A61K 39/12 (2006.01). ФГБУ «ВНИИЗЖ». № 2012126700/10. Заявл. 26.06.2012. Опубл. 27.07.2013. Бюл. № 21. Режим доступа: https://patents.s3.yandex.net/RU2488631C1_20130727.pdf.

12. Murray G. M., More S. J., Sammin D., Casey M. J., McElroy M. C., O’Neill R. G., et al. Pathogens, patterns of pneumonia, and epidemiologic risk factors associated with respiratory disease in recently weaned cattle in Ireland. J. Vet. Diagn. Invest. 2017; 29 (1): 20–34. DOI: 10.1177/1040638716674757.

13. Valarcher J.-F., Taylor G. Bovine respiratory syncytial virus infection. Vet. Res. 2007; 38 (2): 153–180. DOI: 10.1051/vetres:2006053.

14. Пономарев А. П., Манин Б. Л., Коган М. М. Культивирование клеточных линий человека и животных с использованием сыворотки крови, очищенной лантаноидами. Ветеринарная патология. 2019; 4: 61–70. eLIBRARY ID: 41560805.