veterinaryВетеринария сегодняVeterinary Science Today2304-196X2658-6959"Veinard"10.29326/2304-196X-2023-12-3-222-227veterinary-742Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ | ВЕТЕРИНАРНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯORIGINAL ARTICLES | VETERINARY MICROBIOLOGYЗначение РСК и ПЦР в диагностике экспериментальной инфекции кроликов, вызванной Chlamydia psittaciRole of CFT and PCR in diagnosis of Chlamydia psittaci in experimentally infected rabbitshttps://orcid.org/0000-0001-9882-3475ЕвстифеевВ. В.EvstifeevV. V.

Евстифеев Виталий Валерьевич, доктор биологических наук, доцент, главный научный сотрудник лаборатории вирусных антропозоонозов животных 

г. Казань, Республика Татарстан

Vitaliy V.  Evstifeev, Doctor of Science (Biology), Associate Professor, Chief Researcher, Laboratory for Viral Anthropozoonoses of Animals

Kazan, Republic of Tatarstan

evstifeev@vnivi.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3101-7740ХусаиновФ. М.KhusainovF. M.

Хусаинов Фидаиль Миннигалеевич, доктор ветеринарных наук, доцент, ведущий научный сотрудник лаборатории вирусных антропозоонозов животных

Fidail M. Khusainov, Doctor of Science (Veterinary Medicine), Associate Professor, Leading Researcher, Laboratory for Viral Anthropozoonoses of Animals

Kazan, Republic of Tatarstan

fidail63@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4944-6559ЯковлевС. И.YakovlevS. I.

Яковлев Сергей Игоревич, кандидат ветеринарных наук, младший научный сотрудник лаборатории вирусных антропозоонозов животных

Sergey I. Yakovlev, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Junior Researcher, Laboratory for  Viral Anthropozoonoses of Animals

Kazan, Republic of Tatarstan

arena176@rambler.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3689-1442ШангараевР. И.ShangaraevR. I.

Шангараев Рафкат Искандарович, кандидат ветеринарных наук, младший научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетического анализа

Rafkat I. Shangaraev, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Junior Researcher, Laboratory for Molecular and Genetic Analysis

Kazan, Republic of Tatarstan

rafkat.shangaraev@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9539-3756ЕремецВ. И.EremetsV. I.

Еремец Владимир Иванович, доктор биологических наук, профессор, руководитель научного направления, главный научный сотрудник

пос. Биокомбината, Московская обл.

Vladimir I. Eremets, Doctor of Science (Biology), Professor, Head of Scientific Direction, Chief Researche

pos. Biokombinata, Moscow Oblast

vieremec2@yandex.ruФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»); ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана» (ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ)РоссияFSBSI “Federal Center for Toxicological, Radiation, and Biological Safety” (FSBSI “FCTRBS-ARRVI”); FSBEI HE “Kazan State Academy of Veterinary Medicine by N. E. Bauman” (FSBEI HE Kazan SAVM)Russian FederationФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»)РоссияFSBSI “Federal Center for Toxicological, Radiation, and Biological Safety” (FSBSI “FCTRBS-ARRVI”)Russian FederationФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»)РоссияFSBI “All-Russian Research and Technological Institute of Biological Industry” (VNITIBP)Russian FederationФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» (ФГБНУ ВНИТИБП)Russian Federation202320092023123222227Copyright © Евстифеев В.В., Хусаинов Ф.М., Яковлев С.И., Шангараев Р.И., Еремец В.И., 20232023Евстифеев В.В., Хусаинов Ф.М., Яковлев С.И., Шангараев Р.И., Еремец В.И.Evstifeev V.V., Khusainov F.M., Yakovlev S.I., Shangaraev R.I., Eremets V.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/742

