veterinaryВетеринария сегодняVeterinary Science Today2304-196X2658-6959"Veinard"10.29326/2304-196X-2022-11-2-156-162veterinary-644Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ | БИОТЕХНОЛОГИЯORIGINAL ARTICLES | BIOTECHNOLOGYВлияние сыворотки крови крупного рогатого скота на ростовые свойства питательной среды для культивирования Mycoplasma gallisepticum и Mycoplasma synoviaeInfluence of bovine blood serum on growth properties of nutrient media for Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae cultivationhttps://orcid.org/0000-0002-4893-6567КозловД. А.KozlovD. A.

Козлов Дмитрий Александрович - аспирант, ведущий ветеринарный врач лаборатории профилактики болезней птиц ВНИИЗЖ.

600901, Владимир,  мкр. Юрьевец.

Dmitry  A. Kozlov - Post-Graduate Student, Leading Veterinarian, Laboratory for Avian Diseases Prevention,  ARRIAH.

600901, Vladimir, Yur’evets.

kozlov_da@arriah.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8819-0720ВолковМ. С.VolkovM. S.

Волков Михаил   Сергеевич - кандидат   ветеринарных наук,  доцент,  заведующий  лабораторией  эпизоотологии и мониторинга ВНИИЗЖ.

Владимир.

Mikhail S. Volkov - Candidate of Sciences (Veterinary Medicine), Associate Professor, Head of Laboratory for Epizootology  and Monitoring, ARRIAH.

Vladimir.

volkov_ms@arriah.ruЧерняеваТ. Ю.ChernyayevaT. Yu.

Черняева Татьяна Юльевна - кандидат ветеринарных  наук, ведущий научный сотрудник лаборатории профилактики болезней птиц ВНИИЗЖ.

Владимир.

Tatyana Yu. Chernyayeva - Candidate  of Sciences (Veterinary Medicine), Leading  Researcher, Laboratory for Avian Diseases Prevention, ARRIAH.

Vladimir.

chernyaeva@arriah.ruСорокинаМ. И.SorokinaM. I.

Сорокина Марина Ивановна - ведущий биолог лаборатории эпизоотологии  и мониторинга ВНИИЗЖ.

Владимир.

Marina I. Sorokina - Leading  Biologist,  Laboratory  for Avian Diseases Prevention, ARRIAH.

Vladimir.

sorokina@arriah.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7489-1772ИрзаВ. Н.IrzaV. N.

Ирза Виктор Николаевич - доктор ветеринарных наук, доцент, главный научный сотрудник информационно-аналитического центра ВНИИЗЖ.

Владимир.

Viktor N. Irza - Doctor of Sciences (Veterinary Medicine), Associate Professor, Chief Researcher, Information and Analysis Centre, ARRIAH.

Vladimir.

irza@arriah.ruФедеральный центр охраны здоровья животныхРоссияFederal Centre for Animal HealthRussian Federation202210062022112156162Copyright © Козлов Д.А., Волков М.С., Черняева Т.Ю., Сорокина М.И., Ирза В.Н., 20222022Козлов Д.А., Волков М.С., Черняева Т.Ю., Сорокина М.И., Ирза В.Н.Kozlov D.A., Volkov M.S., Chernyayeva T.Y., Sorokina M.I., Irza V.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/644

Ростовые свойства питательных сред для культивирования патогенных микоплазм зависят от вида сыворотки крови в их составе. Проведены сравнительные испытания двух бесклеточных питательных сред с добавлением сывороток крови свиней и крупного рогатого скота для культивирования штаммов «S6» Mycoplasma gallisepticum и «WVU 1853» Mycoplasma synoviae. Изучение ростовых свойств испытуемых питательных сред проводили путем определения активности полученной биомассы в реакции гемагглютинации и реакции агглютинации, а также оценки концентрации жизнеспособных клеток после 9-го пассажа культивирования. Показано, что бесклеточная питательная среда с сывороткой крови свиней является оптимальной для культивирования патогенных видов микоплазм, вызывающих инфекционные заболевания у птиц. Гемагглютинирующая активность культуры Mycoplasma gallisepticum достигала 5 ГАЕ log2 после 72 ч культивирования, агглютинирующая активность Mycoplasma synoviae – 5 АЕ log2 за 88-часовой период инкубации, концентрация жизнеспособных клеток обоих штаммов была на уровне 106 КОЕ/см3. Низкие ростовые свойства среды, приготовленной с добавлением сыворотки крови крупного рогатого скота, вероятнее всего, связаны с ее биохимическим составом, которая содержит в 5–20 раз больше провитамина А, нежели сыворотка крови свиней, а холестерин в основном представлен липопротеинами высокой плотности. Напротив, в сыворотке крови свиней большая часть липопротеинов имеет низкую плотность, содержащих большое количество жирных кислот и холестерина, которые и являются основными структурными элементами  клеток микоплазм.  Полученные результаты исследований имеют практическую ценность и могут быть использованы  в технологии культивирования патогенных видов микоплазм  птиц при производстве  средств диагностики и профилактики.

