<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">veterinary</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Ветеринария сегодня</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Veterinary Science Today</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">2304-196X</issn><issn pub-type="epub">2658-6959</issn><publisher><publisher-name>"Veinard"</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.29326/2304-196X-2021-1-36-15-21</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">veterinary-538</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>БИОТЕХНОЛОГИЯ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>BIOTECHNOLOGY</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Использование специализированных добавок Sheff-Vax ACF для культивирования клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>The use of specialised Sheff-Vax ACF supplements for ВНК-21/SUSP/ARRIAH cell cultivation and FMDV reproduction</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-3997-3390</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Гусева</surname><given-names>М. Н.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Guseva</surname><given-names>M. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Гусева Марина Николаевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела биологического и технологического контроля (испытательной лаборатории ветпрепаратов)</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Marina N. Guseva, Candidate of Science (Biology), Senior Researcher, Department for Biological and Technological Control (Veterinary Product Testing Laboratory)</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">guseva_mn@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-4682-6559</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Доронин</surname><given-names>М. И.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Doronin</surname><given-names>M. I.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Доронин Максим Игоревич, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории профилактики ящура</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Maksim I. Doronin, Candidate of Science (Biology), Leading Researcher, Laboratory for FMD Prevention</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">doronin@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-9936-3052</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Шишкова</surname><given-names>А. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Shishkova</surname><given-names>A. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Шишкова Анжела Алексеевна, кандидат ветеринарных наук, главный технолог отдела инноваций</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Anzhela A. Shishkova, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Chief Technologist, Innovation Department</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">shishkova@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-1718-1955</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Михалишин</surname><given-names>Д. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Mikhalishin</surname><given-names>D. V.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Михалишин Дмитрий Валерьевич, кандидат ветеринарных наук, заведующий лабораторией профилактики ящура</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Dmitry V. Mikhalishin, Candidate of Science (Veterinary Medicine), Head of Laboratory for FMD Prevention</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">mihalishindv@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-5436-0042</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Шевченко</surname><given-names>М. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Shevchenko</surname><given-names>M. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Шевченко Максим Александрович, ведущий ветеринарный врач лаборатории профилактики ящура</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Maksim A. Shevchenko, Leading Veterinarian, Laboratory for FMD Prevention</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">shevchenko_ma@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0002-5263-1491</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Манин</surname><given-names>Б. Л.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Manin</surname><given-names>B. L.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Манин Борис Леонидович, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник сектора культуры клеток отдела инноваций</p><p>г. Владимир</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Boris L. Manin, Candidate of Sciences (Biology), Leading Researcher, Sector for Cell Culture, Innovation Department</p><p>Vladimir</p></bio><email xlink:type="simple">manin_bl@arriah.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>FGBI “Federal Centre for Animal Health” (FGBI “ARRIAH”)</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2021</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>29</day><month>03</month><year>2021</year></pub-date><volume>1</volume><issue>1</issue><fpage>15</fpage><lpage>21</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Гусева М.Н., Доронин М.И., Шишкова А.А., Михалишин Д.В., Шевченко М.А., Манин Б.Л., 2021</copyright-statement><copyright-year>2021</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Гусева М.Н., Доронин М.И., Шишкова А.А., Михалишин Д.В., Шевченко М.А., Манин Б.Л.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Guseva M.S., Doronin M.I., Shishkova A.A., Mikhalishin D.V., Shevchenko M.A., Manin B.L.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/538">https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/538</self-uri><abstract><p>Предъявляемые в настоящее время к иммунобиологическим препаратам требования чистоты и безопасности могут быть эффективно достигнуты при использовании бессывороточных питательных сред и специализированных добавок неживотного происхождения. В данной работе показана возможность применения добавок Sheff-Vax ACF®, производимых компанией Kerry, Inc. (Ирландия), для культивирования культуры клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура. Было отмечено, что к седьмому пассажу в присутствии добавки Sheff-Vax Plus PF ACF концентрация клеток и кратность прироста были выше на 40–60%, чем при внесении добавок Sheff-Vax PF ACF и Sheff-Vax Plus ACF. Не обнаружено различий в изменении водородного показателя. При репродукции вируса ящура в полученных клетках определили, что в опытных образцах с 1 млн клеток 146+75S компонентов было больше в 2,3–2,4 раза по сравнению с контролем. При культивировании с добавкой Sheff-Vax Plus PF ACF клетки имели нормальную морфологию, множество динамических выростов. В присутствии данной добавки к седьмому пассажу такие показатели, как кратность прироста и концентрация суспензии, в контрольных и опытных образцах выравнивались. Количество иммуногенных компонентов вируса ящура, репродуцированного в клетках с указанной добавкой, было выше на 20–30%, чем в клетках, выросших с применением других добавок. Установлено, что концентрация клеток линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH и кратность прироста в присутствии специализированных добавок была меньше, чем в контрольных образцах с добавлением сыворотки и гидролизата белков крови в питательную среду. При этом выход вируса с 1 млн клеток был выше в культуре, выросшей при внесении добавок Sheff-Vax ACF. Из трех исследованных добавок наиболее приемлемой для культивирования линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH и репродукции вируса ящура в полученных клетках была Sheff-Vax Plus PF ACF.