veterinaryВетеринария сегодняVeterinary Science Today2304-196X2658-6959"Veinard"10.29326/2304-196X-2019-2-29-60-65veterinary-418Research ArticleОБЩИЕ ВОПРОСЫGENERAL ISSUESОЦЕНКА ПРИГОДНОСТИ МЕТОДИКИ ВЫДЕЛЕНИЯ YERSINIA ENTEROCOLITICA В СЫРЬЕ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯVALIDATION OF METHOD FOR YERSINIA ENTEROCOLITICA ISOLATION FROM RAW MATERIALS OF ANIMAL ORIGINhttps://orcid.org/0000-0002-5324-7678БородкинаИ. В.BorodkinaI. V.

Руководитель сектора, аспирант

Симферополь 

Head of Sector, Post-Graduate Student

Simferopol city

borodkina@arriah.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7510-1269ШадроваН. Б.ShadrovaN. B.

Заведующий лабораторией, кандидат биологических наук

Владимир 

Head of Laboratory, Candidate of Sciences (Biology)

Vladimir

shadrova@arriah.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3143-7339ПрунтоваО. В.PruntovaO. V.

Главный эксперт, доктор биологических наук, профессор

Владимир 

Chief Expert, Doctor of Sciences (Biology), Professor

Vladimir

pruntova@arriah.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7796-7349ДанильченкоС. И.DanilchenkoS. I.

Руководитель лабораторно-диагностического центра, кандидат ветеринарных наук

Симферополь

Head of Laboratory and Diagnostic Centre, Candidate of Sciences (Veterinary Medicine)

Simferopol city

danylchenko@arriah.ruФилиал ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Симферополь, Республика КрымРоссияFGBI “ARRIAH” Branch in Republic of CrimeaRussian FederationФГБУ «ВНИИЗЖ», г. ВладимирРоссияFGBI "ARRIAH", VladimirRussian Federation201928062019026065Copyright © Бородкина И.В., Шадрова Н.Б., Прунтова О.В., Данильченко С.И., 20192019Бородкина И.В., Шадрова Н.Б., Прунтова О.В., Данильченко С.И.Borodkina I.V., Shadrova N.B., Pruntova O.V., Danilchenko S.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/418

В настоящее время во всех странах мира наблюдается тенденция к росту числа заболеваний людей кишечным иерсиниозом, вызываемым бактерией Yersinia enterocolitica. Данный микроорганизм широко распространен в природе, способен длительное время сохраняться в про­дукции животного происхождения, размножаться при низких температурах. Основными источниками инфекции являются мясо и мясные продукты. Для выявления Yersinia enterocolitica из образцов пищевых продуктов и кормов для животных применяют горизонтальный метод обнаружения согласно ГОСТ ISO 10273-2013. Отмечено, что выделение Yersinia enterocolitica связано с определенными трудностями, так как часто возбудитель содержится в пробе в незначительных количествах, и только использование специальных методов позволяет исключить сопутствующую микрофлору. В работе предложено при выполнении стандартной методики предварительно проводить холодовое обогащение исследуемого материала при температуре (4 ± 1) °C. Проведена валидация методики согласно ГОСТ ISO 16140-2011. В результате установлено, что валидируемый метод выявления бактерий Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах, реализуемый в условиях лаборатории микробио­логических исследований, является специфичным. Чувствительность метода составляет 10 КОЕ/ см3. Внутрилабораторная воспроизводимость и повторяемость подтверждены соответствующими испытаниями. Применение дополнительного этапа культивирования при температуре (4 ± 1) °C позволяет полностью исключить рост не обладающих психрофильными свойствами микроорганизмов.

Upward trend in the number of human yersiniosis cases, caused by bacterium Yersinia enterocolitica, is globally observed nowadays. This microorganism is widely spread in the environment, able to persist for prolonged periods in animal products and propagate under low temperatures. Basic infection sources are meat and meat products. In order to isolate Yersinia enterocolitica from food and feed samples horizontal method for the detection pursuant to GOST ISO 10273-2013 was used. It was noted, that Yersinia enterocolitica isolation is associated with certain difficulties, because the sample contains only small quantities of the agent and only the use of special techniques allows removing the concurrent microflora. It was proposed to use cold enrich­ment (4 ± 1) °C of the test material before conventional technique is started. The technique was validated pursuant to GOST ISO 16140-2011. As a result, it was established that validated method for Yersinia enterocolitica bacteria detection in food products, performed at the Microbiology Laboratory, is specific. The method sensitivity is 10 CFU/cm3. Intralaboratory reproducibility and repeatability were confirmed by relevant tests. Additional culture step at (4 ± 1) °C allows complete inhibition of non-psychrophilic microorganisms’ growth.

