Красникова Мария Сергеевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела генодиагностики инфекционных болезней животных отделения биотехнологии
Москва
Maria S. Krasnikova, Candidate of Science (Biology), Senior Researcher, Department for Genodiagnostics of Infectious Animal Diseases of VGNKI, Department of Biotechnology
Moscow
Яцентюк Светлана Петровна, кандидат биологических наук, заведующий отделом генодиагностики инфекционных болезней животных отделения биотехнологии
123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5
Svetlana P. Yatsentyuk, Candidate of Science (Biology), Head of the Department for Genodiagnostics of Infectious Animal Diseases of VGNKI, Department of Biotechnology
123022, Moscow, Zvenigorodskoye shosse, 5
Брюсова Мария Борисовна, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, заведующий отделом исследований биологических объектов
Москва
Maria B. Bryusova, Candidate of Science (Biology), Leading Researcher, Head of the Department for Biological Object Studies
Moscow
Козлова Александра Дмитриевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела генодиагностики инфекционных болезней животных отделения биотехнологии
Москва
Aleksandra D. Kozlova, Candidate of Science (Biology), Senior Researcher, Department for Genodiagnostics of Infectious Animal Diseases of VGNKI Department of Biotechnology
Moscow
Гергель Мария Александровна, заместитель директора, руководитель испытательного центра
Москва
Mariya A. Gergel, Deputy Director and Head of Testing Center
Moscow
В работе представлены результаты сравнения 12 отечественных диагностических наборов/ПЦР-тест-систем для выявления ДНК вируса африканской чумы свиней по таким показателям, как полнота и грамотность инструкций по применению; маркировка и комплектация; удобство использования наборов; стабильность работы реагентов в течение срока хранения; стабильность реагентов после транспортировки и многократного замораживания – оттаивания; межсерийная сходимость; чувствительность при тестировании различного материала и специфичность наборов. Изучение инструкций по применению и комплектации наборов выявило неполноту некоторых инструкций. Отмечено, что отдельные производители допускают в инструкциях серьезные ошибки, которые могут существенно повлиять на интерпретацию результатов исследования. Также отмечена недостаточность контроля производственного процесса, результатом которой является выпуск неработоспособных наборов, а также наборов с низким качеством компонентов и ошибками в их маркировке. Так, при проведении исследования один набор показал свою неработоспособность, демонстрируя отсутствие кривых накопления флуоресцентного сигнала как при амплификации положительных контролей, так и ДНК изолятов вируса АЧС. При оценке специфичности все наборы показали отсутствие неспецифических реакций и приемлемую чувствительность при тестировании различных типов материала (крови, суспензий свиной селезенки и черевы свиной, используемой при производстве колбасных изделий), содержащих вирус АЧС. Проверка стабильности показала резкое ухудшение качества работы одного набора в пределах срока годности, для другого набора выявлено существенное снижение уровня флуоресцентного сигнала при многократном замораживании – оттаивании. Сравнение сходимости результатов работы разных серий наборов одного производителя показало существенные расхождения для 41,5% наборов. Установлено, что лишь у 33% рассмотренных наборов для выявления ДНК вируса АЧС отсутствуют какие-либо недостатки. Результаты проведенной работы демонстрируют необходимость контроля выпускаемых диагностических наборов, используемых в государственных программах мониторинга заболеваний животных.
The paper presents comparative test results of 12 domestically produced diagnostic kits/PCR test systems for DNA detection of the African swine fever virus with regard to the following parameters: completeness and correctness of instructions for use; labeling and package contents; convenience of using the kit; shelf life stability of reagents; stability of reagents after transportation and repeated freezing – thawing; batch-to-batch repeatability; sensitivity of various test materials and specificity of kits. The study of the instructions for use and kit contents revealed incompleteness of some instructions. It was noted that some manufacturers make serious errors in the instructions, which can significantly affect the interpretation of test results. It was also observed that there is insufficient control of the manufacturing process, which results in the production of faulty kits, as well as kits with poor-quality components and errors in the labeling. Thus, during the study, one kit showed its inactivity, demonstrating the absence of accumulation curves of the fluorescent signal during amplification of both positive controls and DNA of ASFV isolates. When the specificity was assessed, all the kits showed absence of non-specific reactions and acceptable sensitivity when testing various types of ASFV-containing material (blood, suspensions of pork spleen and pork casings used in sausage production). The stability test showed a sharp deterioration in the quality of operation of one kit within the shelf life period, and a significant decrease in the fluorescence signal was detected during repeated freeze – thaw cycles for another kit. Comparison of the repeatability results of different kit batches of the same manufacturer showed significant discrepancies for 41.5% of all kits. It was found that only 33% of the studied kits for ASFV DNA detection were compliant. The results of this study demonstrate the need for control of the manufactured diagnostic kits used in state programs for animal disease monitoring.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.