veterinaryВетеринария сегодняVeterinary Science Today2304-196X2658-6959"Veinard"10.29326/2304-196X-2022-11-3-268-272veterinary-661Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ | ВЕТЕРИНАРНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯORIGINAL ARTICLES | VETERINARY MICROBIOLOGYОпыт длительного хранения референтного штамма С-141 возбудителя мелиоидоза (Burkholderia pseudomallei)Long-term storage of C-141 reference strain of melioidosis agent (Burkholderia pseudomallei)https://orcid.org/0000-0002-6204-6077АртемьеваЕ. А.ArtemevaE. A.

Артемьева Елена Александровна, кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией коллекции штаммов микроорганизмов

г. Казань

Elena A. Artemeva, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Head of Laboratory for Collection of Strains of Microorganisms

Kazan

artemevaelena21@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0159-3843МельниковаЛ. А.MelnikovaL. A.

Мельникова Лилия Арсентьевна, кандидат ветеринарных наук, доцент, ведущий научный сотрудник лаборатории коллекции штаммов микроорганизмов

г. Казань

Lilia A. Melnikova, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Associate Professor, Leading Researcher, Laboratory for Collection of Strains of Microorganisms

Kazan

vnivi@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0853-5678РодионовА. П.RodionovA. P.

Родионов Александр Павлович, младший научный сотрудник лаборатории коллекции штаммов микроорганизмов

420075, Республика Татарстан, г. Казань, Научный городок-2

Alexander P. Rodionov, Junior Researcher, Laboratory for Collection of Strains of Microorganisms

420075, Republic of Tatarstan, Kazan, Nauchny Gorodok-2

alexandrvetspets@gmail.comФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»)РоссияFederal State Budgetary Scientific Institution “Federal Center for Toxicological, Radiation, and Biological Safety” (FSBSI “FCTRBS-ARRVI”)Russian Federation202219092022113268272Copyright © Артемьева Е.А., Мельникова Л.А., Родионов А.П., 20222022Артемьева Е.А., Мельникова Л.А., Родионов А.П.Artemeva E.A., Melnikova L.A., Rodionov A.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/661

Мелиоидоз – особо опасное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями Burkholderia pseudomallei, относящимися к II группе патогенности, против которого не разработаны специфические средства профилактики и лечения. Мелиоидозом болеют как люди, так и животные. Ранее заболевание было распространено в районах Юго-Восточной Азии, в настоящее время регистрируется почти на всех континентах земного шара. Потенциальная возможность завоза возбудителя мелиоидоза на территорию Российской Федерации, а также опасность преднамеренного применения его в качестве средства биологического терроризма диктует необходимость содержания данного патогена в коллекциях микроорганизмов для проведения исследований по изучению его основных свойств, разработке и испытанию средств диагностики, индикации и идентификации. Лаборатория коллекции штаммов микроорганизмов ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» осуществляет хранение и поддержание референтного штамма С-141 Burkholderia pseudomallei, полученного из ФКУН Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора (г. Саратов) в 1983 г., для проведения научно-исследовательских работ, а также в качестве дублирующего штамма в случае утраты его в других коллекциях. Целью работы являлось изучение сохранности биологических свойств штамма С-141 Burkholderia pseudomallei после 11 лет хранения в лиофилизированном виде. Установлено, что при оптимальных условиях хранения (температура от 4 до 8 °С, криопротектор – обезжиренное молоко) штамм сохранял свою жизнеспособность и биологические свойства в течение всего срока наблюдения. Штамм С-141 обладал сахаролитической, оксидазной, каталазной и протеолитической активностью, сероводород не образовывал, что соответствует биохимическим признакам возбудителя мелиоидоза. Проведено освежение штамма путем пассажа через организм золотистых хомячков, выделена культура буркхольдерий, которая была лиофилизирована. Лиофилизированный штамм С-141 Burkholderia pseudomallei был проверен по показателям качества, на него оформлен паспорт, штамм заложен на хранение.