кишечный иерсиниозYersinia enterocoliticaпсихрофильные микроорганизмыхолодовое обогащениеyersiniosisYersinia enterocoliticapsychrophilic microorganismscold enrichmentReferencesБакулов И. А., Смирнов А. М., Васильев Д. А. Токсикоинфекции и токсикозы: учебное пособие. – Ульяновск: УГСХА, 2002. – 70 с.Bakulov I. A., Smirnov A. M., Vasiliev D. A. Toxic infections and toxicoses: study guide [Toksikoinfekcii i toksikozy: uchebnoe posobie]. Ulianovsk: USAA, 2002 (in Russian).Бренева Н. В., Марамович А. С., Климов В. Т. Экологические закономерности существования патогенных иерсиний в почвенных экосистемах // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2005. – № 6. – С. 82–88.Breneva N. V., Maramovich A. S., Klimov V. T. Ecological patterns of pathogenic Yersinia prevalence in soil ecosystems [Ekologicheskie zakonomernosti sushchestvovaniya patogennyh iersinij v pochvennyh ekosistemah]. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology [Žurnal mikrobiologii, èpidemiologii i immunobiologii]. 2005; 6: 82–88 (in Russian).Бхуниа А. К. Патогенные микроорганизмы пищевых продуктов: пер. с англ. – СПб.: Профессия, 2014. – 342 с.Bhunia A. K. Foodborne Microbial Pathogens: translated from English. SPb.: Professia, 2014 (in Russian).ГОСТ ISO 10273-2013. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения условно-патогенной бактерии Yersinia enterocolitica. – М.: Стандартинформ, 2014. – 43 с.GOST ISO 10273-2013. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica [Mikrobiologiya pishchevyh produktov i kormov dlya zhivotnyh. Gorizontal’nyj metod obnaruzheniya uslovno-patogennoj bakterii Yersinia enterocolitica]. М.: Standartinform, 2014 (in Russian).ГОСТ ISO 16140-2011. Микробиология продуктов питания и кормов для животных. Протокол валидации альтернативных методов. – М.: Стандартинформ, 2013. – 60 с.GOST ISO 16140-2011. Microbiology of food and animal feed¬ing stuffs. Protocol for the validation of alternative methods [Mikrobiologiya produktov pitaniya i kormov dlya zhivotnyh. Protokol validacii al’ternativnyh metodov]. М.: Standartinform, 2013 (in Russian).Диагностика иерсиниозов животных: учебное пособие / А. А. Шевченко, О. Ю. Черных, Л. В. Шевченко [и др.]. – Краснодар: КубГАУ, 2013. – 27 с.Diagnostics of animal yersiniosis: study guide [Diagnostika iersiniozov zhivotnyh: uchebnoe posobie]. А. А. Shevchenko, О. Yu. Chernykh, L. V. Shevchenko [et al.]. Krasnodar: KubSAU, 2013 (in Russian).Киселева И. С. Мясо как фактор передачи инфекции при иерсиниозе: автореф. дис. … канд. биол. наук. – Саратов, 2005. – 27 с.Kiseleva I. S. Meat as a factor of yersiniosis infection transmission [Myaso kak faktor peredachi infekcii pri iersinioze]: author’s abstract Thesis of Candidate of Sciences (Biology). Saratov, 2005 (in Russian).Кузнецов В. Г., Багрянцев В. Н. Пастеризованное молоко как фактор передачи возбудителей иерсиниозов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 1992. – № 4. – С. 22–26.Kuznetsov V. G., Bagryantsev V. N. Pasteurized milk as a factor of yersiniosis agent transmission [Pasterizovannoe moloko kak faktor peredachi vozbuditelej iersiniozov]. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology [Žurnal mikrobiologii, èpidemiologii i immunobiologii]. 1992; 4: 22–26 (in Russian).Макарова В. Н. Иерсиниоз свиней в условиях крупного сельскохозяйственного региона: эпизоотология, меры борьбы, лабораторное обеспечение эпизоотологического надзора: автореф. дис. ... канд. вет. наук. – Нижний Новгород, 2006. – 20 с.Makarova V. N. Pig yersiniosis in large agricultural regions: epizootology, control measures, laboratory testing within epizootological surveillance [Iersinioz svinej v usloviyah krupnogo sel’skohozyajstvennogo regiona: epizootologiya, mery bor’by, laboratornoe obespechenie epizootologicheskogo nadzora]: author’s abstract Thesis of Candidate of Sciences (Veterinary Medicine). Nizhny Novgorod, 2006 (in Russian).