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>Compliance with the existing purity and safety requirements for immunobiologicals can be effectively achieved by the use of serum-free nutrient media and specialised supplements of non-animal origin. The paper shows the possibility of using Sheff-Vax ACF® supplements (Kerry, Inc., Ireland) for ВНК-21/SUSP/ARRIAH cell cultivation and FMDV reproduction. By passage 7, cell concentration and growth rate with Sheff-Vax Plus PF ACF were found to be 40–60% higher than with Sheff- Vax PF ACF and Sheff-Vax Plus ACF. No differences were observed as regards changes in pH. During FMDV reproduction in the cells, it was found that the number of 146+75S components in the test samples containing 1 million cells was 2.3–2.4 higher compared to the controls. Cells cultured with the use of Sheff-Vax Plus PF ACF supplement had normal morphology and multiple dynamic protrusions. In the presence of this supplement, growth rate and suspension concentration in the test and control samples became equal by passage 7. The number of immunogenic components of FMDV reproduced in the cells grown using Sheff-Vax Plus PF ACF was 20–30% higher than in the cells grown using other supplements. ВНК-21/SUSP/ARRIAH cell concentration and growth rate in the presence of specialised supplements were found to be lower than those in the control samples with serum and blood protein hydrolysate added to the nutrient medium. The virus yield from 1 million cells was higher in the culture grown using Sheff-Vax ACF supplements. Sheff-Vax Plus PF ACF was found to be the most suitable for ВНК-21/SUSP/ARRIAH cell cultivation and FMDV reproduction in the said cells out of the three tested supplements.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>добавки Sheff-Vax</kwd><kwd>кратность прироста</kwd><kwd>клетки ВНК-21/SUSP/ARRIAH</kwd><kwd>вирус ящура</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>Sheff-Vax supplements</kwd><kwd>growth rate</kwd><kwd>ВНК-21/SUSP/ARRIAH cells</kwd><kwd>foot-and-mouth disease virus (FMDV)</kwd></kwd-group><funding-group><funding-statement xml:lang="ru">Работа выполнена за счет средств ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках научно-исследовательских работ по теме «Ветеринарное благополучие».</funding-statement><funding-statement xml:lang="en">The study was funded by the FGBI “ARRIAH” within the framework of “Veterinary Welfare” research work</funding-statement></funding-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Фрешни Р. Я. Культура животных клеток: практическое руководство. Пер. Ю. Н. Хомякова, Т. И. Хомяковой. М.: Лаборатория знаний; 2018. 760 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Freshney R. Ian. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique and Specialized Applications. 7th ed. NY: Wiley-Blackwell; 2015. 736 р.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Шаманская Т. В., Осипова Е. Ю., Пурбуева Б. Б., Устюгов А. Ю., Астрелина Т. А., Яковлева М. В., Румянцев С. А. Культивирование мезенхимальных стволовых клеток ex vivo в различных питательных средах (обзор литературы и собственный опыт). Онкогематология. 2010; 5 (3): 65–71. eLIBRARY ID: 15559360.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Shamanskaya T. V., Osipova Ye. Yu., Purbueva B. B., Ustyugov A. Yu., Astrelina T. A., Yakovleva M. V., Rumyantsev S. A. Ex vivo expansion of mesenchymal stem cells in different culture conditions (the literature review and own experience). Oncohematology [Onkogematologiya]. 2010; 5 (3): 65–71. eLIBRARY ID: 15559360. (in Russian)</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии). Под ред. Л. П. Дьяконова; Рос. акад. с.-х. наук. 2-е изд. доп. М.: Спутник+; 2009. 652 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Animal cell in culture (methods and implementation in biotechnology) [Zhivotnaya kletka v kul’ture (metody i primenenie v biotekhnologii)]. Ed. by L. P. Dyakonov; Russian Academy of Agricultural Sciences. 2nd ed., enlarged. M.: Sputnik+; 2009. 652 p. (in Russian)</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Трошкова Г. П., Мартынец Л. Д., Кирова Е. В., Сумкина Т. П., Юдин А. В. Бессывороточная питательная среда для культивирования клеток Vero. Фундаментальные исследования. 2005; 5: 94. eLIBRARY ID: 10435525.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Troshkova G. P., Martynets L. D., Kirova E. V., Sumkina T. P., Yudin A. V. The serum-free medium formulation for the growth of Vero cell line. Fundamental Research. 2005; 5: 94. eLIBRARY ID: 10435525. (in Russian)</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Лозовой Д. А., Гусева М. Н., Михалишин Д. В., Доронин М. И., Манин Б. Л., Шишкова А. А. и др. ВНК-21/SUSP/ARRIAH – перевиваемая суспензионная сублиния клеток почки новорожденного сирийского хомячка, предназначенная для репродукции вирусов ящура, бешенства, парагриппа-3, болезни Ауески при производстве противовирусных вакцин, а также для изготовления диагностических и профилактических ветеринарных биопрепаратов. Патент 2722671 Российская Федерация, МПК С12N 5/10 (2006.01). ФГБУ «ВНИИЗЖ». № 2019131190. Заявл. 01.10.2019. Опубл. 02.06.2020. Бюл. № 16. Режим доступа: https://patents.s3.yandex.net/RU2722671C1_20200602.pdf.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Lozovoy D. A., Guseva M. N., Mikhalishin D. V., Doronin M. I., Manin B. L., Shishkova A. A., et al. BHK-21/SUSP/ARRIAH – continuous suspension subline of newborn syrian hamster kidney cells, intended for reproduction of foot-and-mouth disease viruses, rabies, parainfluenza-3, Aujeszky’s disease in producing antiviral vaccines, as well as for making diagnostic and preventive veterinary biopreparations. Patent No. 2722671 Russian Federation, IPC С12N 5/10 (2006.01). FGBI “ARRIAH”. Application 2019131190. Submitted on 01.10.2019. Published on 02.06.2020. Bulletin No. 16. Available at: https://patents.s3.yandex.net/RU2722671C1_20200602.pdf. (in Russian)</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
