СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ 146S КОМПОНЕНТА ВИРУСА ЯЩУРА В СЫРЬЕ ДЛЯ ВАКЦИНЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ И ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ


https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-2-25-26-30

Полный текст:


Аннотация

Разработан способ определения концентрации 146S компонента вируса ящура в сырье для вакцины с применением метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Предложена отрицательная регрессионная модель вида С146S = (30,269 – Ct)/4,155, позволяющая определять значение концентрации 146S частиц вируса ящура на основании установленной величины порогового цикла амплификации (Ct). Экспериментально доказано, что количество 146S компонента, определенного методом ОТ-ПЦР-РВ с использованием разработанной регрессионной модели и заложенного в прививную дозу противоящурной вакцины, позволяет защитить вакцинированных животных от генерализованной формы ящура типов А, О, Азия-1. Метод ОТ-ПЦР-РВ является высокочувствительным, позволяет быстро и с высокой степенью достоверности оценивать концентрацию 146S антигена в противоящурной вакцине. Способ определения количества 146S частиц методом ОТ-ПЦР-РВ с использованием регрессионной модели является надежным и характеризуется высокой корреляцией (95,5–99,0%) с результатами реакции связывания комплемента.


Об авторах

М. И. Доронин
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Научный сотрудник, кандидат биологических наук.

Владимир


А. М. Тимина
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Ведущий научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук.

Владимир


Д. А. Лозовой
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Директор, кандидат ветеринарных наук.

Владимир


В. А. Стариков
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Ведущий научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук.

Владимир


Д. В. Михалишин
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Заведующий лабораторией, кандидат ветеринарных наук.

Владимир


Н. Н. Медведева
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Биолог.

Владимир


А. В. Борисов
ФГБУ ВНИИЗЖ
Россия

Ведущий научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук.

Владимир


Список литературы

1. Бондаренко А. Ф. Качественный и количественный иммунохимический анализ вирусных белков. – Суздаль, 1994. – 92 с.

2. Методические указания по постановке реакции нейтрализации для определения иммунного статуса животных при ящуре: утв. МСХ СССР 26.12.1983.

3. Пономарев А. П., Узюмов В. Л., Груздев К. Н. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства. – Владимир: Фолиант, 2006. – 250 с.

4. Применение ОТ-ПЦР-РВ для определения концентрации 146S компонента вируса ящура типов О/Саудовская Аравия и Asia-1/Shamir в полуфабрикате вакцины / Д. А. Лозовой, А. А. Шишкова, Д. В. Михалишин [и др.] // Ветеринария. – 2017. – № 6. – С. 57–61.

5. Статистические методы анализа в клинической практике / П. О. Румянцев, В. А. Саенко, У. В. Румянцева, С. Ю. Чекин. – Обнинск: ГУ РМНЦ РАМН. – 46 с. – URL: http://www.kantiana.ru/medicinal/help/StatMethodsInClinics.pdf.

6. Annual OIE/FAO FMD Reference Laboratory Network Report. – Pirbright, 2007. – URL: http://www.wrlfmd.org/ref_labs/fmd_ref_lab_reports.htm.

7. Enhanced laboratory diagnosis of foot and mouth disease by real-time polymerase chain reaction / A. E. Shaw, S. M. Reid, D. P. King [et al.] // Rev. Sci. Tech. OIE. – 2004. – Vol. 23, No. 3. – P. 1003–1009.

8. Сartwright B., Chapman W. G., Brown F. Serological and immunological relationships between the 146S and 12S particles of foot-and-mouth disease virus // J. Gen. Virol. – 1980. – Vol. 50, No. 2. – P. 369–375.

9. Implementation of a one-step real-time RT-PCR protocol for diagnosis of foot-and-mouth disease / A. E. Shaw, S. M. Reid, K. Ebert [et al.] // J. Virol. Methods. – 2007. – Vol. 143, No. 1. – P. 81– 85. – URL: https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.02.009.

10. Lubroth J., Rodriguez L., Dekker A. Vesicular diseases // Diseases of Swine / ed. B. E. Straw, J. J. Zimmerman, S. D’Allaire, D. J. Taylor. – 9th ed. – Ames, Iowa, 2006. – P. 517–536.

11. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals / OIE. – 7th еd. – Paris, France, 2012. – Vol. 1, Chap. 2.1.5. – P. 166–169.

12. The pathogenesis and diagnosis of foot-and-mouth disease / S. Alexandersen, Z. Zhang, A. I. Donaldson, A. J. M. Garland // J. Comp. Pathol. – 2003. – Vol. 129, No. 1 – P. 1–36.

13. Wernike K., Beer M., Hoffmann B. Rapid detection of footand-mouth disease virus, influenza A virus and classical swine fever virus by high-speed real-time RT-PCR // J. Virol. Methods. – 2013. – Vol. 193, No. 1. – Р. 50–54. – DOI: 10.1016/j.jviromet.2013.05.005.


Дополнительные файлы

Для цитирования: Доронин М.И., Тимина А.М., Лозовой Д.А., Стариков В.А., Михалишин Д.В., Медведева Н.Н., Борисов А.В. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ 146S КОМПОНЕНТА ВИРУСА ЯЩУРА В СЫРЬЕ ДЛЯ ВАКЦИНЫ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИИ И ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ. Ветеринария сегодня. 2018;(2):26-30. https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-2-25-26-30

For citation: Doronin M.I., Timina A.M., Lozovoy D.A., Starikov V.A., Mikhalishin D.V., Medvedeva N.N., Borisov A.V. METHOD FOR FMD VIRUS 146S COMPONENT CONCENTRATION DETERMINATION WITH REAL-TIME REVERSE TRANSCRIPTION – POLYMERASE CHAIN REACTION IN VACCINE RAW MATERIALS. Veterinary Science Today. 2018;(2):26-30. (In Russ.) https://doi.org/10.29326/2304-196X-2018-2-25-26-30

Просмотров: 133

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2304-196X (Print)
ISSN 2658-6959 (Online)