Микробиологический мониторинг иерсиний как основа санитарно-эпидемиологического надзора за иерсиниозами в организованных коллективах / А. Л. Панин, Л. А. Краева, В. Б. Сбойчаков [и др.] // Инфекция и иммунитет. – 2013. – Т. 3, № 3. – С. 217–228; DOI: 10.15789/2220-7619-2013-3-217-228.Microbiological monitoring of Yersinia as a basis for sanitary and epidemiological surveillance of yersiniosis in organized groups of people [Mikrobiologicheskij monitoring iersinij kak osnova sanitarno-epidemiologicheskogo nadzora za iersiniozami v organizovannyh kollek-tivah]. А. L. Panin, L. A. Krayeva, V. B. Sboychakov [et al.]. Russian Journal of Infection and Immunity [Infektsiya i immunitet]. 2013; 3 (3): 217–228; DOI: 10.15789/2220-7619-2013-3-217-228 (in Russian).МУК 4.2.3019-12. Организация и проведение лабораторных исследований на иерсиниозы на территориальном, региональном и федеральном уровнях: методические указания. – М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2012. – 59 с.MG 4.2.3019-12. Organization and performance of laboratory tests for yersiniosis on territorial, regional and federal levels: methodical guidelines [Organizaciya i provedenie laboratornyh issledovanij na iersiniozy na territorial’nom, regional’nom i federal’nom urovnyah: metodicheskie ukazaniya]. М.: Rospotrebnadzor Federal Centre for Hygiene and Epidemiology, 2012 (in Russian).Налепова М. Ю., Конев А. В., Трапезников С. В. Сравнительная оценка лабораторных методов индикации Y. enterocolitica от свиней // Ветеринария сельскохозяйственных животных. – 2006. – № 3. – С. 35–38.Nalepova M. Yu., Konev A. V., Trapeznikov S. V. Comparative assessment of Y. enterocolitica laboratory identification methods in pigs [Sravnitel’naya ocenka laboratornyh metodov indikacii Y. enterocolitica ot svinej]. Veterinarija sel’skohozjajstvennyh zhivotnyh. 2006; 3: 35–38 (in Russian).О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2014 году: государственный доклад. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2015. – 206 с.Public Health and Hygiene in the Russian Federation in 2014: state report [O sostoyanii sanitarno-epidemiologicheskogo blagopoluchiya naseleniya v Rossijskoj Federacii v 2014 godu: gosudarstvennyj doklad]. М.: Federal Service for Consumer Rights and Human Welfare Protection, 2015 (in Russian).О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2015 году: государственный доклад. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2016. – 200 с.Public Health and Hygiene in the Russian Federation in 2015: state report [O sostoyanii sanitarno-epidemiologicheskogo blagopoluchiya naseleniya v Rossijskoj Federacii v 2015 godu: gosudarstvennyj doklad]. М.: Federal Service for Consumer Rights and Human Welfare Protection, 2016 (in Russian).О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2016 году: государственный доклад. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2017. – 200 с.Public Health and Hygiene in the Russian Federation in 2016: state report [O sostoyanii sanitarno-epidemiologicheskogo blagopoluchiya naseleniya v Rossijskoj Federacii v 2016 godu: gosudarstvennyj doklad]. М.: Federal Service for Consumer Rights and Human Welfare Protection, 2017 (in Russian).Смирнов И. В. Возбудитель иерсиниоза и близкие к нему микро¬организмы // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. – 2004. – Т. 6, № 1. – С. 10–21.Smirnov I. V. Yersiniosis agent and related microorganisms [Vozbuditel’ iersinioza i blizkie k nemu mikroorganizmy]. Klinicheskaya microbiologia i antimikrobnaya khimioterapia. 2004; 6 (1): 10–21 (in Russian).