Проведена индикация специфических хламидийных антител в реакции связывания комплемента и генома хламидий методом полимеразной цепной реакции у сукрольных крольчих при экспериментальной инфекции, вызванной Chlamydiapsittaci. Развитие инфекционного процесса у зараженных кроликов сопровождалось повышением температуры тела и появлением респираторных симптомов и было подтверждено наличием в их крови специфических хламидийных антител и патологическими родами. При исследовании парных сывороток крови кроликов в реакции связывания комплемента выявили нарастание титров специфических хламидийных антител, которые на седьмые сутки после заражения варьировались в пределах 1:7,5; на четырнадцатые сутки средняя их концентрация была равна 1:40, и к тридцатым суткам средний титр увеличился до 1:60. Однако подтвердить хламидийную этиологию неблагополучных исходов окрола экспериментально зараженных кроликов при исследовании проб патологических материалов, полученных из урогенитального тракта исследуемых животных, методом полимеразной цепной реакции и микроскопией мазков-отпечатков не удалось. При этом молекулярно-генетические исследования проб внутренних органов (печень) мертворожденных крольчат позволили выявить геном хламидий, в результате чего была подтверждена хламидийная этиология патологического исхода окрола кроликов. Следовательно, при прижизненной постановке диагноза на хламидиоз такой ретроспективный метод, как реакция связывания комплемента с хламидийным антигеном, имеет диагностическую ценность. 

Specific antibodies against сhlamydia weredetectedusingcomplement fixation test and сhlamydiagenome wasdetectedusingpolymerase chain reaction in pregnant rabbits experimentally infected with Chlamydiapsittaci. The infectedrabbitsdevelopeda fever andrespiratory signs andthe infection was confirmed by specificantibodiesagainst сhlamydiadetectedin theirbloodandbyabnormalities in rabbitkindling. Complement fixation testofpairedrabbit serarevealed an increasein thetitersof specificantibodiesagainst сhlamydia, which on Day 7 post infection varied within 1:7.5; on Day 14, mean concentration was 1:40 and by Day 30 mean titer increasedto 1:60. However, when pathological materials from theurogenital tractof theexperimentalanimals weretestedin polymerase chain reaction andin smear microscopy, it was impossibletoconfirm that thereisan etiological linkbetween сhlamydiaandkindlingproblems in experimental animals. At thesametime, molecularandgenetictestsof internalorgans (liver) sampledfromstillborn babyrabbitsrevealedthe сhlamydiagenome, thus, proving сhlamydia involvement into thepathological kindling. Therefore, such a retrospective methodas complement fixation test with a сhlamydia antigen is of high diagnosticvaluefor lifetime сhlamydiadiagnosis.

