ИССЛЕДОВАНИЕ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА ЛИНИИ ВНК-21 /2-17 МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ

Представлены результаты исследования клеточного цикла линии ВНК-21/2-17 методом проточной цитометрии. Данная клеточная линия получила широкое применение в биологической промышленности, поэтому изучение закономерности клеточного цикла суспензии клеток ВНК-21/2-17 при помощи предложенного метода и определение средств и методов профилактики морфологических и структурных изменений клеток в культуре под воздействием неблагоприятных факторов представляет большой интерес. Проточная цитометрия позволяет определять количественные параметры фаз клеточного цикла и проводить корреляцию между этими фазами и жизнеспособностью производственной популяции клеток. Отмечено, что общая тенденция суспензионного культивирования данной клеточной линии в течение 48 ч имела стандартную динамику, при этом на всех этапах клеточного цикла преобладала фаза начального роста - G₁ При неблагоприятных условиях культивирования апоптоз и дебрис могли возрастать до 31-59%, т. е. часть популяции клеток могла быть потенциально нерепродуктивной. Выявлены неблагоприятные этапы культивирования, связанные с низким содержанием водородного показателя в культиваторе, где рН не поддерживали на постоянном определенном уровне. При оптимизации физико-химических параметров культивирования клеток интенсивность пролиферации увеличивалась. Выход жизнеспособных клеток в культиваторе, где поддерживался определенный уровень рН, был выше, и на синтетической стадии G₂ + M не происходило задержки циклов.

проточная цитометрия, апоптоз, фазы клеточного цикла, flow cytometry, apoptosis, cell cycle phases

1. Войткова В. В. Изучение апоптоза методом проточной цитофлуориметрии (обзор литературы) // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2010. - № 6 (76), ч. 1. - С. 220-225.

2. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии) / под ред. Л. П. Дьяконова. - М.: Спутник+, 2009. - 656 с.

3. Клетки / под ред. Б. Льюина [и др.]. - М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2011. - 951 с.

4. Колышкин В. М., Ночевный В. Т., Новохатский А. С. Апоптоз клеток в культуре: особенности проявления и влияние на эффективность биотехнологического производства (обзор) // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2005. - № 6. - С. 99-105.

5. Манин Б. Л., Худяков Г. А., Бурдов А. Н. Оценка функционального состояния клеток по их морфологии при криоконсервировании с помощью различных методов // Актуальные проблемы ветеринарной вирусологии: тез. докладов науч. конф. ВНИЯИ. - Владимир, 1988. - С. 5-6.

6. Основные этапы разработки и применения метода проточной цитометрии в ФГУ РНЦРХТ / А. С. Ягунов, А. В. Карташев, С. В. Токалов, Л. Н. Киселева // Вопросы онкологии. - 2008. -Т. 54, № 4. - С. 494-497.

7. Эффективность метода проточной цитометрии в изучении механизмов репарации клеток ВНК-21 в процессе культивирования и криоконсервирования / Б. Л. Манин, В. Т. Ночевный, С. В. Хайдуков, В. Н. Ласкавый // Ветеринарна медицина: міжвід. тем. наук. зб. - Харків, 2011. - Вип. 95. - С. 66-70.