The growth properties of the nutrient medium for the cultivation of pathogenic mycoplasmas depend on the type of blood serum it is supplemented with. Comparative tests of two cell-free nutrient media supplemented with bovine and porcine blood sera for the cultivation of strains “S6” Mycoplasma gallisepticum and “WVU 1853” Mycoplasma synoviae were performed. Growth properties of the tested nutrient media were assessed by determining the activity of the resulting biomass in the hemagglutination and agglutination assays, as well as by determining  the concentration of viable cells after the 9th passage. It has been shown that a cell-free nutrient medium supplemented with the porcine blood serum is optimal for the cultivation of pathogenic mycoplasma species causing infectious diseases in birds. The hemagglutinating activity of the Mycoplasma gallisepticum culture reached 5 HAU log2 after 72 hours of cultivation, the agglutinating activity of Mycoplasma synoviae reached 5 AU log2  during the 88-hour incubation period, the concentration  of viable cells of both strains was 106 CFU/cm3. The low growth properties of the medium  prepared  with the addition  of bovine blood serum are most likely associated with its biochemical composition, which contains 5–20 times more provitamin A than the porcine blood serum, and high density lipoprotein cholesterol. On the contrary, in the porcine blood serum, most of the lipoproteins have a low density, containing a large amount of fatty acids and cholesterol, which are the main structural elements of mycoplasma cells. The obtained test results are of practical value and can be used in the technology of cultivation of pathogenic  species of avian mycoplasmas in the production of diagnostic and preventive tools.