хламидиозChlamydia psittaciполимеразная цепная реакциякроликисерологические исследованияchlamydiosisChlamydia psittacipolymerase chain reactionrabbitsserological testsReferencesБоровкова Л. В., Челнокова Е. В. Современные методы диагностики и лечения инфекций, передающихся половым путем. Медицинский альманах. 2010; 2 (11): 150–156. EDN: MBFQOB.Borovkova L. V., Chelnokova Е. V. The contemporary methods of diagnostics and treating of the sexually transmitted diseases. Medical almanac. 2010; 2 (11): 150–156. EDN: MBFQOB. (in Russ.)Герасимова В. М., Марченко В. С., Парфентьева Т. М., Истомина Д. Н. Сравнительная характеристика лабораторных методов диагностики хламидиоза. Вестник Челябинского государственного университета. Образование и здравоохранение. 2021; 4 (16): 47–52. DOI: 10.24411/2409-4102-2021-10407.Gerasimova V. М., Marchenko V. S., Parfentieva Т. М., Istomina D. N. Comparative characteristics of laboratory methods for the diagnosis of chlamydia. Bulletin of Chelyabinsk State University. Education and Healthcare. 2021; 4 (16): 47–52. DOI: 10.24411/2409-4102-2021-10407. (in Russ.)Руководство по лабораторной диагностике инфекций урогенитального тракта. Под ред. М. Домейки, А. М. Савичевой, Е. В. Соколовского, Р. Балларда, М. Унемо. СПб.: Н-Л; 2012. 288 с.Guidance on laboratory diagnosis of urogenital infections. Ed. by М. Domeika, А. М. Savicheva, Е. V. Sokolovskiy, R. Ballard, М. Unemo. Saint Petersburg: N-L; 2012. 288 p. (in Russ.)Ульянова О. В., Салтыков Ю. В., Зайцев С. С., Хижнякова М. А., Филонова Н. Н., Субботина И. А. и др. Лабораторная диагностика хламидиоза. Методические рекомендации. СарНИВИ; ФГБНУ ФИЦВиМ; 2019. 29 с.UlyanovaO. V., SaltykovY. V., Zaytsev S. S., Khizhnyakova M. A., Filonova N. N., Subbotina I. A., et al. Laboratory diagnosis of Chlamydia. Guidance. SarRVI; FRCVM; 2019. 29 p. (in Russ.)Harding-Esch E. M., Cousins E. C., Chow S. C., Phillips L. T., Hall C. L., Cooper N., et al. A 30-min nucleic acid amplification point-of-care test for genital Chlamydia trachomatis infection in women: a prospective, multi-centerstudy of diagnostic accuracy. EBioMedicine. 2018; 28: 120–127. DOI: 10.1016/j.ebiom.2017.12.029.Harding-Esch E. M., Cousins E. C., Chow S. C., Phillips L. T., Hall C. L., Cooper N., et al. A 30-min nucleic acid amplification point-of-care test for genital Chlamydia trachomatis infection in women: a prospective, multi-centerstudy of diagnostic accuracy. EBioMedicine. 2018; 28: 120–127. DOI: 10.1016/j.ebiom.2017.12.029.Widdice L. E., Hsieh Y. H., Silver B., Barnes M., Barnes P., Gaydos C. A. Performance of the Atlas genetics rapid test for Chlamydia trachomatis and women’s attitudestoward point-of-care testing. Sex. Transm. Dis. 2018; 45 (11): 723–727. DOI: 10.1097/OLQ.0000000000000865.Widdice L. E., Hsieh Y. H., Silver B., Barnes M., Barnes P., Gaydos C. A. Performance of the Atlas genetics rapid test for Chlamydia trachomatis and women’s attitudestoward point-of-care testing. Sex. Transm. Dis. 2018; 45 (11): 723–727. DOI: 10.1097/OLQ.0000000000000865.Федорова В. А., Ляпина А. М., Хижнякова М. А., Зайцев С. С., Салтыков Ю. В., Субботина И. А. и др. Хламидиозы животных и человека. М.: Наука; 2019. 135 с. DOI: 10.7868/9785020402492.Feodorova V. A., Lyapina А. М., Khizhnyakova М. А., Zaitsev S. S., Saltykov Y. V., Subbotina I. А., et al. Chlamydia of animals and humans. Moscow: Nauka; 2019. 135 p. (in Russ.)Feodorova V. A., Zaitsev S. S., Khizhnyakova M. A., Saltykov Y. V., Evstifeev V. V., Khusainov F. M., et al. Data of de novo genome assembly of the Chlamydia psittacistrain isolated from the livestock inVolga Region, Russian Federation. Data Brief. 