Melioidosis is a highly dangerous infectious disease caused by Hazard Group II bacteria Burkholderia pseudomallei, against which specific prevention and treatment tools have not been developed yet. Both humans and animals suffer from the disease. Previously the disease was prevalent in Southeast Asia regions, but currently is reported almost in all continents of the globe. Potential possibility of the agent introduction to the Russian Federation as well as the risk of malevolent use of this agent as a tool of bioterrorism dictates the need for storage of this pathogen in the microorganism collections to study its properties, develop and test diagnostic, detection and identification means. Microorganism Collection Laboratory of the FSBSI “FCTRBS-ARRVI” is responsible for storage and preservation of Burkholderia pseudomallei С-141 reference strain, submitted by Federal State Scientific Institution “Russian Research Anti-Plague Institute “Microbe” under the Rospotrebnadzor (Saratov city) for research purposes in 1983 and as a back-upstrain in case of its loss by other collections. The purpose of the work was to study the preservation of biological properties of freeze-dried Burkholderia pseudomallei С-141 strain after 11 years of storage. It was established that under optimal storage conditions (temperature of 4–8 °С, skimmed milk as a cryoprotectant) the strain remained viable and retained its biological properties during the wholeo bservation period. С-141 strain showed saccharolytic, oxidase, catalase and proteolytic activities, did not generate hydrogen sulphide, which is consistent with the melioidosis agent biochemical features. The strain was refreshed by passaging in golden hamsters and Burkholderia culture was isolated and freeze-dried. Burkholderia pseudomallei С-141 freeze-driedstrain was tested for quality parameters, records were made and the strain was deposited.