Современная характеристика активности природных очагов зоонозных инфекций Крыма / А. В. Москалев, П. В. Астапенко, В. Я. Ап¬чел, О. Г. Цинцадзе // Вестник российской военно-медицинской академии. – 2016. – № 3 (55). – С. 117–121.Current characteristics of zoonotic infection natural niduses activity in Crimea [Sovremennaya harakteristika aktivnosti prirodnyh ochagov zoonoznyh infekcij Kryma]. А. V. Moskalev, P. V. Astapenko, V. Ya. Ap¬chel, O. G. Tsintsadze. Vestnik rossiyskoi voenno-meditsinskoi akademii. 2016; 3 (55): 117–121 (in Russian).СП 3.1.094-96, ВП 13.3.1318-96. Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Иерсиниозы: утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ 18.06.96 № 23, Госкомсанэпиднадзором РФ 31.05.96 № 11. – М., 1996. – 9 с.SP 3.1.094-96, VP 13.3.1318-96. Prevention and control of infectious diseases, common for humans and animals. Yersiniosis [Profilaktika i bor’ba s zaraznymi boleznyami, obshchimi dlya cheloveka i zhivotnyh. Iersiniozy]: approved by Veterinary Department of the RF Ministry of Agriculture and Food 18.06.96 No. 23. State Committee on Sanitary and Epidemiology Sur-veillance 31.05.96 No. 11. М., 1996 (in Russian).СП 3.1.7.2615-10. Профилактика иерсиниоза: санитарно-эпидемиологические правила. – М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010. – 19 с.SP 3.1.7.2615-10. Yersiniosis prevention: sanitary and epidemiological rules [Profilaktika iersinioza: sanitarno-epidemiologicheskie pravila]. М.: Rospotrebnadzor Federal Centre for Hygiene and Epidemiology, 2010 (in Russian).Спиряхина Т. В. Сравнительное изучение штаммов Yersinia enterocolitica различного происхождения: автореф. дис. … канд. биол. наук. – Саратов, 2006. – 23 с.Spiryakhina T. V. Comparative study of Yersinia enterocolitica strains of different origin [Sravnitel’noe izuchenie shtammov Yersinia enterocolitica razlichnogo proiskhozhdeniya]: author’s abstract Thesis of candidate of sciences (Biology). Saratov, 2006 (in Russian).Ткаченко Л. И., Ртищева Л. В., Киселева Т. Ф. Диагностика иерсиниоза в амбулаторных условиях // Инфекции, обусловленные иерсиниями: материалы II Всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием. – СПб.: НИИЭМ им. Пастера, 2006. – С. 132–134.Tkachenko L. I., Rtischeva L. V., Kiseleva T. F. Yersiniosis diagnostics in clinics [Diagnostika iersinioza v ambulatornyh usloviyah]. Yersinia related infections: proceedings of II All Russian scientific and practical conference with participation of foreign specialists. SPb: Saint-Petersburg Pasteur Institute, 2006; 132–134 (in Russian).ТР ТС 021/2011. О безопасности пищевой продукции: утв. решением комиссии Таможенного союза 09.12.2011 № 880. – 218 с.TR CU 021/2011. Food safety: approved by Customs Union Commission on 09.12.2011 No. 880.Шустрова Н. М., Мисуренко Е. Н., Литвин В. Ю. О возможности передачи Yersinia pseudotuberculosis по цепочке почва–растение–животное // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 1992. – № 4. – С. 10–12.Shustrova N. M., Misurenko Ye. N., Litvin V. Yu. Potential of Yersinia pseudotuberculosis transmission along soil–plant–animal chain [O vozmozhnosti peredachi Yersinia pseudotuberculosis po cepochke pochva–rastenie–zhivotnoe]. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology [Žurnal mikrobiologii, èpidemiologii i immunobiologii]. 1992; 4: 10–12 (in Russian).Энтеробактерии (руководство для врачей) / И. В. Голубева, В. А. Килессо, Б. С. Киселева [и др.]; под ред. В. И. Покровского. – М.: Медицина, 1985. – 320 с.Enterobacteria (Doctor’s guide) [Enterobakterii (rukovodstvo dlya vrachej)]. I. V. Golubeva, V. A. Kilesso, B. S. Kiseleva [et al.]; ed. by V. I. Pokrovsky. М.: Meditsina, 1985 (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.