2020; 29:105190. DOI: 10.1016/j.dib.2020.105190.Feodorova V. A., Zaitsev S. S., Khizhnyakova M. A., Saltykov Y. V., Evstifeev V. V., Khusainov F. M., et al. Data of de novo genome assembly of the Chlamydia psittacistrain isolated from the livestock inVolga Region, Russian Federation. Data Brief. 2020; 29:105190. DOI: 10.1016/j.dib.2020.105190.Шилова Е. Н., Шкуратова И. А., Ряпосова М. В., Вялых И. В., Козлова Н. А. Эффективность специфических методов диагностики хламидиоза крупного рогатого скота. Ветеринария. 2014; 4: 21–24. EDN: RZUAYX.Shilova Е. N., Shkuratova I. A., Riaposova M. V., Vyalyh I. V., KozlovaN. A. Effectiveness specific methods of diagnostic chlamydiosis in cattle. Veterinariya. 2014; 4: 21–24. EDN: RZUAYX. (in Russ.)Stothard D. R., Boguslawski G., Jones R. B. Phylogenetic analysis of the Chlamydia trachomatis major outer membrane protein and examination of potential pathogenic determinants. Infect. Immun. 1998; 66 (8): 3618–3625. DOI: 10.1128/IAI.66.8.3618-3625.1998.Stothard D. R., Boguslawski G., Jones R. B. Phylogenetic analysis of the Chlamydia trachomatis major outer membrane protein and examination of potential pathogenic determinants. Infect. Immun. 1998; 66 (8): 3618–3625. DOI: 10.1128/IAI.66.8.3618-3625.1998.Ripa T., Nilsson P. A variant of Chlamydia trachomatis with deletion in cryptic plasmid: implicationsfor use of PCR diagnostic tests. Euro Surveill. 2006; 11 (11):E061109.2. DOI: 10.2807/esw.11.45.03076-en.Ripa T., Nilsson P. A variant of Chlamydia trachomatis with deletion in cryptic plasmid: implicationsfor use of PCR diagnostic tests. Euro Surveill. 2006; 11 (11):E061109.2. DOI: 10.2807/esw.11.45.03076-en.Федорова В. А., Полянина Т. И., Салтыков Ю. В., Зайцев С. С., Ласкавый В. Н., Ульянова О. В., Мотин В. Л. Обнаружение Chlamydia trachomatis у абортировавших овец. Ветеринария. 2016; 1: 22–26. EDN: VMFVEV.Feodorova V. A., Polyanina T. I., Saltykov Yu. V., Zaytsev S. S., Laskavy V. N., Ulianova O. V., Motin V. L. Detection of Сhlamydia trachomatis in aborted ewes. Veterinariya. 2016; 1: 22–26. EDN: VMFVEV. (in Russ.)Федорова В. А., Салтыков Ю. В., Филонова Н. Н., Субботина И. А., Зайцев С. С., Ульянова О. В. и др. Детекция нового шведского варианта Chlamydia trachomatis у крупного рогатого скота. Ветеринария. 2019; 7: 27–31. DOI: 10.30896/0042-4846.2019.22.7.27-31.Feodorova V. A., Saltykov Y. V., Filonova N. N., Subbotina I. A., Zaitsev S. S., UlianovaO. V., et al. Detection ofthe novel Swedish variant of Chlamydiatrachomatisin cattle. Veterinariya. 2019; 7: 27–31. DOI: 10.30896/0042- 4846.2019.22.7.27-31. (in Russ.)Ripa T., Nilsson P. A. A Chlamydia trachomatis strain with a 377-bp deletion in the cryptic plasmid causing false-negative nucleic acid amplification tests. Sex. Transm. Dis. 2007; 34 (5): 255–256. DOI: 10.1097/OLQ.0b013e31805ce2b9.Ripa T., Nilsson P. A. A Chlamydia trachomatis strain with a 377-bp deletion in the cryptic plasmid causing false-negative nucleic acid amplification tests. Sex. Transm. Dis. 2007; 34 (5): 255–256. DOI: 10.1097/OLQ. 0b013e31805ce2b9.Евстифеев В. В., Хусаинов Ф. М., Барбарова Л. А., Равилов А. З. Усовершенствование комплементсвязывающего антигена для диагностики хламидиоза животных. Материалы Всероссийской научно-практической конференции по актуальным проблемам агропромышленного комплекса (29–30 октября 2004 г.). Казань: Казанская ГАВМ; 2004; 33–34. EDN: MYSJIL.Evstifeev V. V., Khusainov F. М., Barbarova L. А., Ravilov А. Z. Usovershenstvovanie komplementsvyazyvayushchego antigena dlya diagnostiki khlamidioza zhivotnykh = Improvement of complement-binding antigen forthe diagnosis of animal Chlamydia. Materialy Vserossiiskoi nauchno-prakticheskoi konferentsii po aktual’nym problemam agropromyshlennogo kompleksa (29–30 oktyabrya 2004 g.) = Proceedings of All-Russian Scientific and Practical Conference on topical problems of the agro-industrial complex (October 29–30, 2004). Kazan: Kazan SAVM; 2004; 33–34. EDN: MYSJIL. (in Russ.)Unemo M., Olcén P., Agné-Stadling I., Feldt A., Jurstrand M., Herrmann B., et al. Experiences with the new genetic variant of Chlamydia trachomatis in Örebro county, Sweden – proportion, characteristics and effective diagnostic solution in an emergent situation. Euro Surveill. 