особо опасные болезнимелиоидозштаммхранениепассажлиофилизацияparticularly dangerous diseasesmelioidosisstrainstoragepassagelyofilyzationРабота выполнена за счет средств ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» в рамках научно-исследовательских работ по теме «Коллекционирование, поддержание, пополнение и хранение штаммов возбудителей особо опасных болезней (ООБ), организация их учета, проведение исследований по из-учению биологических свойств и обеспечения предприятий агропромышленного комплекса штаммами возбудителей ООБ».The work was carried out using the funds of the FSBSI “FCTRBS-ARRVI” within the research “Collecting, maintaining, replenishing and storing strains of highly dangerous diseases (HDD), keeping records of them, studying their biological properties and providing agro-industry companies with HDD strains”ReferencesОнищенко Г. Г., Кутырев В. В., Топорков А. В., Осин А. В. Современное состояние коллекционной деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных болезней I–II групп патогенности. Проблемы особо опасных инфекций. 2010; 1 (103): 5–10. DOI:10.21055/0370-1069-2010-1(103)-5-10.Onishenko G. G., Kutyrev V. V., Toporkov A. V., Ossin A. V. Current state of collection activity relative to the use of infectious agents of I–II pathogenicity groups. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2010; 1 (103): 5–10. DOI:10.21055/0370-1069-2010-1(103)-5-10. (in Russ.)Дятлов И. А. Коллекции патогенных микроорганизмов – значение и проблемы. Бактериология. 2018; 3 (1): 5–6. eLIBRARY ID: 35598142.Dyatlov I. A. Problems of pathogenic microorganisms collections. Bacteriology. 2018; 3 (1): 5–6. eLIBRARY ID: 35598142. (in Russ.)Артемьева Е. А., Мельникова Л. А., Родионов А. П. Особенности подготовки и выдачи производственного штамма 5584 Burkholderiamallei в соответствии с требованиями биологической безопасности. Ветеринария сегодня. 2021; 10 (3): 243–247. DOI:10.29326/2304-196X-2021-3-38-243-247.Artemeva E. A., Melnikova L. A., Rodionov A. P. Preparation and transfer of Burkholderia mallei production strain 5584 in accordance with the biosafety requirements. Veterinary Science Today. 2021; 10 (3): 243–247. DOI:10.29326/2304-196X-2021-3-38-243-247.Мельникова Л. А., Иванова С. В., Галиуллин А. К., Макаев Х. Н. Определение жизнеспособности и сохранность биологических свойств штаммов возбудителя сапа при длительном хранении. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. 2018; 234 (2): 137–141. eLIBRARY ID: 35094225.Melnikova L. A., Ivanova S. V., Galiullin А. K., Makaev Kh. N. The determination of the viability and safety of biological properties of strains of theglandersagentduring long-term storage. Scientific Notes Kazan Bauman State Academy of Veterinary Medicine. 2018; 234 (2): 137–141. eLIBRARY ID: 35094225. (in Russ.)Озерская С. М., Кочкина Г. А., Иванушкина Н. Е., Запрометова К. М., Еремина С. С., Князева Е. В. Состояние коллекций микроорганизмов в России. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю. А. Овчинникова. 2006; 2 (3): 51–61. eLIBRARY ID: 12830842.Ozerskaja S. M., Kochkina G. A., Ivanushkina N. E., Zaprometova K. M., Eremina S. S., Knyazeva E. V. The state of collections of microorganisms in Russia. Ovchinnikov Bulletin of Biotechnology and Physical and Chemical Biology. 2006; 2 (3): 51–61. eLIBRARY ID: 12830842. (in Russ.)Молчанова Е. В., Лопастейская Я. А., Незнамова А. В., Кузютина Ю. А., Агеева Н. П., Захарова И. Б. и др. Особенности идентификации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei с помощью микробиологического анализатора Vitek 2 Compact 30. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; 3: 57–61. DOI:10.21055/0370-1069-2016-3-57-61.Molchanova E. V., Lopasteiskaya Ya. A., Neznamova A. V., Kuzyutina Yu. A., Ageeva N. P., Zakharova I. B., et al. Peculiarities of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei identification using microbiological analyzer Vitek 2 Compact 30. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2016; 3: 57–61. DOI:10.21055/0370-1069-2016-3-57-61. (in Russ.)Захарова И. Б., Топорков А. В., Викторов Д. В. Мелиоидоз и сап: современное состояние проблемы и актуальные вопросы эпидемиологического надзора. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018; 6: 103–109. DOI:10.36233/0372-9311-2018-6-103-109.Zakharova I. B., Toporkov A. V., Viktorov D. V. Melioidosis and glanders: current state and actual issues of epidemiological surveillance. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. 2018; 6: 103–109. DOI:10.36233/0372-9311-2018-6-103-109. (in Russ.)Онищенко Г. Г., Пальцев М. А., Зверев В. В., Иванов А. А., Киселев В. И., Нетесов С. В. и др. Биологическая безопасность. М.: Медицина; 2006. 304 с.Onishchenko G. G., Pal’tsev M. A., Zverev V. V., Ivanov A. A., Kiselev V. I., Netesov S. V., et al. Biological Safety. Moscow: Meditsina; 2006. 304 p. (in Russ.)МУ 4.2.2787-10 Лабораторная диагностика мелиоидоза: методические указания. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2011. 32 с. Режим доступа: https://base.garant.ru/70519336.MU 4.2.2787-10 Laboratory diagnosis of melioidosis: guidelines. M.: Federal Centre of Hygiene and Epidemiology of the Rospotrebnadzor, 2011. 32 p. Available at: https://base.garant.ru/70519336. (in Russ.)Ряпис Л. А., Илюхин В. И., Сенина Т. В., Шубникова Е. В., Будченко А. А., Куликова А. С. Сравнительная характеристика бурхольдерий группы pseudomallei. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2013; 1: 3–8. eLIBRARY ID: 19052685.Ryapis L. A., Ilyukhin V. I., Senina T. V., Shubnikova E. V., Budchenko A. A., Kulikova A. S. Comparative characteristic of Burkholderiae pseudomallei group. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. 2013; 1: 3–8. eLIBRARY ID: 19052685. (in Russ.)Краткий определитель бактерий Берги. Под ред. Дж. Хоулта. М.: Мир; 1980. 495 с.The Shorter Bergey’s Manual of Determinative bacteriology. Ed. by J. G. Holt. 8th ed. Baltimore: The William & Wilkins Co.; 1977. 356 p.Охапкина В. Ю., Пяткова Н. В., Барамзина Г. В., Фоменков О. О., Федотов А. К. Опыт длительного хранения штаммов возбудителя туляремии. Проблемы особо опасных инфекций. 2018; 4: 69–74. DOI:10.21055/0370-1069-2018-4-69-74.Okhapkina V. Yu., Pyatkova N. V., Baramzina G. V., Fomenkov O. O., Fedotov A. K. Long-term storage of tularemia agent strains. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2018; 4: 69–74. DOI:10.21055/0370-10692018-4-69-74. (in Russ.)Похиленко В. Д., Баранов А. М., Детушев К. В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденции развития. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. 2009; 4 (12): 99–121. Режим доступа: https://izvuz_mn.pnzgu.ru/files/izvuz_mn.pnzgu.ru/13409.pdf.Pokhilenko V. D., Baranov A. M., Detushev K. V. Metody dlitel’nogo hranenija kollekcionnyh kul’tur mikroorganizmov i tendencii razvitija = Methods of long-term storage of collection microorganism cultures and development trends. University proceedings. Volga region. Medical sciences. 2009; 4 (12): 99–121. Available at: https://izvuz_mn.pnzgu.ru/files/izvuz_mn.pnzgu.ru/13409.pdf. (in Russ.)Ветеринарные препараты: cправочник. Под ред. Д. Ф. Осидзе. М.: Колос; 1981. 448 с.Veterinary medicinal products: Formulary. Ed by D. F. Osidze. Moscow: Kolos; 1981. 448 p. (in Russ.)Мельникова Л. А., Иванова С. В., Макаев Х. Н., Букова Н. К. Влияние сред высушивания на устойчивость возбудителя сапа в процессе лиофилизации и дальнейшем хранении. Ветеринарный врач. 2017; 3: 17–20. eLIBRARY ID: 29331324.Melnikova L. A., Ivanova S. V., Makaev Kh. N., Bukova N. K. The influence of media on dryng stability of the causative agent of glanders in the process of lyophilization and subsequent storage. Veterinarian. 2017; 3: 17–20. eLIBRARY ID: 29331324. (in Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.