Mycoplasma gallisepticumMycoplasma synoviaeпитательная средакультивированиесыворотка кровиMycoplasma gallisepticumMycoplasma synoviaenutrient mediumcultivationblood serumРабота выполнена за счет средств ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках тематики научно-исследовательских работ «Ветеринарное благополучие».The study was funded by the FGBI “ARRIAH” within the framework of “Veterinary Welfare” research work.ReferencesБорхсениус С. Н., Чернова О. А. Микоплазмы: Молекулярная и клеточная биология, патогенность, диагностика. Л.: Наука; 1989. 156 с.Borchsenius S. N., Chernova O. A. Mycoplasmas: molecular and cellular biology, pathogenicity, diagnostics. Leningrad: Nauka; 1989. 156 р. (in Russ.)Каган Г. Я., Раковская И. В. Микоплазма-инфекция в культурах ткани. Ленинград: Медицина; 1968; 161.Kagan G. Ya., Rakovskaya I. V. Mycoplasma infection in tissue cultures. Leningrad: Meditsina; 1968; 161. (in Russ.)Прозоровский С. В., Раковская И. В., Вульфович Ю. В. Медицинская микоплазмология. М.: Медицина; 1995. 286 с.Prozorovskiĭ S. V., Rakovskaya I. V., Vulfovich Yu. V. Medical mycoplasmology. Moscow: Meditsina; 1995. 286 p. (in Russ.)Прозоровский С. В., Пронин А. В., Санин А. В. Иммунологические механизмы персистенции микоплазм. Вестник Академии медицинских наук СССР. 1985; 10: 43–51. PMID: 4082756.Prozorovskiĭ S. V., Pronin A. V., Sanin A. V. Immunologicheskie mekhanizmy persistentsii mikoplazm = Immunologic mechanisms of the persistence of Mycoplasma. Vestnik Akademii Meditsinskikh Nauk SSSR. 1985; 10: 43–51. PMID: 4082756. (in Russ.)Yadav J. P., Tomar P., Singh Y., Khurana S. K. Insights on Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae infection in poultry: a systematic review. Anim. Biotechnol. 2021; DOI: 10.1080/10495398.2021.1908316.Yadav J. P., Tomar P., Singh Y., Khurana S. K. Insights on Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae infection in poultry: a systematic review. Anim. Biotechnol. 2021; DOI: 10.1080/10495398.2021.1908316.Gautier-Bouchardon A. V. Antimicrobial resistance in Mycoplasma spp. Microbiol. Spectr. 2018; 6 (4). DOI: 10.1128/microbiolspec.ARBA-0030-2018.Gautier-Bouchardon A. V. Antimicrobial resistance in Mycoplasma spp. Microbiol. Spectr. 2018; 6 (4). DOI: 10.1128/microbiolspec.ARBA-0030-2018.Бессарабов Б. Ф. Болезни сельскохозяйственной птицы. М.: Колос; 1970; 80–82.Bessarabov B. F. Poultry diseases. Мoscow: Kolos; 1970; 80–82. (in Russ.)Малушко В. В. Борьба с инфекционными болезнями в промышленном птицеводстве. Ветеринария. 1982; 5: 36–37.Malushko V. V. Bor’ba s infektsionnymi boleznyami v promyshlennom ptitsevodstve = Infectious disease control in commercial poultry production. Veterinariya. 1982; 5: 36–37. (in Russ.)Бессарабов Б. Ф., Василевич Ф. И., Мельникова И. И. и др. Практикум по болезням птиц. М.: КолосС; 2005. 200 с.Bessarabov B. F., Vasilevich F. I., Mel’nikova I. I., et al. Guide on avian diseases. Moscow: KolosS; 2005. 200 p. (in Russ.)Микоплазмозы животных. Под ред. Я. Р. Коваленко. М.: Колос; 1976. 304 с.Animal mycoplasmoses. Ed. by Ya. R. Kovalenko. Мoscow: Kolos; 1976. 304 p. (in Russ.)Kleven S. H. Mycoplasma synoviae infection. In: Deseases of Poultry. Ed. by Y. M. Saif, H. J. Barnes, J. R. Glisson, A. M. Fadly, L. R. McDougald, D. E. Swayne. 11th ed. Ames: Iowa State University Press; 2003; 756–766.Kleven S. H. Mycoplasma synoviae infection. In: Deseases of Poultry. Ed. by Y. M. Saif, H. J. Barnes, J. R. Glisson, A. M. Fadly, L. R. McDougald, D. E. Swayne. 11th ed. Ames: Iowa State University Press; 2003; 756–766.Ирза В. Н. Инфекционный синовит птиц – эпизоотология и профилактика. Птицеводство. 2009; 11: 39–40. eLIBRARY ID: 17089360.Irza V. N. Infectious synovitis birds – epizootiology and prevention. Ptitsevodstvo. 2009; 11: 39–40. eLIBRARY ID: 17089360. (in Russ.)