2007; 12 (4):E5-6. DOI: 10.2807/esm.12.04.00699-en.Unemo M., Olcén P., Agné-Stadling I., Feldt A., Jurstrand M., Herrmann B., et al. Experiences with the new genetic variant of Chlamydia trachomatis in Örebro county, Sweden – proportion, characteristics and effective diagnostic solution in an emergent situation. Euro Surveill. 2007; 12 (4):E5-6. DOI: 10.2807/esm.12.04.00699-en.Herrmann B., Törner A., Low N., Klint M., Nilsson A., Velicko I., et al. Emergence and spread of Chlamydia trachomatis variant, Sweden. Emerg. Infect. Dis. 2008; 14 (9): 1462–1465. DOI: 10.3201/eid1409.080153.Herrmann B., Törner A., Low N., Klint M., Nilsson A., Velicko I., et al. Emergence and spread of Chlamydia trachomatis variant, Sweden. Emerg. Infect. Dis. 2008; 14 (9): 1462–1465. DOI: 10.3201/eid1409.080153.Feodorova V. A., Polyanina T. I., Konnova S. S., Laskavy V. N. First case of detection of Chlamydia trachomatisin livestock in Russia. In: Proceeding of 5th Congress of EuropeanMicrobiologists (21–25 July 2013, Germany). Leipzig: FEMS; 2013; 237.Feodorova V. A., Polyanina T. I., Konnova S. S., Laskavy V. N. First case of detection of Chlamydia trachomatisin livestock in Russia. In: Proceeding of 5th Congress of EuropeanMicrobiologists (21–25 July 2013, Germany). Leipzig: FEMS; 2013; 237.Feodorova V. A., Zaitsev S. S., Saltykov Y. V., Sultanakhmedov E. S., Bakulev A. L., Ulyanov S. S., Motin V. L. An asymptomatic patient with fatal infertility carried a Swedish strain of Chlamydia trachomatis with additional deletion in the plasmid orf1 that belonged to a different MLST sequence type. Microorganisms. 2019; 7 (7):187. DOI: 10.3390/microorganisms7070187.Feodorova V. A., Zaitsev S. S., Saltykov Y. V., Sultanakhmedov E. S., Bakulev A. L., Ulyanov S. S., Motin V. L. An asymptomatic patient with fatal infertility carried a Swedish strain of Chlamydia trachomatis with additional deletion in the plasmid orf1 that belonged to a different MLST sequence type. Microorganisms. 2019; 7 (7):187. DOI: 10.3390/microorganisms7070187.Евстифеев В. В., Хусаинов Ф. М., Яковлев С. И., Хусаинова Г. И., Иванова С. В. Результаты клинических испытаний универсальной вакцины против хламидиоза сельскохозяйственных животных. Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов: материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию Армавирской биофабрики (20–21 августа 2021 г.). М.: 2021; 244–251. DOI: 10.47804/978-5-89904-0290_2021_244.Evstifeev V. V., Khusainov F. M., Yakovlev S. I., Khusainova G. I., Ivanova S. V. Results of clinical trials of a universal vaccine against Chlamydia in farm animals. Nauchnye osnovy proizvodstva i obespecheniya kachestva biologicheskikh preparatov: materialy Mezhdunarodnoi nauchno-prakticheskoi konferentsii, posvyashchennoi 100-letiyu Armavirskoi biofabriki (20–21 avgusta 2021 g.) = Scientific basisfor production and quality assurance of biological preparations: proceedings of the international research-to-practice conference dedicated to the 100th anniversary of the Armavir Biofactory (20–21 August 2021). Мoscow: 2021; 244–251. DOI: 10.47804/978-5-89904-0290_2021_244. (in Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.