veterinaryВетеринария сегодняVeterinary Science Today2304-196X2658-6959"Veinard"10.29326/2304-196X-2018-3-26-13-16veterinary-369Research ArticleБОЛЕЗНИ СВИНЕЙPORCINE DISEASESНЕПРЯМОЙ ВАРИАНТ ИФА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К НЕСТРУКТУРНЫМ БЕЛКАМ ВИРУСА ЯЩУРА В СЫВОРОТКАХ КРОВИ СВИНЕЙINDIRECT ELISA FOR DETECTION OF ANTIBODIES TO FMDV NON-STRUCTURAL PROTEINS IN PORCINE SERAЯковлеваА. С.YakovlevaA. S.

Старший научный сотрудник, кандидат биологических наук,

г. Владимир

Senior Researcher, Candidate of Science (Biology),

Vladimir

yakovleva_as@arriah.ruКаньшинаА. В.KanshinaA. V.

Старший научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук, 

г. Владимир

Senior Researcher, Candidate of Science (Veterinary Medicine),

Vladimir

kanshina@arriah.ruЩербаковА. В.ScherbakovA. V.

Заведующий лабораторией, кандидат биологических наук, 

г. Владимир

Head of Laboratory, Candidate of Science (Biology),

Vladimir

ascherbakov@arriah.ruФГБУ «ВНИИЗЖ», г. ВладимирРоссияFGBI "ARRIAH", VladimirRussian Federation201828092018031320Copyright © Яковлева А.С., Каньшина А.В., Щербаков А.В., 20182018Яковлева А.С., Каньшина А.В., Щербаков А.В.Yakovleva A.S., Kanshina A.V., Scherbakov A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://veterinary.arriah.ru/jour/article/view/369

Разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа, предназначенный для выявления антител к неструктурным белкам вируса ящура в сыворотках крови свиней. В процессе валидации показано, что разработанный метод отличается высокой чувствительностью, специфичностью и воспроизводимостью. При тестировании панели сывороток крови, полученных от экспериментально зараженных животных, метод позволил обнаружить антитела к вирусу ящура в 7 из 18 сывороток, отобранных на 6-й день после инфицирования, в 13 из 19 – на 7-й день после инфицирования, в 16 из 19 – на 8-й день после инфицирования и во всех 76 сыворотках, отобранных на 9–12-й день после инфицирования. Диагностическая специфичность 3АВ-ИФА составила 100% при тестировании 100 заведомо отрицательных сывороток крови свиней, завезенных в РФ из Норвегии. Высокая специфичность и чувствительность метода, установленные на этапе разработки метода, подтверждены при проведении рутинных диагностических исследований.

An indirect variant of ELISA used for detection of antibodies to nonstructural proteins of the FMD virus in porcine blood sera was developed. The results of the validation showed that the developed method is characterized by high sensitivity, specificity and reproducibility. When testing the blood serum panel obtained from experimentally infected animals, the method allowed to detect antibodies to FMD virus in 7 of 18 sera collected on day 6 post inoculation, in 13 of 19 sera – on day 7 post inoculation, in 16 of 19 sera – on day 8 post inoculation and in all 76 sera obtained on days 9–12 post inoculation. The diagnostic specificity of 3AB-ELISA was 100% when testing 100 knowingly negative blood sera from pigs imported to Russia from Norway. High specificity and sensitivity of the method, established during the development of the method, are confirmed in the course of routine diagnostic tests.

вирус ящуранеструктурные белкииммуноферментный анализFMD virusnon-structural proteinsELISA testReferencesМищенко А. В., Мищенко В. А., Караулов А. К. Ящур свиней в Приморском крае // Ветеринария. – 2015. – № 8. – С. 15–17.Mischenko А. V., Mischenko V. А., Karaulov А. К. Porcine FMD in the Primorsky Krai. Veterinariya. 2015; 8: 15–17 (in Russian).Разработка и валидация тест-системы 3АВ-ИФА для обнаружения антител к неструктурным белкам вируса ящура в сыворотках крови крупного и мелкого рогатого скота / А. С. Яковлева, А. В. Каньшина, А. В. Щербаков, Е. С. Орлова // Ветеринария сегодня. – 2015. – № 4 (15). – С. 36–42.Development and validation of 3AB-ELISA for the detection of antibodies to non-structural proteins of FMD virus in sera from cattle and small ruminants. А. S. Yakovleva, А. V. Kanshina, А. V. Shcherbakov, Ye. S. Orlova. Veterinary Science Today. 2015; 4 (15): 36–42 (in Russian).Рекомбинантные неструктурные белки 3А, 3В и 3АВ вируса ящура: использование для дифференциации вакцинированного и инфицированного крупного рогатого скота / А. С. Яковлева, А. В. Щербаков, А. В. Каньшина [и др.] // Молекулярная биология. – 2006. – Т. 40, № 1. – С. 165–171.Recombinant FMDV non-structural proteins 3А, 3В and 3АВ: use for differentiation of vaccinated and infected cattle / А. S. Yakovleva, А. V. Shcherbakov, А. V. Kanshina [et al.]. Molecular Biology. 2006; 40 (1): 165–171 (in Russian).Решение об установлении статусов регионов Российской Федерации по заразным болезням животных и условиях перемещения подконтрольных Госветнадзору товаров. – URL: http://www.fsvps.ru/fsvps/regional (дата обращения: 13.03.18).Decision on establishing statuses of the Russian Federation regions with regard to contagious animal diseases as well as conditions of movement of regulated goods. URL: http://www.fsvps. ru/fsvps/regional (reference date: 13.03.18) (in Russian).An overview on ELISA techniques for FMD / L. N. Ma, J. Zhang, H. T. Chen [et al.] // Virol. J. – 2011. – Vol. 8:419. – URL: https://doi.org/10.1186/1743-422X-8-419 (дата обращения: 13.03.18).An overview on ELISA techniques for FMD. L. N. Ma, J. Zhang, H. T. Chen [et al.]. Virol. J. 2011; 8:419. URL: https://doi. org/10.1186/1743-422X-8-419 (reference date: 13.03.18).Foot-and-mouth disease. – URL: http://www.oie.int/fileadmin/home/eng/animal_health_in_the_world/docs/pdf/disease_cards/foot_and_mouth_disease.pdf (дата обращения: 13.03.18).Foot-and-mouth disease. URL: http://www.oie.int/fileadmin/home/eng/animal_health_in_the_world/docs/pdf/disease_cards/foot_and_mouth_disease.pdf (reference date: 13.03.18).Principles and methods of validation of diagnostic assays for infectious diseases // Manual of Diagnostic Tests for Aquatic Animals / OIE. – 2018. – Chap. 1.1.1. – URL: http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/aahm/current/chapitre_validation_diagnostics_assays.pdf (дата обращения: 15.03.18).Principles and methods of validation of diagnostic assays for infection disease. Manual of Diagnostic Tests for Aquatic Animals. OIE. 2018. Chap. 1.1.1. URL: http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/aahm/current/chapitre_validation_diagnostics_assays.pdf (reference date: 15.03.18).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.