Коровин Р. Н., Зеленский В. П., Грошева Г. А. Лабораторная диагностика болезней птиц: справочник. М.: Агропромиздат; 1989; 172–174.Korovin R. N., ZelenskyV. P., GroshevaG. A. Laboratory diagnosis of avian diseases: Reference guide. Мoscow: Agropromizdat; 1989; 172–174. (in Russ.)Kulappu Arachchige S. N., Kanci Condello A., Zhu L., Shil P. K., Tivendale K. A., Underwood G. J., et al. Effects of immunosuppression on the efficacy of vaccination against Mycoplasma gallisepticum infection in chickens. Vet. Microbiol. 2021; 260:109182. DOI: 10.1016/j.vetmic.2021.109182.Kulappu Arachchige S. N., Kanci Condello A., Zhu L., Shil P. K., Tivendale K. A., Underwood G. J., et al. Effects of immunosuppression on the efficacy of vaccination against Mycoplasma gallisepticum infection in chickens. Vet. Microbiol. 2021; 260:109182. DOI: 10.1016/j.vetmic.2021.109182.Ирза В. Н., Сорокина М. И., Черняева Т. Ю., Волков М. С., Жалин М. В., Колотилов А. Н. Методика освежения и поддержания производственного штамма Mycoplasma gallisepticum «S6». Владимир: ФГУ «ВНИИЗЖ»; 2006. 7 с.Irza V. N., Sorokina M. I., Chernyaeva T. Yu., Volkov M. S., Zhalin M. V., Kolotilov A. N. Methods for refreshing and maintaining the Mycoplasma gallisepticum “S6”production strain. Vladimir: FGI“ARRIAH”; 2006. 7 p. (in Russ.)Ирза В. Н., Волков М. С., Черняева Т. Ю., Сорокина М. И., Колотилов А. Н. Методика освежения и поддержания производственного штамма Mycoplasma synoviae «WVU 1853». Владимир: ФГУ «ВНИИЗЖ»; 2006. 7 с.Irza V. N., Volkov M. S., Chernyaeva T. Yu., Sorokina M. I., Kolotilov A. N. Methods for refreshing and maintaining Mycoplasma synoviae “WVU 1853” production strain. Vladimir: FGI “ARRIAH”; 2006. 7 p. (in Russ.)Черняева Т. Ю., Сорокина М. И., Козлов Д. А., Волков М. С. Методические рекомендации по определению гемагглютинирующей активности возбудителя респираторного микоплазмоза птиц (Mycoplasma gallisepticum): утв. ФГБУ «ВНИИЗЖ» 23.12.2020 № 95-20. Владимир: ФГБУ «ВНИИЗЖ»; 2020. 29 с.Chernyaeva T. Yu., Sorokina M. I., Kozlov D. A., Volkov M. S. Guidelines for the determination of hemagglutinating activity of the causative agent of avian mycoplasmosis (Mycoplasma gallisepticum): approved by FGBI “ARRIAH”. December 23, 2020. No. 95-20. Vladimir: FGBI “ARRIAH”; 2020. 29 p. (in Russ.)Гирин М. В., Борисов А. В., Кулаков В. Ю., Сорокина М. И., Ирза В. Н. Измерение роста Mycoplasma gallisepticum. Достижения молодых ученых – в ветеринарную практику: материалы конференции молодых ученых (16–18 ноября 2000 г.). Владимир: ВНИИЗЖ; 2000; 38–42.Girin M. V., Borisov A. V., Kulakov V. Yu., Sorokina M. I., Irza V. N. Izmerenie rosta Mycoplasma gallisepticum = Mycoplasma gallisepticum growth measurement. Dostizheniya molodykh uchenykh – v veterinarnuyu praktiku: materialy konferentsii molodykh uchenykh (16–18 noyabrya 2000 g.) = Achievements of early carrier researchers – to veterinary practice: proceedings of the conference of early carrier researchers (November 16–18, 2000). Vladimir: ARRIAH; 2000; 38–42. (in Russ.)Кондрахин И. П., Таланов Г. А., Пак В. В. Внутренние незаразные болезни животных: учебник. М.: КолосС; 2003. 461 с.Kondrakhin I. P., Talanov G. A., Pak V. V. Internal non-communicable diseases of animals: a textbook. Moscow: KolosS; 2003. 461 p. (in Russ.)Мотузко И. С., Хвостова О. В. Возрастная динамика липопротеидов сыворотки крови крупного рогатого скота. Вестник Витебского государственного медицинского университета. 2003; 2 (4): 116–118. Режим доступа: https://www.elib.vsmu.by/bitstream/123/8975/1/vVG-MU_2003_4_116-118.pdf.Motuzko I. S., Khvostova O. V. Lipoprotein age dynamics of bovine blood serum. Vestnik of Vitebsk State Medical University. 2003; 2 (4): 116–118. Available at: https://www.elib.vsmu.by/bitstream/123/8975/1/vVG-MU_2003_4_116-118.pdf. (in Russ.)Липопротеины. Виды и физиология липопротеинов. MedUniver. Режим доступа: https://meduniver.com/Medical/Physiology/1184.html (дата обращения: 27.08.2021).Lipoproteiny. Vidy i fiziologiya lipoproteinov = Lipoproteins. Types and physiology of lipoproteins. MedUniver. Available at: https://meduniver.com/Medical/Physiology/1184.html (date of access: 27.08.2021). (in Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.